口蹄疫的診斷與防控

摘要：口蹄疫是由口蹄疫病毒所致的急性、熱性、高度接觸性傳染病。主要論述了口蹄疫的流行病學(xué)、診斷方法及防控措施，為口蹄疫的科學(xué)防控提供理論依據(jù)。

關(guān)鍵詞：口蹄疫；流行病學(xué)；診斷；防控

中圖分類號：S855.3 文獻標(biāo)識碼：B 文章編號：1007-273X（2013）04-0027-02

口蹄疫（FMD）在臨床上也被稱為“辟癀”、“口瘡”，該疾病屬于一種口蹄疫病毒（FMDV）所導(dǎo)致的偶蹄動物熱性、急性高度接觸性傳染病。該疾病的臨床癥狀主要表現(xiàn)為病畜乳房、蹄部和口腔黏膜發(fā)生潰爛和水皰等。口蹄疫具有易感動物類型較多、潛伏期短、發(fā)病速度快、傳播途徑和感染方式較多等特征。

1 口蹄疫的流行病學(xué)

病畜是口蹄疫的主要傳染源之一。病畜呼出的氣體、奶、糞、唾液、水皰液和水皰皮都含有大量的具有致病力的病毒， 一旦吸入或食入，則會導(dǎo)致不同程度地感染。不同病程的階段及不同種類的患病動物，排出的病毒毒力和數(shù)量均不同。研究結(jié)果證實， 個體牛可帶毒5年，非洲野生水牛群體帶毒可長達24年。在10年未發(fā)生過口蹄疫的地區(qū)，應(yīng)用食管探杯采集牛食管咽部的分泌物進行檢驗，結(jié)果發(fā)現(xiàn)少數(shù)樣品中存在口蹄疫病毒。

不同地區(qū)口蹄疫的流行表現(xiàn)出一定的季節(jié)性。例如，牧區(qū)在冬季、秋末流行，春秋緩解，夏末基本平息；農(nóng)區(qū)則不存在明顯的季節(jié)性。跳躍式和擴散式是口蹄疫的主要流行方式。擴散式指的是從一塊或一點逐漸蔓延擴散向四周；跳躍式指的是從一點跳到遠距離的地方出現(xiàn)新疫點。氣溫較低時，口蹄疫主要表現(xiàn)為遠距離傳播。口蹄疫具有周期性流行、傳染力強、宿主廣泛性、多型性等特點。

2 口蹄疫的診斷方法

根據(jù)流行特點、臨床癥狀病理變化等對口蹄疫可進行初步診斷。口蹄疫是一種危害嚴(yán)重的烈性傳染病，必須通過實驗室診斷，下面主要介紹實驗室診斷方法。

2.1 分子生物學(xué)診斷

常用的分子生物學(xué)診斷方法包括核酸序列分析法、電聚焦法、聚合酶鏈反應(yīng)、核酸探針技術(shù)等。核酸序列分析是核酸序列與RT-PCR相結(jié)合的診斷方法；電聚焦法是以不同的等電點為基礎(chǔ)分離兩性電解物；聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）在反轉(zhuǎn)錄酶作用和特殊引物介導(dǎo)下實施PCR擴增；核酸探針技術(shù)利用FMDV的cDNA克隆片段標(biāo)記生物素或32P后制備探針，按照不同的標(biāo)記片段，對某一型或各群口蹄疫病毒進行檢測。

2.2 血清學(xué)試驗

病毒中和試實驗（VNT）是利用血清中和抗體與病毒特異性的結(jié)合作用，使病毒失去吸附細胞的能力或抑制其侵入和脫衣殼作用，喪失對易感動物和敏感細胞的感染力。VNT不僅能夠?qū)乖M行鑒定，而且能夠?qū)贵w實施定量檢測。在微量板上通過IB-RS-2或BHK-21細胞培養(yǎng)進行微量病毒中和試驗，由于該方法通常會對細胞污染和變異造成較大的影響，且操作時間較長，因而應(yīng)用價值有限。病毒感染相關(guān)抗原（VIAA）瓊脂擴散試驗僅僅能夠?qū)游锸欠翊嬖诳谔阋卟《靖腥具M行檢測，但無法定型，因而主要應(yīng)用于疫情普查和活畜進出口檢疫。

2.3 病毒分離

主要用于敏感性較高的原代牛甲狀腺細胞和羔羊、牛、豬原代腎細胞的病毒分離，也可用于IB-RS-2和BHK-21傳代細胞培養(yǎng)。同時，日齡為2～7 d的幼鼠也常被用于FMDV分離。

3 口蹄疫的防治措施

3.1 預(yù)防接種疫苗

（1）傳統(tǒng)疫苗。傳統(tǒng)疫苗主要包括滅活疫苗和活疫苗。活疫苗經(jīng)過充分致弱，動物接種后會出現(xiàn)無癥狀的感染，進而提高其自身機體免疫力。但由于FMDV具有較強的變異能力，因而活疫苗存在免疫原、致弱程度和殘余毒力難以把握等明顯缺陷，因此，很多國家都已禁用活疫苗。滅活疫苗是現(xiàn)階段較為常用的FMD預(yù)防措施。然而，滅活疫苗也存在自身的缺陷，主要包括有：免疫期較短、使用劑量大、成本較高、生產(chǎn)難度大、生物安全隱患明顯、操作規(guī)程復(fù)雜、防范設(shè)施嚴(yán)格以及免疫性較差等，因而抗原性強、穩(wěn)定性好、多價、高效、安全新型疫苗的研制已經(jīng)成為各國口蹄疫防治的主要方向[1]。

