吳勝會(huì) 江 斌 林 琳 張世忠 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜禽水產(chǎn)疾病診療中心 福州 350026
鴨球蟲(chóng)病是一種引起雛鴨大批死亡的重要原蟲(chóng)病。近年來(lái),隨著家鴨飼養(yǎng)的規(guī)模化和集約化以及養(yǎng)殖環(huán)境的不斷惡化,該病的危害性日益顯現(xiàn)。在福建省,江漢梁等于1995年報(bào)道半番鴨溫?fù)P球蟲(chóng)病造成了30%的死亡率,給養(yǎng)殖戶(hù)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1];筆者于2005年報(bào)道半番鴨毀滅泰澤球蟲(chóng)病造成了11.5%的死亡率,給養(yǎng)殖戶(hù)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失[2]。鴨球蟲(chóng)在寄生蟲(chóng)分類(lèi)上隸屬于孢子蟲(chóng)綱、真球蟲(chóng)目、艾美耳科,在艾美耳科中又可分為艾美耳屬(Eimeria)、泰澤屬(Tyzzeria)、溫?fù)P屬(Wenyonella)和等孢屬(Isospora)四個(gè)屬共計(jì)20多種球蟲(chóng)種類(lèi),在我國(guó)廣大家鴨飼養(yǎng)地區(qū)都廣泛分布。為初步了解福建省家鴨球蟲(chóng)的致病蟲(chóng)種及其流行病學(xué),筆者對(duì)2011年9月至2012年8月間送檢到本中心的家鴨球蟲(chóng)病例進(jìn)行調(diào)查,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
1.1 球蟲(chóng)病例來(lái)源 從2011年9月1日到2012年8月31日,全省各地送檢到診療中心的鴨病例累計(jì)1558例,其中檢出鴨球蟲(chóng)病例106例,對(duì)每例球蟲(chóng)病記錄其送檢日期、來(lái)源、品種、數(shù)量、日齡、發(fā)病率和死亡率以及病變部位等,并對(duì)這些病例進(jìn)行進(jìn)一步的培養(yǎng)鑒定。
1.2 方法
1.2.1 卵囊分離培養(yǎng) 從剖檢患鴨的病變部位刮取內(nèi)容物和直腸糞便放在燒杯中,加入0.2%胃蛋白酶,將pH調(diào)至2.0,在39℃下消化1 h,使卵囊分散游離出來(lái),再依次用60目、200目網(wǎng)篩過(guò)濾,濾液經(jīng)2000 r/min離心10 min,沉淀,棄掉上清液,在沉淀物中加入1 M蔗糖溶液,再經(jīng)2000 r/min離心10 min,管上層漂浮的白色似“塞子狀”的物質(zhì)即為卵囊。將其移入2.5%重鉻酸鉀溶液中并在28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),每天觀察卵囊的孢子化情況。
1.2.2 蟲(chóng)種鑒定 用吸管吸取經(jīng)孢子化培養(yǎng)的卵囊液滴于載玻片上,加蓋片后置顯微鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)卵囊后在10×100倍下觀測(cè)蟲(chóng)卵內(nèi)部結(jié)構(gòu)及用測(cè)微尺測(cè)量50個(gè)孢子化卵囊及孢子囊大小,并依據(jù)相關(guān)資料作種類(lèi)鑒定。
2.1 檢出球蟲(chóng)種類(lèi) 在顯微鏡下觀測(cè)拍攝每個(gè)病例經(jīng)培養(yǎng)的50個(gè)鴨球蟲(chóng)孢子化卵囊,從106例相關(guān)病例中鑒定出3種致病球蟲(chóng),分別是毀滅泰澤球蟲(chóng)、菲萊氏溫?fù)P球蟲(chóng)和鴛鴦等孢球蟲(chóng)。現(xiàn)將它們的卵囊形態(tài)描述如下。
2.1.1 毀滅泰澤球蟲(chóng) 卵囊呈卵圓形,兩層壁、光滑,淡藍(lán)色,厚 0.7 μm,無(wú)卵膜孔。大小為(10.9~16.2)μm ×(10.1~11.9)μm,平均 13.2 μm×10.9 μm,形狀指數(shù)1.1。卵囊內(nèi)有8個(gè)游離的香蕉形子孢子,子孢子的寬端全部朝向殘?bào)w。窄端朝向卵囊的一端,大小為7.5 μm×2.5 μm,另一端有一個(gè)由大小顆粒組成的殘?bào)w。見(jiàn)圖1-圖2。

