宮頸癌組織中p57KIP2及p27KIP1在表達及預(yù)后的臨床觀察

胡群志 鄧小金

(1.湖南省婁底市第二人民醫(yī)院; 2.湖南省婁底市中心醫(yī)院 湖南婁底 417000)

隨著醫(yī)院檢測技術(shù)快速發(fā)展,在婦科腫瘤中宮頸癌的臨床診斷中亦較前有了較大的進步。p57KIP2及p27KIP1為新近被研究發(fā)現(xiàn)的抑癌基因CIP／KIP家族成員之一,其主要是通過負調(diào)控細胞周期而實現(xiàn)調(diào)節(jié)作用,異常性表達與腫瘤發(fā)展及形成成正性關(guān)系[1]。截取我院2009年5月至2010年12月共50例宮頸癌組織行研究。現(xiàn)匯報如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

截取我院2009年5月至2010年12月共90塊存檔用蠟塊資料,其中宮頸癌(腫瘤組):50例;上皮內(nèi)瘤變組織(瘤變組)20例;正常組織(正常組)20例。腫瘤組:臨床分期,30例I期,18例Ib1期,12例Ib2期;20例lI期,16例IIa期,4例IIb期;10例高分化癌,40例中低度分化;35例鱗癌,15例腺癌;20例伴周圍淋巴組織結(jié)轉(zhuǎn)移,30例未轉(zhuǎn)移;19例腫瘤直徑＞4cm,小于者31例;瘤變組:因上皮瘤變行組織切除者20例;正常組:因良性病變需行組織切除者20例。以上病理切片均由2名病理學(xué)相關(guān)檢測人員行專業(yè)診斷,并結(jié)合患者臨床癥狀,確保結(jié)果準確率。3組患者間臨床資料間差異行統(tǒng)計檢驗提示差異對本組研究無干擾性意義。

1.2 干預(yù)方法

予福爾馬林液對組織石蠟包埋固定后制成厚度4pm連續(xù)切片,行免疫組化研究,空白對照予TBS代替一抗,予即用型二步檢查試劑盒采用二步法免疫組化對p57KIP2;及p27KIP1行檢測。切片脫蠟浸泡予檸檬酸(0.01mol/L)緩沖液并以高壓高溫行抗原修復(fù),及相應(yīng)一抗4℃孵育12h。

表1 不同組織中p57KIP2、p27KIP1表達關(guān)系比較情況

表2 不同病理學(xué)特征p57KIP2、p27kip1表達關(guān)系比較情況

圖1

圖2

圖3

圖4

1.3 評價標準

對入選本研究的90例標本,不同組織中p57KIP2、p27KIP1表達關(guān)系;不同病理學(xué)特征p57KIP2、p27KIP1表達關(guān)系;50例宮頸癌患者中p57KIP2、p27KIP1與預(yù)后關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

將本例研究所涉及數(shù)據(jù)錄入SPSS 13.0行相關(guān)匹配數(shù)據(jù)分析,如結(jié)果提示P<0.05,差異存統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組織中p57KIP2、p27KIP1表達關(guān)系比較情況

p57KIP2中正常組與瘤變組:χ2=1.11,P>0.05;正常組與腫瘤組:χ2=4 0.14,P<0.0 5;瘤變組與腫瘤組:χ2=31.96,P<0.0 5。p27kip1中正常組與瘤變組:χ2=0.22,P>0.05;正常組與腫瘤組:χ2=29.16,P<0.05;瘤變組與腫瘤組:χ2=25.47,P<0.05,詳見表1。圖1:腫瘤組患者中p57KIP2染色后顯示圖像;圖2:腫瘤組p27KIP1染色后顯示圖像。

2.2 不同病理學(xué)特征p57KIP2、p27KIP1表達關(guān)系比較情況

詳見表2。圖3:本組患者中組織學(xué)顯示為鱗癌患者切片圖像截取顯示;圖4:本組患者中組織學(xué)顯示為腺癌患者切片圖像截取顯示。

3 討論

(1)腫瘤發(fā)生是受復(fù)雜生物影響因素過程,近年學(xué)者觀點認為細胞生長周期失調(diào)為體內(nèi)腫瘤發(fā)生的重要關(guān)鍵點。而CDK則為調(diào)節(jié)細胞周期的核心性裝置,另底物R蛋白行磷酸化,促進G1～S及G2～M期中的轉(zhuǎn)換速度;CDK對細胞周期素存正性調(diào)控作用,反向細胞周期素亦激活CDK活性;CDKI為CDK負性作用調(diào)控因子,使CDK活性降低,兩者間對細胞周期起共同調(diào)控作用。,對CDKl據(jù)功能、結(jié)構(gòu)特點分為INK4、CIP／KI兩大家族。INK4主要為p18、p16、p15及p19;CIP／KIP主要為p57KIP2及p27KIP1,這兩者間有結(jié)構(gòu)同源性,對各種周期素存非特異性抑制作用。p57KIP2及p27KIP1為抑制細胞增殖及抑制腫瘤基因,如對其功能產(chǎn)生破壞必將導(dǎo)致腫瘤生長及臨床預(yù)后效果的不滿意。

