老年2型糖尿病患者血清內脂素水平與外周動脈疾病及炎癥因子的關系

蔣藍英 酈旦明 何炳榮 付仲穎

老年2型糖尿病患者血清內脂素水平與外周動脈疾病及炎癥因子的關系

蔣藍英 酈旦明 何炳榮 付仲穎

目的 探討血清內脂素在2型糖尿病（T2DM）合并外周動脈疾病老年患者中的變化，評價血清內脂素水平與外周動脈疾病及炎癥因子的關系。 方法 按彩色多普勒超聲檢查外周動脈結果分為T2DM合并外周動脈疾病組（T2DM-PAD組）52例、T2DM無外周動脈疾病組（T2DM組）50例和對照組45例，測量血壓、BMI、腰圍（WC）、WHR及檢測FPG、空腹胰島素、血脂、HbA1c、纖維蛋白原等代謝指標，并計算穩態模型胰島素抵抗指數（HOMA-IR）；測定所有受試者hs-CRP、IL-6、TNF-α和內脂素水平。 結果 （1）T2DM-PAD組和T2DM組hs-CRP、纖維蛋白原、IL-6、TNF-α和內脂素顯著高于對照組（P＜0.05或0.01），T2DM-PAD組hs-CRP、IL-6、TNF-α和內脂素明顯高于T2DM組 (均P＜0.05）；（2）Pearson相關分析結果顯示，T2DM-PAD組和T2DM組血清內脂素與hs-CRP、纖維蛋白原、IL-6、TNF-α、頸動脈內膜中層厚度（C-IMT）、WC、FPG、空腹胰島素、HOMA-IR、HbA1c均呈正相關（均P＜0.05或0.01）；（3）多元逐步回歸分析，T2DM-PAD組和T2DM組WC、HOMA-IR、HbA1c、hs-CRP、IL-6、TNF-α為影響老年T2DM患者血清內脂素的獨立相關因素（P＜0.05或0.01）。結論 血清內脂素可能在T2DM外周動脈疾病發生和發展過程中起一定作用，與炎癥因子聯系密切，且獨立于脂質代謝紊亂所起的作用。

炎癥因子 內脂素 2型糖尿病 外周動脈疾病 老年

近年來研究發現，脂肪組織不僅具有能量儲備功能，還具有旺盛的內分泌功能，能夠產生和分泌多種生物活性物質，參與機體許多生理與病理過程。糖尿病、動脈粥樣硬化發病機制的共同基礎是慢性炎性反應和胰島素抵抗，脂肪組織分泌的多種脂肪因子參與其過程。內脂素（visfatin）是新發現的脂肪細胞因子，已在動脈硬化斑塊中被發現[1]。本研究觀察了老年2型糖尿病（T2DM）患者血清內脂素水平與外周動脈疾病及炎癥因子的關系，現報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 選取本院2008年1月至2009年12月老年病科門診及住院T2DM患者102例，年齡60～84歲，平均（70.3±5.2）歲。根據彩色超聲多普勒檢測兩下肢動脈和頸動脈病變情況，分為T2DM合并外周動脈疾病（T2DM-PAD組）52例和T2DM無外周動脈疾病組（T2DM組）50例。來自本院老年病科門診及體檢中心體檢人員45名，年齡60～82歲，平均（71.8±4.9）歲。75g口服葡萄糖耐量試驗排除糖尿病，B超檢查排除外周動脈疾病，設為對照組。T2DM診斷符合1999年世界衛生組織標準。3組性別、年齡比較差異均無統計學意義（均P＞0.05，詳見表1）。

所有研究對象均除外糖尿病急性并發癥，急、慢性感染，近期有手術、創傷，惡性腫瘤，服用噻唑烷二酮類藥物及調脂藥物，合并心、肝、腎功能不全，使用胰島素治療者，排除新近腦卒中、冠心病及自身免疫病病史的患者。

1.2 一般指標檢測 專人測量身高、體重、腰圍（WC）、臀圍，并計算BMI和WHR；血壓：受試者均在休息0.5h后用汞柱式血壓計測量3次坐位血壓，取平均值。

1.3 標本采集 3組均過夜空腹10～12h，晨起采集靜脈血，一份立即測定FPG、胰島素、血脂、凝血功能、肝功能、腎功能、HbA1c，另一份靜置1h后，3 000r/min離心5min分離血清，標記后貯存于-70℃低溫冰箱，同批測定內脂素、hs-CRP、TNF-α和IL-6。

