生活飲用水細菌總數檢測不確定度評估報告

王悅，鄭琳琳，佟永薇，王人悅

（1.譜尼測試科技（天津）有限公司，天津300100；2.天津市食品研究有限公司，天津301609）

生活飲用水中細菌總數一直是備受公眾關注的指標，是影響人們身體健康和生活品質的重要方面，本研究對飲用水中的菌落總數進行了不確定度分析，以期找出影響測量結果不確定度的各種因素，進行逐項分析及評定，為評定測量結果質量提供依據。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

測定儀器：DHP-600S 電熱恒溫培養箱：天津中環試驗電爐有限公司。

試劑：氯化鈉（分析純）；營養瓊脂（BR）。

1.2 檢測方法

檢驗依據：GB/T 5750.12—2006《生活飲用水標準檢測方法微生物指標》[1]。

1.3 樣品的制備

以無菌操作取樣品原液及充分混勻后經10 倍和100 倍稀釋的稀釋液作檢測，每個稀釋度做2 個平衡樣，各取生活飲用水原液及稀釋液1 mL，分別注入平皿中，立即傾注15 mL～20 mL 冷卻到45 ℃～50 ℃的營養瓊脂培養基，旋轉平板，將培養基與樣液充分混合，待瓊脂凝固后，翻轉平皿，置36 ℃的培養箱中培養48 h，并做平行樣。計數菌落總數并報告。

2 結果與討論

2.1 數學模型

由于測量結果具有發散性，與之相比其他不確定度來源均可以忽略不計[2]，僅考慮由測量結果散發引入的不確定度分量。此次檢測數學模型可以簡單地寫為：

設菌落總數為A，檢測結果為X，則A=X cfu/mL

2.2 原因分析

在微生物檢驗中，樣品中細菌分布的均勻性和重復測量帶來的不確定度是影響檢驗結果準確度的主要原因[3]。而B 類不確定度分量對合成不確定度影響較少。按GB/T 5750.12-2006《生活飲用水標準檢測方法微生物指標中細菌總數測定》中方法，同一樣品每個稀釋度做兩個平行樣，因此可采用合并樣本標準差來求得檢測結果的不確定度，見表1。

從檢驗結果可知，根據貝賽爾公式計算檢測結果對數值的合并樣品標準差：

P 代表平均值；n 為測定次數。

表1 實驗室檢測結果記錄Table 1 Laboratory test results recorded

2.3 擴展不確定度評定

擴展不確定度為：u=kuc，取置信水平p=95%，自由度為19，查t 表分布得：t95（19）=2.093，故u=2.093×0.016 2=0.033 9。

3 測量不確定度報告

X 為測試結果，X1，X2為重復測試的結果，所以在95%置信水平，此測試方法之不確定度為0.033 9。當檢查結果以平衡樣結果取對數值的平均值表示時，其取值區間分布于X±0.033 9 之間。當檢測結果以平衡樣結果平均值表示時，相對于對數值的取值再取反對數得其取值區間。這個取值區間適合于任何一次檢測。

4 結論

通過對飲用水中菌落總數含量的不確定度來源進行分析，并對其不確定度分量進行評定，得出該分析方法的相對擴展不確定度為0.033 9，其取值區間分布于X±0.033 9 之間。因此，在測定時，必須嚴格控制試驗條件，在測試樣品時，必須嚴格按照操作規范，并且使用合格的計量器具，盡量減小測量結果的不確定度，保證檢測結果的質量。

[1] 食品衛生檢驗方法編委會.GB/T 5750.12-2006 生活飲用水標準檢驗方法微生物指標[S].北京:中國標準出版社,2003:89-92

[2] 張濤,趙明.食物成分表[J].北京大學學報:食品科學版,1999,35(1):101-106

[3] 國家質量監督檢驗檢疫總局.JJF 1059—1999 測量不確定度評定與表示[S].北京:中國計量出版社,1999:1-31