【摘要】目的研究參菊浙貝湯對小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞的遺產(chǎn)毒性效應(yīng)。方法采用間隔24h兩次經(jīng)口灌胃法,予不同濃度參菊浙貝湯提取液灌胃實(shí)驗(yàn)小鼠,以生理鹽水、環(huán)磷酰胺分別為空白及陽性對照,檢測小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核率。結(jié)果與空白對照組相比,參菊浙貝湯各劑量骨髓嗜多染紅細(xì)胞中的平均微核發(fā)生率無顯著性差異(P>0.05),而陽性對照組骨髓嗜多染紅細(xì)胞中的平均微核發(fā)生率顯著升高,具有顯著性差異(P<0.01)。結(jié)論參菊浙貝湯在體內(nèi)無遺傳毒性。
【關(guān)鍵詞】骨髓嗜多染紅細(xì)胞;微核率;參菊浙貝湯
參菊浙貝湯是廣西壯族民間經(jīng)驗(yàn)方,由人參葉、浙貝、菊花、龍膽草等藥物組成,具有疏風(fēng)通竅、解毒排膿之功效,對慢性鼻竇炎有較好的治療作用。為評價其遺傳毒性,筆者進(jìn)行了參菊浙貝湯對小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)的影響研究,報(bào)告如下:
1材料
1.1藥物參菊浙貝湯浸膏:由研究者自行提取,按處方比例進(jìn)行煎煮,將藥液濃縮成棕黃色浸膏,每ml浸膏含生藥9.45g,試驗(yàn)時以蒸餾水配成所需濃度使用。
1.2動物健康昆明種小鼠,體重20-25g,雌雄各半,由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供,許可證號:SCXK桂2009-0002。
1.3試劑注射用環(huán)磷酰胺,山西普德藥液有限公司,批號:20110301,規(guī)格0.2g,試驗(yàn)時用0.9%生理鹽水稀釋為2mg/ml環(huán)磷酰胺稀釋液;新生牛血清,杭州四季青生物工程材料有限公司,批號:080531,試驗(yàn)時先將新生牛血清解凍,然后倒入滅菌試管中于56℃水浴中滅活30min,備用。瑞氏-姬姆薩(Wright-Giemsa)染色液,珠海貝索生物技術(shù)有限公司,批號:412062。
2方法
將小鼠隨機(jī)分為5組,即空白對照組5只、陽性對照組及參菊浙貝湯高、中、低劑量各10只,雌雄各半。采用間隔24h兩次經(jīng)口灌胃法進(jìn)行試驗(yàn),灌胃量20ml/kg,其中空白對照組予生理鹽水,陽性對照組環(huán)磷酰胺劑量為40mg/kg,參菊浙貝湯高、中、低劑量分別為141.75、70.88、35.44g生藥/kg。各組于末次給藥后6h頸椎脫臼處死小鼠,取胸骨骨髓用滅活新生牛血清稀釋涂片,甲醇固定,Wright-Giemsa染色15min,自來水沖洗干凈,自然干燥后在顯微鏡油鏡下觀察,每個標(biāo)本計(jì)數(shù)1000個骨髓嗜多染紅細(xì)胞中的平均微核發(fā)生率。注:嗜多染紅細(xì)胞呈灰藍(lán)色,略大于紅細(xì)胞(桔紅色),微核呈圓形或橢圓形,邊緣光滑整齊,呈藍(lán)紫色或紫紅色[1]。
3結(jié)果
與空白對照組相比,參菊浙貝湯各劑量骨髓嗜多染紅細(xì)胞中的平均微核發(fā)生率無顯著性差異(P>0.05),而陽性對照組骨髓嗜多染紅細(xì)胞中的平均微核發(fā)生率顯著升高,具有顯著性差異(P<0.01)。結(jié)果表明:參菊浙貝湯骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)結(jié)果為陰性,說明參菊浙貝湯在體內(nèi)無遺傳毒性。結(jié)果見表1,圖1。