1.4 檢測方法 采用全自動生化儀測定生化指標：血清TC、TG、HDL-C、LDL-C；FPG采用葡萄糖氧化酶法；血清胰島素測定采用電化學發光法；載脂蛋白A1（Apo-A1）、載脂蛋白B（Apo-B）、脂蛋白a（Lp-a）采用ELISA法；HbA1c測定采用高壓液相色譜法。穩態模型胰島素抵抗指數（HOMA-IR）=FPG×空腹胰島素/22.5；血清內脂素測定：采用ELISA法（美國Phoenix Pharmaceutical公司藥盒），抗體為特異的兔抗人內脂素IgG部分肽段，與血漿胰島素、瘦素、脂聯素、抵抗素等肽類激素無交叉反應，由專業人員測定，線性范圍4～256μg/L，批內變異系數＜5%，批間變異系數＜14%。hs-CRP檢測采用ELISA法，試劑由上海信然生物技術有限公司；TNF-α采用美國Leinco公司ELISA試劑盒；IL-6采用美國R&D Systems公司ELISA試劑盒檢測；纖維蛋白原（FIB）采用美國ACLAdvance全自動凝血分析儀。

1.5 外周動脈病變測定 采用德國Siemens公司Sequoia512型高頻彩色多普勒B型超聲儀，由經驗豐富的B超醫師專人測定。主要測定血管為雙側頸動脈和雙下肢動脈，下肢動脈包括股動脈、腘動脈、脛前、脛后動脈和足背動脈。測定病變內容包括：頸動脈內膜中層厚度（C-IMT）≥0.8mm，下肢動脈內膜中層厚度≥1.0mm，動脈硬化、斑塊、狹窄、閉塞，以上病變有1處者即認定存在外周動脈病變。

1.6 統計學處理 采用SPSS17.0統計軟件，計量資料采用表示，多組間差異采用單因素方差分析，兩兩比較用LSD檢驗，內脂素與C-IMT、炎癥因子和代謝指標的關系用Pearson相關分析及多元逐步回歸分析。

2 結果

2.1 3組臨床資料和生化指標比較 3組年齡、性別和BMI、收縮壓、舒張壓均無統計學差異。T2DM-PAD組患者較T2DM組糖尿病病程長（P＜0.05）；T2DM-PAD和T2DM組WC、WHR、FPG、空腹胰島素、HOMA-IR明顯高于對照組（P＜0.05或0.01）。前兩組HbA1c無統計學差異。3組TG、TC、LDL-C、HDL-C水平均無統計學差異。T2DM-PAD組和T2DM組的Apo-A1水平較對照組明顯下降（均P＜0.05），前兩組之間無統計學差異。T2DM-PAD組和T2DM組的Apo-B水平較對照組明顯增高（均P＜0.05），且T2DM-PAD組Apo-B水平高于T2DM組（P＜0.05），T2DM-PAD組Lp-a水平明顯高于T2DM組和對照組（均P＜0.01），后兩組之間無統計學差異。詳見表1。

2.2 3組血清內脂素、C-IMT和炎癥因子水平比較T2DM-PAD組和T2DM組hs-CRP、IL-6、TNF-α和內脂素水平明顯高于對照組（P＜0.05或0.01），且T2DMPAD組高于T2DM組（P＜0.05）。T2DM-PAD組和T2DM組血清FIB水平均高于對照組（均P＜0.05），前兩組之間差異無統計學意義。T2DM-PAD組C-IMT明顯高于T2DM組和對照組（均P＜0.01），后兩組無差異。詳見表1。

2.3 Pearson相關分析 T2DM患者血清內脂素與hs-CRP（r=0.308）、纖維蛋白原（r=0.274）、IL-6（r=0.254）、TNF-α（r=0.189）、C-IMT（r=0.314）、WC（r=0.154）、FPG（r=0.267）、空腹胰島素（r=0.344）、HOMA-IR（r=0.425）、HbA1c（r=0.437）均呈正相關（P＜0.05或0.01）。

2.4 多元逐步回歸分析 以血清內脂素為應變量，以年齡、性別、病程、收縮壓、舒張壓、BMI、WC、WHR、FPG、空腹胰島素、HOMA-IR、HbA1c、TG、TC、HDL-C、LDLC、Apo-A1、Apo-B、Lp-a、hs-CRP、纖維蛋白原、IL-6、TNF-α進行多元逐步回歸分析，WC、HOMA-IR、HbA1c、hs-CRP、IL-6、TNF-α為影響老年2型糖尿病患者血清內脂素的獨立相關因素（r=0.315、0.601、0.538、0.487、0.714、0.651，P＜0.05或0.01）。

表1 3組臨床資料比較

3 討論

大量研究證實[2]，T2DM和動脈粥樣硬化共同基礎是一種慢性、低度、亞臨床性的炎癥，炎癥在糖尿病大血管動脈粥樣硬化斑塊形成、發展、破裂，以及隨后大血管病變產生的臨床急性事件中扮演著重要的角色。

