類風濕因子(RF)對HAV－lgM、HCV－lgM抗體檢測的影響

景紅麗

(山西省運城市中心醫院檢驗科044000)

病毒性肝炎是肝癌的重要病發原因，對人類的身心健康造成了極大危害，近幾年在這方面的發病機制，檢測方法等方面的深入研究也越來越多。甲型病毒性肝炎與丙型病毒性肝炎均是由肝病毒引起的傳染病，可導致肝細胞炎癥、變性與壞死。前者主要通過胃腸道傳染，后者主要通過血液傳播，一般性接觸不會傳染，具有高隱匿、高漏診、高慢性化的特點。然而與之相對的是，中國公眾對甲型病毒性肝炎、丙型病毒性肝炎的認知率偏低、就診率低、治療率低。很多病毒性肝炎患者血清中都能檢測出自身免疫抗體，RF被檢出的幾率較高，類風濕因子(RF)是在血清中檢測出的大多為IgM型，可推測，高RF濃度在有些情況下對于病毒性肝炎抗體的檢測有干擾作用，尤其是IgM型抗體。但是，當前基本都是直接采用ELISA法檢測患者血清病毒性肝炎IgM抗體，而研究RF對IgM抗體影響的報道比較少，本研究采用酶聯免疫吸附試驗對HAV－lgM、HCV－lgM抗體進行檢測，在對其中的RF中和后對其再次重新檢測，來研究RF對于HAV－lgM、HCV－lgM抗體檢測有影響。

資料與方法

1．一般資料:選取我院2011年6月至2012年5月免疫室近一年的常規檢測HAV－lgM、HCV－lgM抗體為陽性的標本。分別為抗HAV－IgM陽性標本組與抗HCV－IgM陽性標本組，并經檢測兩組標本HBsAg均為陰性。其中，抗HAV－IgM陽性標本:52例;抗HCV－IgM陽性標本:60例。

2．試劑:RF－－IgM診斷試劑為選用德國歐蒙公司制造，HAV－IgM抗體試劑盒和抗HCV－IgM診斷試劑盒均為上海科華生物工程股份有限公司產品，RF測定試劑為羅氏公司配套試劑。

3．主要儀器:羅氏全自動生化分析儀P800，美國BIO－RAD Model－3550uV酶標儀。

4．方法:采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)方法檢測HAV－lgM、HCV－lgM抗體，并采用速率法在全自動生化分析儀檢測標本RF的值，檢測嚴格按照說明書進行操作;中和RF實驗以50m l血清加50m l單抗人RF－IgM診斷血清混合物，經過37℃孵育半小時，放入到0～8℃的容器中，在36℃半小時后，移至到4℃下過夜。在中和RF后對標本HAV－lgM、HCV－lgM抗體重新檢測。

5．統計學方法:兩組定性資料采用X2，P＜0．05為差異有統計學意義。

結果

1．RF測定:在兩組112例標本中，RF＞20IU/mL為陽性，RF陽性標本29例。在對RF陽性進行診斷時，還要結合臨床表現及其他醫學檢查的結果，以此來防止出現漏診與誤診［1］。

2．RF對抗HAV－IgM陽性標本影響:52例抗HAV－IgM陽性標本組中檢測出RF陽性標本15例，在中和之后再次進行檢測，顯示結果11例轉為陰性，其他仍然表現為陽性，其中2例顯示為弱陽性，假陽性率為21．2%。

3．RF對抗HCV－IgM陽性標本影響:60例抗HCV－IgM陽性標本組中檢測出RF陽性標本14例，在中和之后再次檢測，顯示結果12例轉為陰性，其他16例仍然表現為陽性，陽性率為20．0%。

4．比較RF對兩組標本的影響綜上結果顯示，RF對兩組的檢測結果均有干擾，將兩組數據采用X2檢驗，結果顯示RF對兩組的影響沒有顯著差異，無統計學意義(P＞0．05)，結果見表1。

表1 RF對抗HAV－IgM陽性標本組與抗HCV－IgM陽性標本組的影響

5．低濃度RF與高濃度RF導致的假陽性結果比較，其中78例低濃度標本中假陽性6例(RF＜160IU/m L)，34例高濃度標本中假陽性17例(RF≥160IU/mL)，將它們之間的RF對IgM抗體檢測的假陽性率大小進行比較。結果顯示兩組差別有明顯意義(P＜0．05)，表明高濃度的RF對于檢測結果的干擾大。結果見表2。