（2）感染性克隆疫苗。該類疫苗能夠?qū)⒍玖^弱的病毒或喪失毒力的病毒轉(zhuǎn)化為核酸疫苗，進而提高動物自身免疫力，且其免疫效果與自然毒相近，因而又被稱為感染性克隆疫苗。機體接種毒力減弱的活毒后，具有較弱的致病性，且生活周期能夠恢復(fù)正常，因而其在家畜體內(nèi)的表達量顯著高于基因疫苗[2]。

（3）基因工程疫苗。該類疫苗的基本作用原理是將口蹄疫的免疫原性通過基因工程技術(shù)植入微生物的活載體內(nèi)部，并形成同時具備傳統(tǒng)滅活疫苗和活疫苗的優(yōu)點，其主要價值在于載體疫苗，病毒載體還能夠激發(fā)滅活苗所不存在的CD8+T細胞應(yīng)答作用，因而應(yīng)用價值較高[3]。

（4）核酸疫苗。核酸疫苗（基因疫苗）其原理是將攜帶有免疫原編碼基因的真核表達質(zhì)粒直接導(dǎo)入動物體內(nèi)，通過宿主細胞的表達合成免疫原蛋白，誘導(dǎo)免疫應(yīng)答。

3.2 消毒

使用酚制劑、碘制劑、氯制劑等消毒劑，或是甲醛和環(huán)氧乙烷等消毒家畜毛皮；使用1%強力消毒靈、0.2%～0.5%過氧乙酸、10%石灰乳、2%～4%燒堿液對家畜用具、場地、畜舍等進行消毒；對疫點進行全面消毒，使用5%氨水消毒疫點，或是發(fā)酵處理堆積家畜的糞便。

3.3 綜合防控措施

做好預(yù)防工作是口蹄疫防控的首要原則。目前，發(fā)生口蹄疫疫情的國家主要采取消毒、進口檢驗、肉及肉制品檢驗、疫情觀察和檢疫等預(yù)防措施。而未見口蹄疫疫情的國家，通常拒絕進口存在疫情國家的進口家畜產(chǎn)品和動物，如確有需要，則需在政府部門的嚴(yán)格控制下進行消毒和檢疫，以降低口蹄疫的發(fā)生率。一旦周邊地區(qū)或國家發(fā)生口蹄疫疫情，則應(yīng)及時采取緊急預(yù)防性注射，保持畜群相對平衡的抗體水平，同時要加強飼養(yǎng)管理，搞好欄舍環(huán)境衛(wèi)生，定期給畜舍消毒，做好滅鼠清源工作，并做好其他疾病的預(yù)防保健工作，避免繼發(fā)感染呼吸道疾病和其他疾病。

病畜疑似口蹄疫時，應(yīng)立即報告畜牧獸醫(yī)局，病畜要就地封鎖。確認(rèn)后，立即進行嚴(yán)格封鎖、隔離、消毒及防治等一系列工作。由當(dāng)?shù)卣罁?jù)小、嚴(yán)、快、早的基本原則，準(zhǔn)確劃定受威脅區(qū)、疫區(qū)、疫點等，對這些地區(qū)進行嚴(yán)密封鎖，將發(fā)病畜群全部撲殺深埋做無害化處理，對被污染的區(qū)域以及病畜舍等采用2%甲醛溶液和2%氫氧化鈉溶液等進行集中消毒處理。被污染的墊料以及飼料等進行深埋或集中焚毀，將家畜的糞便等集中進行處理。周邊家畜進行疫苗接種，在可能被感染的區(qū)域形成免疫帶。設(shè)立臨時檢查消毒哨卡，嚴(yán)格控制疫區(qū)物品和人員的流動。政府各有關(guān)部門之間相互協(xié)作，共同防御疫情。

4 討論

在口蹄疫的診斷過程中，應(yīng)對自然感染動物和口蹄疫免疫動物進行準(zhǔn)確區(qū)分。FMDV非結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測時口蹄疫臨床診斷和鑒別的主要標(biāo)志。因此，接種口蹄疫疫苗是一種較為有效且可靠的口蹄疫特異性預(yù)防方法，選擇有效、安全的口蹄疫疫苗可作為消滅、控制和預(yù)防口蹄疫的主要先決條件[4]。現(xiàn)階段，對于包括抗獨特型抗體疫苗、活載體病毒疫苗、合成肽疫苗等在內(nèi)新型疫苗的研究技術(shù)已經(jīng)較為成熟，且隨著我國現(xiàn)代化生物技術(shù)的不斷發(fā)展成熟，新型口蹄疫疫苗也有望實現(xiàn)進一步的突破。

參考文獻：

[1] 李 偉.口蹄疫流行病學(xué)、病理變及防控措施[J].甘肅科技，2009，5（8）：412-413.

[2] 馬睿麟，蔡金山，沈艷麗.豬瘟、口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征等多種疫苗免疫試驗[J].畜牧與獸醫(yī)，2010，15（10）：489-490.

[3] 王 維，李樹巖，白芙蓉.種牛口蹄疫防疫反應(yīng)的觀察[J].畜牧與獸醫(yī)，2012，65（9）：425-426.

[4] 李平花，白興文，孫 普.豬O型口蹄疫基因工程疫苗候選株的構(gòu)建及其免疫原性分析[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報，2011，87（11）：481-482.