金麻杏片化痰止咳平喘作用研究

劉國(guó)君 牛麗穎 王鑫國(guó)

(河北省唐山市豐潤(rùn)區(qū)中醫(yī)醫(yī)院藥劑科，河北 豐潤(rùn) 064000)

金麻杏片化痰止咳平喘作用研究

劉國(guó)君 牛麗穎1王鑫國(guó)1

(河北省唐山市豐潤(rùn)區(qū)中醫(yī)醫(yī)院藥劑科，河北 豐潤(rùn) 064000)

目的 觀察金麻杏片的化痰、止咳、平喘作用，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法 取昆明種雄性小鼠50只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，金麻杏片低、中、高劑量(生藥為2、4、8 g/kg)組及復(fù)方甘草片(生藥為0.4 g/kg)組，每組各10只，空白對(duì)照組予0.2 mL/10 g純凈水灌胃，其余各組予相應(yīng)藥液灌胃，每日1次，連續(xù)7 d，用氣管段酚紅排泌量測(cè)定法，觀察其化痰作用。取昆明種雄性小鼠50只，分組及給藥方法、劑量同上，采用氨水致小鼠咳嗽方法來(lái)評(píng)價(jià)其鎮(zhèn)咳作用。取豚鼠50只，隨機(jī)分為空白對(duì)照組，金麻杏片低、中、高劑量(生藥為1.5、3、6 g/kg)及桂龍咳喘寧膠囊(生藥為1 g/kg)組，空白對(duì)照組予0.1 mL/10 g純凈水灌胃，其余各組予相應(yīng)藥液灌胃，每日1次，連續(xù)7 d，采用2%氯化乙酰膽堿－0.1%磷酸組織胺混合液致豚鼠哮喘方法，觀察其平喘作用。結(jié)果 金麻杏片低、中、高劑量組及復(fù)方甘草片組吸光度(OD)值均明顯高于空白對(duì)照組(P＜0.01，P＜0.05)。金麻杏片低、中、高劑量組及復(fù)方甘草片組小鼠咳嗽潛伏期均較空白對(duì)照組延長(zhǎng)(P ＜0.05，P ＜0.01)，3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)減少(P ＜0.05，P ＜0.01)。金麻杏片低、中、高劑量組及桂龍咳喘寧膠囊組給藥后引喘潛伏期與本組治療前比較明顯延長(zhǎng)(P＜0.01)，且與空白對(duì)照組給藥后比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。結(jié)論 金麻杏片具有一定化痰、止咳、平喘作用。

黃芩;枇杷葉;止咳化痰平喘藥;動(dòng)物，實(shí)驗(yàn);疾病模型，動(dòng)物

急、慢性氣管、支氣管炎為臨床常見(jiàn)病、多發(fā)病，以咳、痰、喘為主要臨床表現(xiàn)。金麻杏片為在臨床應(yīng)用的基礎(chǔ)上研發(fā)的六類(lèi)中藥新藥，功能清肺化痰、止咳平喘，治療急、慢性氣管、支氣管炎效果顯著。為評(píng)價(jià)金麻杏片化痰、止咳、平喘作用，我們進(jìn)行了藥效學(xué)研究，為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)昆明種雄性小鼠100只，體質(zhì)量18～22 g，動(dòng)物合格證號(hào):607082;清潔級(jí)豚鼠60只，雌雄各半，體質(zhì)量180～210 g，動(dòng)物合格證號(hào):607081，均由河北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。飼養(yǎng)環(huán)境:室溫20～23℃，相對(duì)濕度45% ～60%，籠具用過(guò)氧乙酸溶液消毒，飲用水為凈化水。

1.1.2 藥物及試劑 金麻杏片浸膏(批號(hào)060801，生藥含量2.5 g/mL)，由承德燕峰藥業(yè)有限責(zé)任公司提供;復(fù)方甘草片(南京白敬宇制藥有限責(zé)任公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H32024076，批號(hào)060102)，桂龍咳喘寧膠囊［桂龍藥業(yè)(安徽)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字 Z20053135，批號(hào)061205］;酚紅(化學(xué)純)，軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生產(chǎn)，實(shí)驗(yàn)時(shí)用0.9%氯化鈉注射液配置成5%酚紅氯化鈉溶液備用;氨水(分析純)，天津市化學(xué)試劑三廠生產(chǎn);0.1%磷酸組胺，上海生化所東風(fēng)生化技術(shù)公司生產(chǎn);2%對(duì)氯化乙酰膽堿，上海達(dá)瑞精細(xì)化學(xué)品有限公司生產(chǎn)。