圖1 毀滅泰澤球蟲(chóng)卵囊

圖2 毀滅泰澤孢子化卵囊

圖3 菲萊氏溫?fù)P球蟲(chóng)卵囊

圖4 菲萊氏溫?fù)P球蟲(chóng)孢子化卵囊

圖5 鴛鴦等孢球蟲(chóng)卵囊

圖6 鴛鴦等孢球蟲(chóng)孢子化卵囊
2.1.2 菲萊氏溫?fù)P球蟲(chóng) 卵囊呈卵圓形,淡黃綠色,三層壁,厚1.6 μm,有一個(gè)寬2.5 μm的卵膜孔。大小為(16.8~20.4)μm×(11.5~15.5)μm,平均 18.4 μm×13.0 μm,形狀指數(shù)為 1.2~1.6,平均為 1.4。有 2 個(gè)極粒,無(wú)卵囊殘?bào)w。內(nèi)有4個(gè)瓜子形孢子囊,大小為7.5 μm×5.5 μm,每個(gè)孢子囊內(nèi)含4個(gè)子孢子。見(jiàn)圖3-圖4。
2.1.3 鴛鴦等孢球蟲(chóng)卵囊呈球形或亞球形,兩層壁、厚 1 μm,淡褐色,光滑,無(wú)卵膜孔。大小為(10.4~12.8)μm×(9.6~11.6)μm,平均 10.8 μm×11.9 μm,形狀指數(shù)1.1。有一個(gè)大極粒,無(wú)卵囊殘?bào)w。孢子囊呈仙桃形,有明顯的斯氏體和由粗顆粒組成的孢子囊殘?bào)w。見(jiàn)圖5-圖6。
2.2 不同種類(lèi)鴨球蟲(chóng)的檢出率 本次所調(diào)查的106例鴨球蟲(chóng)中感染單一毀滅泰澤球蟲(chóng)的病例為16例(占15.09%),單一菲萊氏溫?fù)P球蟲(chóng)的病例為13例(占12.26%),單一鴛鴦等孢球蟲(chóng)的病例為10例(占9.43%)。多種球蟲(chóng)混合感染為67例(占63.21%),其中毀滅泰澤球蟲(chóng)與菲萊氏溫?fù)P球蟲(chóng)混合感染24例(占22.64%),毀滅泰澤球蟲(chóng)與鴛鴦等孢球蟲(chóng)混合感染17例(占16.04%),菲萊氏溫?fù)P球蟲(chóng)與鴛鴦等孢球蟲(chóng)混合感染14例(占13.21%),三種球蟲(chóng)均有的混合感染病例為12例(占16.04%)。見(jiàn)表1。

表1 不同種類(lèi)鴨球蟲(chóng)檢出率
2.3 不同鴨品種的球蟲(chóng)檢出率 本次調(diào)查106份球蟲(chóng)病例,其中番鴨40例(占37.73%),半番鴨31例(占29.25%),麻鴨23例(占21.70%),北京鴨12例(占11.32%),其中番鴨的感染率最高。見(jiàn)表2。

表2 不同鴨品種的球蟲(chóng)檢出率
2.4 不同日齡鴨球蟲(chóng)的檢出率 本次調(diào)查106份球蟲(chóng)病例,其中16~50日齡段的病例有90個(gè)(占84.91%),該期間是鴨球蟲(chóng)的高發(fā)期,低于和高于該日齡段發(fā)病率較低。見(jiàn)表3。

表3 不同日齡鴨球蟲(chóng)的檢出率
2.5 鴨球蟲(chóng)病例與季節(jié)關(guān)系 一年四季均有鴨球蟲(chóng)病發(fā)生,但發(fā)病的高峰期在3~8月份,其中病例最多的是7月份。見(jiàn)圖7。