表2 低濃度RF與高濃度RF導致的假陽性結果比較

討論

病毒性肝炎分布于世界各地，也是我國常見的感染性疾病之一。目前臨床上有關診斷甲型病毒性肝炎與丙型病毒性肝炎主要分別是采用酶聯免疫法測定血清中的抗HAV與抗HCV。以往的一些文獻資料報道了關于類風濕因子(RF)對某些酶聯免疫法檢測抗體試驗的影響，報告稱在實驗中RF與包被板中某些不純物質結合，在加入酶標抗體后，RF與抗體的Fc段結合，從而導致了假陽性的結果。同時也有報道在病毒性肝炎患者中，RF的檢出率明顯偏高。

類風濕因子(RF)是衡量是否患有類風濕疾病的判斷標準，它的變化將會對人的身體產生較大的影響，有專家指出類風濕因子陽性或者類風濕因子高了，都很有可能是類風濕關節炎患者。類風濕因子在實驗室的診斷描述中分為五種類型，分別為IgM、IgA、IgG、IgD、IgE，類風濕因子時類風濕關節炎血清中針對于IgGFc片段上抗原表位的一類自身抗體，類風濕因子陽性患者比較多，并且大多患有關節外表現。本文主要研究類風濕(RF)對于甲型病毒性肝炎、丙型病毒性肝炎IgM抗體的影響。IgM型類風濕因子是實驗診斷常用的血清學指標，但其特異性與敏感性均較低［2］，對于病毒性肝炎IgM抗體類的抗體檢驗有干擾已經有了些報道，本院的實驗也證明了RF對于兩組HAV－lgM、HCV－lgM抗體檢測有明顯干擾。而其中的原因有可能是RF能夠與包被板的抗U－IgG部分段結合。在受到干擾的標本中，RF有陽性濃度達到了610IU/mL，其中也有濃度僅為40IU/mL，在未受到干擾的標本中同樣也出現了高濃度與低濃度的陽性者。這一現象似乎表明某一個體，RF對于病毒性IgM抗體的干擾沒有規律可循。而其中的原因可能與RF自身的特異性與同系的特異性有關，一種RF不能與所有的IgG分子Fc部分的抗原結合，只有當RF抗原的決定簇與IgG分子上段的空間結構有互補性時才有可能結合，即只有標本中血清存有能與IgG結合的RF時，并且RF必須達到一定的濃度，才能夠有效地與標本中的病毒肝炎IgM抗體競爭性和抗u鏈結合，近而導致呈現假陽性。所以RF與IgGFc部分段的結合是隨機的，沒有結合規律可循。因此在某一標本中的RF是否能夠引起干擾事前沒有辦法預料到，并不是只要RF的濃度高就能對標本產生干擾，低濃度的就不會有干擾，這也是本院實驗所證實到的。但是在實驗結果還可以看到，對于群體高濃度RF的干擾率明顯比低濃度RF高。

RF是一種沒有特異性免疫復合物存在的血清學的標志，凡是對于血清IgM能夠產生抗體的人都可以在血清中檢測RF［3］。正常人大約占有1%～5%，有文獻報道在正常群體中的RF南方人的陽性率比北方人的高。同時在一些具有感染性的疾病中，比如感染性心內膜炎、慢活肝等疾病中，也可以檢測到RF。所以RF在病毒性肝炎IgM抗體的臨床檢測中導致的假陽性率比較高，應該給予重視。

綜上所述，因為RF在正常人和多種疾病的人群的血清中存在，所以經常會對檢測結果產生影響，因此在對此類IgM抗體陽性標本檢測時，最好是對RF先中和然后在進行檢測，以此來提高檢測結果的準確率與可靠性。類風濕因子(RF)對于甲型病毒性肝炎與丙型病毒性肝炎IgM抗體均有影響干擾，但對兩組的干擾率并沒有顯著性差異，高濃度RF比低濃度RF的對HAV－lgM、HCV－lgM抗體檢測干擾率較大，本文的探究為臨床判斷檢驗出現的假陽性結果提供了參考，具有臨床應用價值。

1 隋振鐵，郝鐵，劉冰．AKA抗體、抗－CCP抗體和RF分型在類風濕性關節炎診斷的應用［J］ ．標記免疫分析與臨床，2011，18(6):423－425．

2 趙艷，史梅，王清平．抗CCP抗體對關節疾病患者類風濕關節炎的診斷價值研究［J］ ．中國醫療前沿，2011，6(17):58－59．

3 劉松堅，徐云峰．類風濕因子及其濃度對甲肝、丙肝IgM抗體的影響［J］ ．中國療養醫學，2009，18(9):842－843．