1.1.3 儀器 超聲物化器(JWC－201D型，鞍山市同信醫(yī)用儀器廠)，分光光度計(jì)(722型，上海第三分析儀器廠)。

1.3 方法

1.3.1 對(duì)小鼠酚紅排出量的影響 實(shí)驗(yàn)方法參照文獻(xiàn)［1］，取昆明種雄性小鼠50只，隨機(jī)分為5組，即空白對(duì)照組、金麻杏片低劑量組、金麻杏片中劑量組、金麻杏片高劑量組及復(fù)方甘草片組，每組各10只。金麻杏片低、中、高劑量組分別按生藥2(相當(dāng)于成人臨床用量的4.5倍)、4(相當(dāng)于成人臨床用量的9倍)、8 g/kg(相當(dāng)于成人臨床用量的18倍)及復(fù)方甘草片組按生藥0.4 g/kg(相當(dāng)于成人臨床用量的18倍)，容量按0.2 mL/10 g灌胃給藥;空白對(duì)照組予等容積純凈水灌胃。均每日1次，連續(xù)7 d。末次給藥后30 min，各組小鼠予5%酚紅氯化鈉溶液0.1 mL/10 g腹腔注射。30 min后處各組小鼠，剝?nèi)夤苤車(chē)M織，剪下自甲狀軟骨下至氣管分支處的一段氣管，放進(jìn)盛有0.9%氯化鈉注射液2 mL的試管中，再加1 mol/L NaOH溶液0.1 mL，用722型分光光度計(jì)(波長(zhǎng)546 nm)測(cè)吸光度(OD)值(OD值大小表示酚紅排泌量的多少，OD值大表示酚紅排泌量多)［1］。

1.3.2 對(duì)氨水致小鼠咳嗽的影響 實(shí)驗(yàn)方法參照文獻(xiàn)［2］，取昆明種雄性小鼠50只，分組及給藥方法同1.3.1項(xiàng)，末次給藥后30 min，分別將各組小鼠置于倒置的500 mL燒杯中，內(nèi)放一棉球，用1 mL注射器吸取氨水0.2 mL注入棉球中，迅速倒置燒杯，以免氣體泄漏，觀察和記錄小鼠咳嗽潛伏期及3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)［2］。

1.3.3 對(duì)氯化乙酰膽堿－磷酸組胺致豚鼠哮喘的影響實(shí)驗(yàn)方法參照文獻(xiàn)［2］，將60只豚鼠于密閉容器內(nèi)，連接超聲霧化器，將2%氯化乙酰膽堿和0.1%磷酸組胺等容積混合液50 mL注入霧化罐內(nèi)，噴入容器，氣霧發(fā)生濃度調(diào)節(jié)至最大，持續(xù)15 s，觀察豚鼠從接受?chē)婌F到發(fā)生抽搐跌倒的引喘潛伏期，選擇90 s內(nèi)出現(xiàn)哮喘的豚鼠50只，隨機(jī)分為5組，即空白對(duì)照組、金麻杏片低劑量組、金麻杏片中劑量組、金麻杏片高劑量組及桂龍咳喘寧膠囊組。金麻杏片低、中、高劑量組分別按生藥1.5 g/kg(相當(dāng)于成人臨床用量的3.5倍)、3 g/kg(相當(dāng)于成人臨床用量的7倍)、6 g/kg(相當(dāng)于成人臨床用量的14倍)及桂龍咳喘寧膠囊組1 g/kg(相當(dāng)于成人臨床用量的14倍)，容量按0.1 mL/10 g灌胃給藥;空白對(duì)照組予等容積純凈水灌胃。均每日1次，連續(xù)7 d。末次給藥后30 min，再次按上述方法噴霧引喘15 s，記錄豚鼠引喘潛伏期，觀察6 min，超過(guò)6 min仍未抽搐昏倒者，引喘潛伏期以6 min計(jì)［2］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 各組小鼠OD值比較 見(jiàn)表1。

表1 各組小鼠OD值比較±s

表1 各組小鼠OD值比較±s

與空白對(duì)照組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01

組 別 n OD值10 0.064 ±0.033金麻杏片低劑量組 10 0.140 ±0.024＊＊金麻杏片中劑量組 10 0.122 ±0.064*金麻杏片高劑量組 10 0.160 ±0.031＊＊復(fù)方甘草片組 10 0.165 ±0.029空白對(duì)照組＊＊

由表1可見(jiàn)，金麻杏片低、中、高劑量組及復(fù)方甘草片組OD值均明顯高于空白對(duì)照組 (P＜0.01，P＜0.05)。

2.2 各組小鼠咳嗽潛伏期及3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)比較 見(jiàn)表2。

