對糖化血紅蛋白測定方法比較的分析

陳玉梅

（河南焦作市中醫(yī)院檢驗科，河南 焦作 454150）

對糖化血紅蛋白測定方法比較的分析

陳玉梅

（河南焦作市中醫(yī)院檢驗科，河南 焦作 454150）

目的 比較不同方法測定糖化血紅蛋白（HbA1c）的差異。方法 采集所有患者空腹 EDTA 抗凝全血 3mL，慢慢的將樣品混勻，取 10μL 的 EDTA 抗凝血加入 500μL 的溶血素進行處理，靜置 15min，HbA1c、Hb 測定分別采用免疫抑制比濁法及離子交換層析法。結(jié)果 三組采用不同方法測定 HbA1c 結(jié)果及回歸方程比較均無明顯差異性，P＞ 0.05，無統(tǒng)計學意義。145 份測定結(jié)果回歸方程：Y=0.9458X+0.3825，相關(guān)系數(shù)分別為 0.8052、0.9523、0.9685。本組 HbA1c 結(jié)果的系統(tǒng)誤差均在臨床可接受水平范圍內(nèi)。結(jié)論 HbA1c 測定采用免疫抑制比濁法及離子交換層析法，均能滿足臨床糖尿病患者的監(jiān)測需求。

糖化血紅蛋白

糖尿病患者在過去2～3個月內(nèi)的平均血糖濃度可由糖化血紅蛋白（HbA1c）準確的反映出來，測定HbA1c是糖尿病患者長期監(jiān)控、避免發(fā)生并發(fā)癥或并發(fā)癥加重的重要方法之一，比血糖測定更具有準確的臨床治療依據(jù)[1]。筆者通過免疫抑制比濁法及離子交換層析法兩種不同的方法對HbA1c進行測定，并對測定結(jié)果比較與分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2012年1月至2012年10月新鮮的乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝全血標本145份。HbA1c、Hb試劑、標準、質(zhì)控品均由北京利德曼公司提供，儀器為Backman全自動生化分析儀LX-20型，Bio-Rad全自動血紅蛋白分析儀及配套試劑

1.2 方法

采集患者空腹EDTA抗凝全血3mL，慢慢的將樣品混勻，取10μL的EDTA抗凝血加入500μL的溶血素進行處理，靜置15min，HbA1c、血紅蛋白（Hb）測定分別采用免疫抑制比濁法及離子交換層析法，免疫比濁法計算HbA1c結(jié)果，而層析法采用全自動血紅蛋白分析儀可直接對HbA1c結(jié)果進行測定。根據(jù)HbA1c測定結(jié)果分為正常組、異常組、對照組，其中正常組為3%～6.0%，異常組為6.1%～14%，對照組為3%～14%。

1.3 統(tǒng)計學處理

采用SPSS13.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理，計數(shù)資料采用t檢驗，計量型數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差（χ—±s）檢驗，計量資料采用χ2檢驗，如果P＜0.05，為有明顯差異性，提示有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩種測定方法測定HbA1c結(jié)果比較，見表1。正常組、異常組、對照組采用免疫抑制比濁法、離子交換層析法測定HbA1c結(jié)果無明顯差異性，P＞0.05，不存在統(tǒng)計學意義。

表1 兩種測定方法測定HbA1c結(jié)果情況（χ—±s）

2.2 兩種方法測定HbA1c結(jié)果回歸分析情況，見表2。三組兩種方法結(jié)果的回歸方程比較均無顯著差異性，P＞0.05，無統(tǒng)計學意義。145份測定結(jié)果回歸方程：Y=0.9458X+0.3825，相關(guān)系數(shù)分別為0.8052、0.9523、0.9685。