圖7 鴨球蟲(chóng)病例與季節(jié)關(guān)系
2.6 不同鴨球蟲(chóng)的腸道病變特點(diǎn)觀察 單純的鴨毀滅泰澤球蟲(chóng)病的腸道病變部位在十二指腸段和空腸段,其中十二指腸段黏膜出血最嚴(yán)重,并有明顯卡他性腸炎,空腸段以后出血逐漸減輕。鴨菲萊氏溫?fù)P球蟲(chóng)病的腸道病變主要集中在空腸后段和直腸段,其中空腸后段出現(xiàn)明顯的卡他性腸炎,腸黏膜出血。鴨鴛鴦等孢球蟲(chóng)病的腸道病變也集中在空腸后段和直腸段,其中空腸后段出現(xiàn)卡他性腸炎,腸黏膜出血,但腸道病變的嚴(yán)重程度不如溫?fù)P球蟲(chóng)病。混合感染的球蟲(chóng)病例在整個(gè)小腸黏膜都會(huì)有不同程度的出血和卡他性腸炎。
1)據(jù)國(guó)內(nèi)外資料報(bào)道,目前鴨(包括野鴨)已發(fā)現(xiàn)的球蟲(chóng)種類(lèi)有23種,其中有2種是腎球蟲(chóng),另外21種屬于腸球蟲(chóng)。寄生在家鴨體內(nèi)的共有17種,均為腸球蟲(chóng),它們分別是艾美耳屬、等孢屬、泰澤屬和溫?fù)P屬,此次調(diào)查發(fā)現(xiàn)的3種鴨球蟲(chóng)在分類(lèi)學(xué)上分別屬于泰澤屬、溫?fù)P屬和等孢屬的球蟲(chóng)[3]。從致病的嚴(yán)重程度看,3種鴨球蟲(chóng)以毀滅泰澤球蟲(chóng)致病力最強(qiáng),菲萊氏溫?fù)P球蟲(chóng)次之,鴛鴦等孢球蟲(chóng)較弱。葛亮在1999年報(bào)道龍海麻鴨感染菲萊氏盲腸溫?fù)P球蟲(chóng)亞種[4],但筆者到目前為止收集到的鴨球蟲(chóng)病例中未發(fā)現(xiàn)有球蟲(chóng)寄生在盲腸內(nèi)且出現(xiàn)致病的情況,至于在我省是否還有其他致病蟲(chóng)種,還有待做進(jìn)一步深入研究。
2)本次調(diào)查106例球蟲(chóng)病例,其中在16~50日齡段發(fā)病的占84.91%,說(shuō)明這個(gè)期間是鴨球蟲(chóng)的高發(fā)期。筆者分析原因有二個(gè)方面:第一,鴨球蟲(chóng)的蟲(chóng)卵在外界條件下需一段時(shí)間的孢子化過(guò)程,進(jìn)入鴨體后在小腸上皮細(xì)胞中也需3~5 d幾個(gè)世代的無(wú)性增殖后才會(huì)發(fā)病;第二,多數(shù)鴨子的早期育雛均在保溫窒內(nèi),很少接觸到孢子化卵囊,只有到野外(如池塘,河流等)才有機(jī)會(huì)接觸到孢子化卵囊而感染發(fā)病。針對(duì)這一情況,在生產(chǎn)實(shí)踐中一方面可改變鴨的飼養(yǎng)方式,改放牧為舍飼,并提倡網(wǎng)上飼養(yǎng),可有效地防范本病的發(fā)生。另一方面,在本病常發(fā)的鴨場(chǎng)或地區(qū),可在15~50日齡期間,定期使用抗球蟲(chóng)藥物進(jìn)行預(yù)防(如在飼料中按0.02%添加磺胺間氧嘧啶鈉粉或按0.05%飼料添加磺胺喹噁啉鈉或按0.025%添加磺胺氯吡嗪鈉等藥物,連用3 d)。在臨床上為了提高治療效果,也可使用二種抗球蟲(chóng)藥聯(lián)合使用。
3)鴨球蟲(chóng)病可導(dǎo)致明顯的腸出血和卡他性腸炎病變,但在臨床上還有一些疾病(如禽霍亂、大腸桿菌病、禽流感、某些藥物中毒等)也會(huì)導(dǎo)致類(lèi)似的病變,需進(jìn)行鑒別診斷。球蟲(chóng)病可通過(guò)對(duì)病變部位的鏡檢,檢出大量裂殖子和卵囊來(lái)診斷;禽霍亂除了腸出血和腸炎外,可出現(xiàn)心冠脂肪出血和肝表面白色壞死點(diǎn)病變;大腸桿菌病除了腸炎外,肝臟腫大明顯,呈暗黑色,并可鏡檢出大量大腸桿菌;禽流感除了腸炎外,可導(dǎo)致心肌壞死、胰腺壞死,腦神經(jīng)癥狀等病癥;某些藥物中毒可調(diào)查是否使用過(guò)某些毒副作用大的藥物史進(jìn)行鑒別診斷。
4)鴨球蟲(chóng)病一年四季均會(huì)發(fā)生,發(fā)病流行的高峰期在3~8月份,筆者分析認(rèn)為這與溫暖潮濕的環(huán)境有利于卵囊的發(fā)育有著直接的關(guān)系。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,卵囊的活力和它們感染宿主的能力受很多環(huán)境因素的影響,包括溫度、濕度和氧分壓,在形成孢子之前,無(wú)論是過(guò)高或過(guò)低的溫度,對(duì)卵囊的孢子化都是很不利[5]。適宜蟲(chóng)卵發(fā)育溫度為25~30℃。
[1] 江漢梁,喬齊友.半番鴨溫?fù)P球蟲(chóng)病[J].福建畜牧獸醫(yī),1995(2):27.
[2] 吳勝會(huì),江斌,林琳,等.半番鴨球蟲(chóng)病的診治報(bào)告[J].福建畜牧獸醫(yī),2005(6):27.
[3] 姚倩,韓紅玉,黃兵,等.上海地區(qū)家鴨球蟲(chóng)種類(lèi)初步調(diào)查[J].中國(guó)動(dòng)物傳染病學(xué)報(bào),2009,17(1):58-60.
[4] 葛亮.龍海麻鴨自然感染菲萊氏盲腸溫?fù)P球蟲(chóng)亞種內(nèi)生殖蟲(chóng)體與組織病變[J].廈門(mén)大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,1999(6):931-936.
[5] 彼得 L朗.球蟲(chóng)生物學(xué)[M].蔣金書(shū)等,譯.南寧:廣西科學(xué)技術(shù)出版社,1990:21-23.