表2 各組小鼠咳嗽潛伏期及3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)比較s，±s

表2 各組小鼠咳嗽潛伏期及3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)比較s，±s

與空白對(duì)照組比較，*P ＜0.05，＊＊P ＜0.01

組 別 n 咳嗽潛伏期(s) 3 min內(nèi)咳嗽次數(shù)(次)10 14.8 ±5.53 28.3 ±15.92金麻杏片低劑量組 10 24.4 ±12.69* 14.1 ±4.60*金麻杏片中劑量組 10 53.6±17.63＊＊ 9.6±5.44＊＊金麻杏片高劑量組 10 26.0 ±11.67* 10.8 ±5.61＊＊復(fù)方甘草片組 10 41.2±16.14＊＊ 13.6±7.49空白對(duì)照組*

由表2可見(jiàn)，金麻杏片低、中、高劑量組及復(fù)方甘草片組小鼠咳嗽潛伏期均較空白對(duì)照組延長(zhǎng)(P＜0.05，P＜0.01)，3 min 內(nèi)咳嗽次數(shù)減少(P ＜0.05，P ＜0.01)。

2.3 各組豚鼠給藥前后引喘潛伏期比較見(jiàn)表3。

表3 各組豚鼠給藥前后引喘潛伏期比較s，±s

表3 各組豚鼠給藥前后引喘潛伏期比較s，±s

與本組給藥前比較，*P＜0.01;與空白對(duì)照組比較，△P＜0.01

組 別 n 引喘潛伏期給藥前 給藥后空白對(duì)照組10 45.2 ±11.84 49.4 ±10.98金麻杏片低劑量組 10 44.7 ±8.77 126.5 ±40.48＊△金麻杏片中劑量組 10 43.1 ±8.22 165.6 ±58.50＊△金麻杏片高劑量組 10 42.7 ±11.83 223.2 ±76.83＊△桂龍咳喘寧膠囊組 10 48.4 ±11.78 217.8 ±75.06＊△

由表3可見(jiàn)，各藥物組給藥前豚鼠引喘潛伏期與空白對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。金麻杏片低、中、高劑量組及桂龍咳喘寧膠囊組給藥后引喘潛伏期與本組治療前比較均明顯延長(zhǎng)(P＜0.01)，且與空白對(duì)照組給藥后比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。

3 討論

急、慢性氣管、支氣管炎屬于中醫(yī)學(xué)咳嗽、痰飲、喘證等范疇。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，肺為嬌臟，風(fēng)寒或風(fēng)熱外襲，首先犯肺，肺失宣肅則留飲，衛(wèi)陽(yáng)郁閉則蘊(yùn)熱，飲熱互結(jié)，形成痰熱阻肺之證。故治宜清瀉肺熱，化痰祛邪，宣降肺氣，使熱清痰化、肺宣氣順，方能取效。金麻杏片主要由黃芩、枇杷葉、麻黃、杏仁、前胡、桑白皮、瓜蔞、竹茹、桔梗、金銀花組成。方中黃芩清瀉肺熱，祛火解毒;枇杷葉清肺止咳，降逆止嘔，二者均味苦性寒，相須配伍，起到清宣肺熱、化痰止咳的作用，共為君藥。麻黃開(kāi)宣肺氣，杏仁降氣平喘，二藥相合，一升一降，宣降肺氣，止咳平喘;前胡可散風(fēng)清熱，降氣化痰;桑白皮可瀉肺平喘，清肺化痰，四藥合用，加強(qiáng)君藥清宣肺熱、化痰止咳平喘的作用，共為臣藥。佐以瓜蔞清熱滌痰，寬胸散結(jié);竹茹清熱化痰，除煩止嘔;桔梗宣肺利咽，祛痰止咳;金銀花清熱解毒，涼散風(fēng)熱，以共同加強(qiáng)清熱瀉火、肅降肺氣、清肺化痰的作用。諸藥合用，共奏清肺瀉熱、化痰止咳、降氣平喘之功。