(2)筆者結(jié)合最近文獻提示p57KIP2及p27KIP1為新近的CDKI,主要功能為細胞生長參與、分化活動、凋亡過程,在細胞周期中行負性調(diào)控作用[2]。p57KIP2及p27KIP1在分子學(xué)水平中提示其N末端具50%同源性,且結(jié)構(gòu)中含CDK結(jié)合位點,起抑制周期素-CDK復(fù)合物活性作用,調(diào)控G1／S期轉(zhuǎn)化速率,使細胞生長過程停滯在G1期。

(3)p57KIP2及p27KIP1調(diào)控細胞周期主要依賴蛋白表達水平,且p57KIP2及p27KIP1定位在宮頸正常上皮細胞及病例陽性細胞核中,與基底層表達弱,中間、淺表層表達高,結(jié)合本組例研究,p57KIP2。正常組、瘤變組、腫瘤組陽性率分別為:95%、85%、14%;p27KIP1:正常組、瘤變組、腫瘤組陽性率分別為:90%、85%、20%,具腫瘤抑制基因的特征產(chǎn)物。正常組、瘤變組、腫瘤組p57KIP2及p27KIP1陰性表達成逐漸下降趨勢,行統(tǒng)計檢驗提示,P均＜0.05。p57KIP2及p27KIP1陰性表達高者發(fā)生腫瘤幾率明顯高于陰性表達率低患者。

(4)據(jù)本組例研究。p57KIP2及p27KIP1低水平表達或完全缺失易對調(diào)控細胞周期造成紊亂從誘導(dǎo)官頸癌發(fā)生。p57KIP2及p27KIP1均為新近發(fā)現(xiàn)的抑癌基因,在國內(nèi)外報道中提示在軟組織肉瘤、肺癌、甲狀腺癌、膀胱癌、乳腺癌中的異常水平表達有報道,而婦科腫瘤研究尚不多,筆者結(jié)合臨床工作及本組例研究,在宮頸癌患者中p57KIP2及p27KIP1的異常表達與腫瘤大小、組織高中低分化度、患者預(yù)后情況關(guān)聯(lián)度較大。據(jù)K Sakai等[3]文獻報道,p57KIP2較p27KIP效果更加明確的提示宮頸癌細胞凋亡內(nèi)在遞呈關(guān)系。

(5)筆者聯(lián)系本研究提示。宮頸癌組織中p57KIP2及p27KIP1表達強度,在病變直徑<4cm陰性率均為67.74%;腫瘤直徑≥4cm陰性率均為93.75%;在低中度惡性組織中陰性率分別為50%、40%;在高度惡性組織中陰性率均為12.5%;隨著患者病變處惡性程度的逐漸性升高及腫瘤直徑的增大呈現(xiàn)降低,經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗提示,P均＜0.05,差異具統(tǒng)計學(xué)意義。在臨床分型及組織學(xué)類型中,2組間比較差異行統(tǒng)計檢驗分型差異無意義。

（6）綜上所述,p57KIP2及p27KIP1在宮頸癌病情發(fā)展中具有重要作用,p57KIP2及p27KIP1缺失及低表達均對患者腫瘤情況及危險度預(yù)后有相當(dāng)程度的影響,臨床檢驗中對宮頸癌患者的檢測中應(yīng)提高關(guān)注度。

[1] 馬驥.細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑與腫瘤相關(guān)性的研究進展[J].中國腫瘤生物治療雜志,2009,16(3):315～318.

[2] J J Tang,C Shen,Y. J Lu.Requirement for pre-existing of p21 to prevent doxorubicin-induced apoptosis through inhibition of caspase-3 activation[J]. Molecular and Cellular Biochemistry,2006,291(1～2):89～90.

[3] K Sakai,A Peraud,T Mainprize,et al.Inducible Expression of p57 KIP2 Inhibits Glioma Cell Motility and Invasion[J].Journal of Neuro-Oncology,2004,68(3):111.