表2 兩種方法測定HbA1c結(jié)果回歸分析比較

2.3 臨床結(jié)果可接受性能：依據(jù)臨床使用要求，通過醫(yī)學決定水平的系統(tǒng)誤差對測定結(jié)果進行判斷是否為可接受范圍，本組HbA1c結(jié)果的系統(tǒng)誤差均在臨床可接受水平范圍內(nèi)。

3 討 論

HbA1c是Hb與糖類通過非酶反應(yīng)結(jié)合而成，合成過程具有緩慢、不可逆的特點，血糖水平暫時性波動也不會對其造影響[2]。人體形成的HbA1c含量隨著血液中葡萄糖水平的升高而提高，人體血液中HbA1c含量在紅細胞死亡前也會保持相對穩(wěn)定，所以，HbA1c的水平不受抽血時間、是否空腹、是否使用胰島素等因素的影響，是判定糖尿病患者長期控制的重要指標[3]。HbA1c對早期糖尿病患者有重要的篩查意義，可作為輕度糖尿病、2型糖尿病及隱形糖尿病的早期診斷指標；HbA1c在糖尿病治療中可準確評價血糖控制情況，糖尿病未得到良好控制時，HbA1c水平會明顯升高；HbA1c是鑒別、診斷微小血管并發(fā)癥的重要指標，可對糖尿病出現(xiàn)慢性并發(fā)癥及其發(fā)展狀況進行準確評估。

臨床上微柱法離子交換層析法、免疫凝集法、親和層法及高分離度液相法等多種方法均可對HbA1c進行測定方法較多[4]。高分離度液相色譜法是臨床檢測的參考方法，但所需儀器價格極高。Bio-Rad全自動血紅蛋白分析儀采用的是非多孔陽離子交換液相色譜測定原理，分析儀通過三種不同濃度的緩沖液，可將Hb中的HbA1c等六種組成成分進行分離與測定。全自動血紅蛋白分析儀具有快速、簡便、準確及精巧等優(yōu)點，確保了測定結(jié)果的準確性與可信性，能從全血試管中自動吸取標本，隨后進行稀釋與分析，3min內(nèi)可完成每個樣本的檢測，比其他分析儀較先進。免疫抑制比濁法基本原理為當抗原、抗體在特殊稀釋下以合適的比例進行反應(yīng)時，自液相吸出形成的可溶性免疫復合物，形成微粒，造成反應(yīng)液發(fā)生濁度，從而經(jīng)檢測反應(yīng)液濁度與一系列標準品比對，計算出血液中HbA1c的含量，其方法具有檢測速度快、易操作性、靈敏度高等優(yōu)點，可在全自動生化分析儀上進行自動化分析。本組結(jié)果顯示，以上兩種方法測定HbA1c結(jié)果無明顯差異，回歸方程相關(guān)系數(shù)＞0.95，提示X的分布范圍適宜，可采用回歸統(tǒng)計的方法對二者間的系統(tǒng)誤差進行分析與比較，本組HbA1c結(jié)果的系統(tǒng)誤差均在臨床可接受水平范圍內(nèi)。綜上所述，免疫抑制比濁法、離子交換層析法進行HbA1c測定，均能滿足臨床糖尿病患者的監(jiān)測需求，各具優(yōu)點，測定結(jié)果具有可比性，適合臨床廣泛推廣應(yīng)用。

[1] 索艷,李強.糖化血紅蛋白測定方法及影響因素的研究進展[J].醫(yī)學研究生學報,2010,23(2):104-107.

[2] 王瑤,譚煒.分析前標本不同處理方式對糖化血紅蛋白檢測結(jié)果的影響[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2010,7(20) :46-48.

[3] 胡進訪,吳雁.糖化血紅蛋白檢測方法學的研究進展[J].醫(yī)學綜述,2010,16(13):133-136.

[4] 李曉莉.2型糖尿病患者血清糖化血紅蛋白檢測與分析[J].中國當代醫(yī)藥,2010,17(26):82-83.

R587.1；R446.1

：B

：1671-8194（2013）06-0212-02