內脂素[3]是新近發現的，主要由內臟脂肪分泌的脂肪細胞因子，有類胰島素樣作用，可能是一種新的促炎癥因子[4]。內脂素可能是聯系動脈粥樣硬化與慢性低水平炎癥、免疫調節紊亂的橋梁[5]。本研究發現，T2DM患者血清內脂素水平明顯高于對照組，T2DM-PAD組血清內脂素更明顯高于T2DM組。Pearson相關分析顯示，內脂素與慢性炎癥介質hs-CRP、纖維蛋白原、IL-6、TNF-α存在正相關，且與C-IMT亦呈正相關。多元逐步回歸分析顯示，WC、HOMA-IR、HbA1c、hs-CRP、IL-6、TNF-α為影響老年T2DM患者血清內脂素的獨立相關因素。C-IMT增高是反映外周動脈病變的靈敏指標，也是糖尿病患者心腦血管疾病的高危因素，以上結果提示內脂素與動脈粥樣硬化、炎癥反應有緊密聯系[6-7]。

許多研究發現，多種炎癥因子參與了糖尿病及其血管并發癥的發生、發展，如CRP、TNF-α、IL-6等通過不同作用機制促進動脈粥樣硬化形成[2]。本研究發現，T2DM-PAD組TNF-α、IL-6、hs-CRP明顯高于T2DM組和對照組，提示TNF-α、IL-6、hs-CRP參與了T2DM患者的大血管病變過程。

Lp是血脂與Apo結合所形成的Lp顆粒，Apo是Lp顆粒外層的蛋白質部分，其功能是維持Lp結構與運輸脂類、調控與Lp代謝有關酶的活力，以及作為細胞表面Lp受體的配體而參與Lp的代謝。血清ApoA1、HDL-C的含量減少和Apo-B、LDL-C含量的增加，提示患動脈粥樣硬化的危險性增加，并易引起脂質代謝紊亂的疾病如心、腦血管疾病等[8]。Lp-a具有致血栓形成和動脈硬化作用[9]。本研究發現，T2DM-PAD組和T2DM組的Apo-A1水平較對照組明顯下降，T2DM-PAD組和T2DM組的Apo-B水平較對照組顯著增高，T2DMPAD組Apo-B水平亦高于T2DM組，T2DM-PAD組Lp-a水平顯著高于T2DM組和對照組，Apo-A1、Apo-B和Lp-a與血清內脂素水平無相關性，揭示脂質代謝紊亂所致的動脈粥樣硬化獨立于血清內脂素所致的動脈粥樣硬化性疾病。

本研究結果表明，血清內脂素與T2DM外周動脈疾病發生和發展密切有關，與炎癥因子有緊密聯系，且獨立于脂質代謝紊亂所致的動脈粥樣硬化。至于內脂素在慢性炎癥發生、發展中的作用機制，除了蛋白激酶和絲裂原活化的蛋白激酶途徑影響一氧化氮合成外[10]，是否還參與其他途徑的調節，還有待于進一步研究。

[1]Dahl T B,Yndestad A,Skjelland M,et al.Increased expression of visfatin in macrophages of human unstable carotid and coronary atherosclerosis:possible role in inflammation and plaque destabilization[J].Circulation,2007,115(8):972-980.

[2]王利娜,方朝暉.炎癥因子與糖尿病大血管動脈粥樣硬化探討[J].中醫藥臨床雜志,2011,23(2):108-110.

[3]Fukuhara A,Matsuda M,Nishizawa M,et al.Visfatin:a potein secreted by visceral fat that minics the effects of insulin[J].Science,2005,307（5708）:426-430.

[4]Moschen A R,Kaser A,Enrich B,et al.Visfatin,an adipocytokinewith proinflammatory and immunomodulating properties[J].J Immunol,2007,178:1748-1758.

[5]Matarese G,Mantzoros C,La Cava A,et al．Leptin and adipocytokines:bridging the gap batween immunity and atherosclerosis [J].Curt Pharm Des,2007,13(36):3676-3680.

[6] 吳文俊,李衛平,倪連松,等.血清內脂素與2型糖尿病外周動脈疾病的相關性研究[J].中華內分泌代謝雜志,2009,25(6):612-614.

[7] 高麗華,趙占勝,田暉等.2型糖尿病患者內脂素水平與頸動脈內中膜厚度相關[J].中華內分泌代謝雜志,2010,26(1):15-16.

