昆蟲足玻片標本的制作要點

摘要：昆蟲足玻片標本制作有8個主要環節：玻片清洗、取材、標本前處理、漂洗、脫水、制片、干燥和上標簽，只要通過練習，掌握制作過程中各個環節的制作要領，就能制作出合格的昆蟲足玻片標本。

關鍵詞：昆蟲學；足玻片標本；制作

中圖分類號：G642.1？搖 文獻標志碼：A 文章編號：1674-9324（2013）36-0174-02

昆蟲學一直是生物類專業教學中的重要組成部分。而昆蟲標本則是昆蟲學教學必不可少的教具。昆蟲足玻片標本是指將昆蟲足經處理之后，放在載玻片和蓋玻片之間永久保存的玻片標本，是最直觀的教具和觀察材料。制作昆蟲足玻片標本通常包含：玻片清洗、取材、標本前處理、漂洗、脫水、制片、干燥和上標簽等8個主要步驟。要完成一個合格的昆蟲足玻片標本，需要注意標本制作過程中的各個環節。

一、玻片的清洗

新購買的玻片不能直接用來制作標本，因為玻片上殘留的粉塵及油脂等物質會直接影響玻片標本的制作質量。因此，必須對載玻片和蓋玻片進行清潔處理。玻片通常用洗衣粉溶液浸泡后清洗，將載玻片和蓋玻片浸沒在5%洗衣粉溶液中浸泡1～2天，取出后用清水沖洗，然后再用濃鹽酸浸泡4～5小時，取出后用清水逐張沖洗干凈。清洗時需要特別注意的是玻片必須一張一張分開清洗，避免玻片之間的相互摩擦造成玻片表面的劃痕。清潔后的玻片可浸泡于無水乙醇中保存。使用時取出，在玻片上滴加少量二甲苯，再用擦鏡紙擦干待用。

二、取材（解剖）

取材時要注意材料的完整性，通常情況下選用新鮮的昆蟲標本進行取材為佳。因為干制昆蟲的蟲體較脆，解剖時容易斷裂，無法保證材料的完整性。如因條件限制必須采用干制昆蟲標本時，則需要先將標本放入回軟器進行回軟處理，才能進行解剖。解剖時要還要注意不同類型昆蟲足的構造，在確保完整性的同時，還要保證取材的正確性，不需要的部分盡可能去除干凈。另外取材時要注意材料的尺寸，因為玻片的大小有限，過大的標本是不適合用來制作玻片標本的。

三、標本前處理

剛解剖好的昆蟲足因內含蛋白質、脂肪等物質是不能立即用來制片的。通常需要浸泡在10%NaOH溶液中進行處理，以去除其內含物。因為不同類型昆蟲足的結構和大小差異較大，因而處理的溫度和時間也不相同?？刂坪美ハx足在NaOH溶液中的處理時間尤為重要，處理的程度以徹底去除內含物為標準，同時要注意處理時間不宜過長，過度處理的昆蟲足標本容易破損，并且會因為過于透明，影響觀察效果。

四、（中和）漂洗

經過NaOH溶液處理后的昆蟲足，其內部會殘留部分的NaOH溶液，在制片時這些物質會與封藏劑（中性樹膠）發生化學反應從而形成白霧現象，使玻片標本變得混濁不清，難以觀察。因此，經過NaOH溶液處理后的昆蟲足在制片前必須進行漂洗：先用10%冰乙酸溶液進行中和，然后用蒸餾水反復沖洗干凈，漂洗時盡量避免移動標本，頻繁移動標本容易造成標本的丟失和破損。

五、脫水

漂洗后的昆蟲足富含水份，脫水的目的就是為了去除其中的水份。因為封片時使用的封藏劑——中性樹膠不溶于水，通常以二甲苯作為溶劑。而標本中殘留的水份遇上二甲苯也會出現白霧現象，影響標本的透明度和觀察效果。因此制片前，標本必須先進行脫水。我們常采用乙醇梯度脫水法來進行脫水（即將標本從低濃度乙醇依次轉移至高濃度乙醇中）。脫水不易過快，該實驗中我們設置了50%、60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%、100%九個濃度梯度。這樣的做法在確保徹底脫水的同時，避免了因脫水過快引起的材料收縮變形。需要注意的是：標本經無水乙醇脫水后，需要及時制片。因為經無水乙醇脫水后的標本十分硬脆，易斷裂。如無法及時制片，則建議將處理好的標本保存在75%的乙醇中，待使用時再進行進一步的脫水。

六、制片

制片是整個玻片標本制作最核心的環節，即將處理好的標本用封藏劑固定封存于載玻片與蓋玻片之間，以便永久保存和使用。在制片中，首先要注意標本的擺放位置和擺放姿態，一般要求標本擺放在玻片的正中間，并整理其姿態使其與自然狀態一致。制片時，一般使用中性樹膠作為封藏劑，而膠量的控制在制片中十分關鍵，因為樹膠太多會增加標本片的厚度，影響標本的透明度；過多的樹膠還會從蓋玻片四周溢出，影響標本片的外觀，有時還會造成標本片厚薄不均的現象，從而影響觀察的效果；樹膠過少則容易產生氣泡，造成標本密封不嚴、標本外露，影響保存等問題。膠量的大小并非一成不變，要根據制作昆蟲足標本的類型和大小作調整，但調整的幅度不會太大。氣泡的產生是制片中的另一大難點。要避免氣泡的產生，首先在取膠的時候不能攪動樹膠，因為攪動樹膠會將空氣攪入樹膠使樹膠本身帶有氣泡；其次在滴膠時，膠離載玻片的距離盡量?。坏谌⒁庵破捻樞颍簯葘吮緮[放后好再滴膠；滴完膠后，如果發現氣泡可以用加熱后的解剖針挑除。最后，要注意封片的細節：在封片時，蓋玻片的一側先接觸載玻片，然后緩慢放下另一側至蓋玻片與樹膠完全接觸，注意蓋片的速度，做到盡可能的緩慢。若在封片時產生少量的氣泡，可先將玻片在酒精燈上稍稍加熱（從火焰上掃過即可，加熱過度會產生額外的氣泡），然后略微傾斜玻片，再用鑷子輕敲蓋玻片，以驅趕氣泡。制片完成后，溢出的樹膠可用擦鏡紙蘸取少量二甲苯后，小心去除干凈。

七、干燥

制片完成后，玻片標本一般放在陰涼通風處自然風干，在樹膠完全凝固前盡可能不要移動玻片，以免標本發生位移。

八、標簽（裝盒）

一張規范的玻片標本還必須包含有制作標簽。標簽通常包括以下幾個要點：足的類型、制作人、制作時間等信息，標簽一般貼在玻片的左邊。制作完整的玻片標本應歸類裝入玻片標本盒中，以便保存和管理。

九、小結

昆蟲足玻片標本的制作是一項很實用的技術，無論是生物類實驗教學還是課外科技活動都會使用到昆蟲足玻片標本的制作。尤其在昆蟲學、動物學等課程的實驗教學中，運用玻片標本進行教學，在很大程度上突破了季節和地域的局限，使學生可以隨時觀察，反復研究，真正做到理論知識和實際內容相結合，使教學內容更為生動和直觀。昆蟲足玻片標本的制作方法并不復雜，只要通過練習，掌握制作過程中各個環節的制作要領，就能制作出合格的昆蟲足玻片標本。

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基金項目：本論文由中國計量學院開放實驗項目資助