微柱凝膠技術測定孕婦IgG抗A（B）效價分析

余永雄，廖 彭（廣西壯族自治區梧州市婦幼保健院檢驗科 543002）

微柱凝膠法具有靈敏度高，特異性強，操作簡單，凝集現象易于觀察，結果可長時間保存等特點。本文應用微柱凝膠法對220例O型Rh（D）陽性孕婦進行IgG抗A（B）效價測定，判斷胎兒的受害情況，以便及早采取相應的預防措施，促進優生優育。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2012年1～9月，在本院產科門診進行產前檢查，孕婦血型均為O型Rh（D）陽性、其丈夫為非O型Rh（D）陽性共220例，其中A型88例，B型110例，AB型22例。

1.2 方法

1.2.1 試劑與儀器 微柱凝膠卡為強生公司的抗人球蛋白（IgG，C3b/C3d）多特異檢測試劑卡，0.2mol/L二巰基乙醇液、BioVue離心機和BioVue孵育器均為強生公司提供。AB標準紅細胞為上海血液生物醫藥公司提供。

1.2.2 標本處理 取孕婦血清0.2mL加巰基乙醇（2－Me）應用液0.2mL充分混勻，將試管口用橡皮塞塞緊，置37℃水浴30min，以充分破壞血清中的IgM類抗體，吸取經2－Me處理的血清0.2mL用生理鹽水作1∶8、1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512、1∶1 024倍比稀釋。

1.2.3 微柱凝膠法抗人球試驗 取40μL的1%標準紅細胞懸液（用何種細胞取決于父方血型）加入抗人球蛋白卡，再分別加入40μL不同效價的稀釋血漿，37℃孵育15min離心5 min，判讀結果，記錄。判斷標準：紅細胞復合物位于凝膠中近底部為1＋，大部分紅細胞復合物位于凝膠表面，少部分位于凝膠中上部為3＋［1］。

1.3 統計學處理 數據經EXCEL 2003分類處理后進行統計分析。

2 結 果

微柱凝膠法檢測O型孕婦血型血清抗體220例，IgG抗體效價大于或等于1∶64者77例（35.00%），其中O－A型夫婦IgG抗A效價大于或等于1∶64者28例（12.73%），O－B型夫婦IgG抗B效價大于或等于1∶64者39例（17.73%），O－AB型夫婦IgG抗A（B）效價均大于或等于1∶64者10例（4.54%），見表1。

表1 220例O型孕婦IgG抗體效價結果

3 討 論

新生兒溶血病是由于母親與胎兒血型不合引起，母親因妊娠而被免疫時，體內的IgG抗A（B）經胎盤侵入胎兒血循環，這類IgG抗體通過胎盤作用于胎兒紅細胞，發生同種免疫反應，使之產生不同程度的溶血，嚴重者可造成胎兒死亡。發生新生兒溶血病的程度完全取決于父親的血型以及母親所對應的抗體效價［2］。對ABO血型為O型的孕婦，丈夫ABO血型為A型、B型、AB型者，在孕期進行IgG抗體效價檢測是非常有必要的，當母親血清中IgG抗A（B）效價大于或等于1∶64時新生兒有受害機會，當效價大于或等于1∶128時新生兒可能受害［3－4］。本研究結果表明，孕婦ABO血型不合者檢出IgG抗A（B）效價陽性有新生兒溶血病危險者占35.00%，因此應用科學有效的方法檢測孕婦IgG抗A（B）效價是預防新生兒溶血的重要措施。

微柱凝膠抗人球蛋白試驗是建立在傳統的試管法抗人球蛋白試驗基礎之上的一種新方法，是紅細胞抗原與抗體在凝膠介質中的凝集反應；凝集紅細胞不能通過具有分子篩作用的凝膠顆粒構成的膠體介質，從而使游離紅細胞和凝集紅細胞得以分離的原理進行，具有靈敏度與準確性好，操作簡便，結果穩定，重復性，易于觀察和判讀等優點［5］。由于新生兒溶血病的發病機會隨孕婦IgG抗體效價的升高而增大，且孕婦抗體效價上升的時期越早，速度越快，其新生兒發病的機會也越大［6］。因此，建議O型妊娠婦女在孕16、28、36周時各做一次血型免疫抗體篩選，以評估抗體水平并監控其變化，并對高效價的IgG抗A（B）孕婦產前進行有效的治療，從而有效減少新生兒溶血病的發生［7－8］。

［1］ 李明，武建新.微柱凝膠法檢測孕婦IgG抗A（B）抗體效價結果的判定［J］.國際檢驗醫學雜志，2012，33（11）：1347－1348.

［2］ 何靜，陳方祥，劉建忠，等.BioVue微柱凝膠法檢測孕婦產前抗體效價分析［J］.重慶醫學，2007，24（36）：2482－2483.

［3］ 劉智勇，董玉紅，何鳳娥，等.微柱凝膠法在檢測孕婦IgG抗體中的應用研究［J］.成都醫學院學報，2010，5（2）：149－151.

［4］ 盧發強，劉景漢，歐陽錫，等.孕產婦血型抗體與HDN發生率及溶血程度的臨床研究［J］.中國醫師雜志，2004，6（10）：1300.

［5］ Nathalang O，Chuansumrit A，Prayoonwiwat W，et al.Comparison between the conventional tube technique and the gel technique in direct antiglobulin tests［J］.Vox Sang，1997，72（3）：169－171.

［6］ 胡志紅，孟黎，胡詠梅，等.母嬰ABO血型不合與新生兒溶血病的關系［J］.山西醫科大學學報，2004，35（6）：618－619.

［7］ 曹瓊，蘭炯采.新生兒溶血病的產前診斷方法研究進展［J］.中國輸血雜志，2003，16（1）：67－68.

［8］ 楊娟，龔華，李娜.探討微柱凝膠法在檢測孕婦ABO血型IgG抗體效價中的應用［J］.檢驗醫學，2011，10（26）：692－693.