[8] 陳一偉,陳希.老年心腦血管疾病患者血脂與載脂蛋白測定的臨床血管分布，因彩色血流能量圖成像對癌腫內小血管的低速血流顯示更敏感，受角度和方向的影響較小，故能較常規彩色多普勒技術更客觀、更可靠地顯示癌腫內完整的血管樹或血管網。本研究以直徑≥10mm的結節作為研究對象，一方面考慮到微小甲狀腺癌處于該病的早期，轉移率較低，另一方面考慮到部分微小甲狀腺癌內部血流較少甚至無血流信號顯示，能量多普勒能較好地顯示了其血流信號。

綜上所述，對甲狀腺癌患者甲狀腺結節MCVD的檢測，不僅可以反映腫塊內血流的豐富程度，而且對于預測是否有頸部淋巴結轉移具有較好的價值，結合常規及高頻超聲對頸部淋巴結直接掃查，有望提高診斷甲狀腺癌患者頸部淋巴結轉移的準確率，從而為臨床治療提供更有力的參考依據。

4 參考文獻

[1]譚翊,譚遜,李榜江.應用Photoshop軟件進行小班面積測算方法研究[J].測繪科學,2008,33(1):224-225.

[2]張迅,曾煒,陳雅玲,等.超聲評價甲狀腺癌頸部淋巴結轉移的價值[J].中華超聲影像學雜志,2011,20(9):825-826.

[3]Schimming R,Reusch P,Kuschnierz J,et al.Angiogenic factors in squamous cell carxinoma of the oral cavity:do they have prognostic relevance[J].JCraniomaxillofac Surg,2004,32:176-181.

[4]張波,姜玉新,崔全才,等.甲狀腺實性結節的彩色多普勒超聲和免疫組織化學研究[J].中華超聲影像學雜志,2010,19(8):697-700.

[5]Timoshenko A V,Rastogi S,Lala P K.Migration-promoting role of VEGF-C binding receptors in human breast cancer cells[J].Br J Cancer,2007,97(8):1090-1098.

[6]陳嘉希,曹家慶,李趙江波,等.VEGF-C、VEGFR-3在原發性大腸癌中的表達與淋巴轉移關系的研究[J].江西醫學院學報,2009,49(1): 67-70.價值[J].中華保健醫學雜志,2010,12(5):390-392.

（本文編輯：歐陽卿）

[9]郭永和,昝朝霞,張維君.冠狀動脈病變程度與血脂成分異常相關性分析[J].中國循環雜志,2009,24(2):101-104.

[10]Lovren F,Pan Y．Shukla P C,et al.Visfatin activates eNOS via Akt and MAP kinases and improves endothelial cell function and angiogenesis in vitro and in vivo:translational implications for atherosclerosis[J].Am J Physiol Endocrinol Metab,2009, 296(6):E1440-E1449．

（收稿日期：2012-04-23）

（本文編輯：沈昱平）

Relationship of serum visfatin level with peripheralarterialdisease and inflammatory factorin senile type 2 diabetic pa-tients

Inflammatory factor Visfatin T2DM Peripheral arterial diseases Senile

2012-12-13）

310003 杭州，浙江中醫藥大學附屬中西醫結合醫院老年病科

蔣藍英，E-mail：kexinlan4623@163.com

【 Abstract】Objective To investigate serum visfatin level and its relationship with peripheral arterial disease(PAD)and inflammatory factors in senile type 2 diabetic(T2DM)patients. Methods Fifty two elderly patients(＞60y)with T2DM-PAD and 50 elderly patients with T2DM without PAD and 45 healthy controls were enrolled in the study.Blood pressure,body mass index (BMI),waist circumference(WC),weight/height ratio (WHR),fasting plasm glucose (FPG),fasting insulin,blood lipid analysis, HbAlc and fibrinogen were determined.Serum hs-CRP,IL-6,TNF-α and visfatin were examined by ELISA. Results In T2DM-PAD and T2DM patients serum hs-CRP,fibrinogen,IL-6,TNF-α and visfatin were higher than those in control group (P＜0.05 or P＜0.01).Serum hs-CRP,IL-6,TNF-α and visfatin were higher in T2DM-PAD group than those in T2DM group(P＜0.05 or P＜0.01).Pearson's correlation analysis demonstrated that serum visfatin level was positively correlated with hs-CRP,fibrinogen,IL-6,TNF-α,C-IMT,WC,FPG,fasting insulin,HOMA-IR and HbA1c.Multiple regression analysis showed that WC, HOMA-IR,HbA1c,hs-CRP,IL-6,TNF-α was the independent related factor of influencing serum visfatin level. Conclusion Visfatin may be involved in the occurrence and development of peripheral arterial diseases in patients with type 2 diabetes mellitus,which is correlate with inflammatory factors,independent to lipid disorder.