喘息、咳嗽、咳痰是急、慢性支氣管炎的主要臨床癥狀。本實(shí)驗(yàn)采用經(jīng)典的氣管酚紅排泌量測(cè)定、氨水致小鼠咳嗽以及氯化乙酰膽堿－磷酸組胺致哮喘方法［2］來(lái)評(píng)價(jià)金麻杏片的化痰、止咳、平喘作用。酚紅是一種顯示劑，腹腔注射后，可通過(guò)血液循環(huán)達(dá)到肺部，通過(guò)氣管的分泌作用在氣管壁檢測(cè)到酚紅，因此酚紅排泌量反映了氣管的排痰量。氨水揮發(fā)后，形成一種氣管刺激性氣體，可誘發(fā)咳嗽反應(yīng)，通過(guò)測(cè)量氨水致咳小鼠咳嗽潛伏期及咳嗽次數(shù)，可評(píng)價(jià)藥物的止咳作用。豚鼠是一種易致敏實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，2%氯化乙酰膽堿－0.1%磷酸組胺混合液可激發(fā)氣管炎癥反應(yīng)，誘發(fā)豚鼠哮喘發(fā)作［3］，檢測(cè)引喘潛伏期可評(píng)價(jià)藥物平喘作用。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，金麻杏片低、中、高3個(gè)劑量水平小鼠酚紅排泌量明顯增加，顯示出明顯的化痰作用;可明顯減少氨水致小鼠咳嗽次數(shù)，延長(zhǎng)咳嗽潛伏期。平喘實(shí)驗(yàn)也證明，金麻杏片能顯著延長(zhǎng)氯化乙酰膽堿－磷酸組胺混合噴霧誘發(fā)的哮喘潛伏期，有明顯的平喘作用。本實(shí)驗(yàn)為金麻杏片治療痰熱引起的急、慢性氣管、支氣管炎提供了基本的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，有關(guān)其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、作用機(jī)制及其他系統(tǒng)的藥理作用有待進(jìn)一步研究。

［1］ 陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1993:642－643.

［2］ 徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)［M］.2版.北京:人民衛(wèi)生出版社，1991:1165，719.

［3］ 羅世杰，唐志書(shū)，張玲，等.熱喘平口服液對(duì)支氣管哮喘豚鼠一氧化氮、腫瘤壞死因子－α、超氧化物歧化酶及丙二醛的影響［J］.河北中醫(yī)，2011，33(4):589 －591，594.

Study of Jinmaxing tablet for relieving cough and reducing sputum and asthma

LIU Guojun*，NIU Liying， WANG Xinguo.*Department of Pharmacy，F(xiàn)engrun District Hospital of Traditional Chinese Medicine of Tangshan in Hebei Province，Hebei，F(xiàn)engrun 064000

Objective To observe the effect of Jinmaxing tablet for preventing phlegm from forming and stopping coughing and asthma，and provide the experimental basis for clinical application.Methods 50 Kunming male mice were randomly divided into control group，Jinmaxing tablet low － ，middle－ ，high－dose group(crude drug for 2 g/kg，4 g/kg and 8 g/kg)and compound liquorice tablets group(crude drug for 0.4 g/kg).There were 10 mice in each group.Control

0.2 mL/10 g of pure water gavage.The rest of the group received corresponding liquid gavage once daily for 7 d.The role for eliminating sputum was evaluated by tracheal segment phenol red excretion assay.50 Kunming male mice were selected，and grouping and administration Methods ，dosage as above.The antitussive effect was evaluated by ammonia induced cough method.50 Guinea pigs were randomly divided into control group，Jinmaxing tablet low － ，middle － ，high － dose group(crude drug for 1.5 g/kg，3 g/kg and 6 g/kg)and Guilong Kechuanning Capsule group(crude drug for 0.4 g/kg).Control received 0.1 mL/10 g of pure water gavage.The rest of the group received corresponding liquid gavage once daily for 7 d.The anti－ asthmatic effect was observed by 2%acetylcholine chloride 0.1%histamine phosphate mixture induced asthmatic guinea pig method.Results OD values in Jinmaxing tablet low－，middle－，high－dose group and compound liquorice tablets group obviously higher than that in control group(P ＜0.01，P ＜0.05).Cough incubation period of mice in Jinmaxing tablet low － ，middle－ ，high－dose group and compound liquorice tablets group was prolonged compared with control group(P ＜0.05，P ＜0.01).Cause asthma incubation period after administration in Jinmaxing tablet low － ，middle － ，high － dose group and Guilong Kechuanning Capsule group was prolonged compared with those before treatment and control group(P ＜0.05，P ＜0.01).Conclusion Jinmaxing tablet has certain role for relieving cough and reducing sputum and asthma.

Scutellaria baicalensis;Antiasthmatic drugs for relieving cough and reducing sputum;Loquat leaf;Animal;Experiment

R285.5;R974.2;R283.64

A

1002－2619(2012)07－1068－03

1 河北醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院中藥藥理教研室，河北 石家莊050091

劉國(guó)君(1963—)，男，主管中藥師，學(xué)士。從事中藥藥劑學(xué)研究。

2012－03－13)