蘋果渣多酚對(duì)高脂大鼠減肥降脂影響

葛蕾

（淄博市食品藥品檢驗(yàn)所，山東 淄博 255000）

我國(guó)是世界最大的濃縮果汁生產(chǎn)國(guó)和出口國(guó)，蘋果渣是果汁廠榨汁后的下腳料。長(zhǎng)期以來(lái)，果汁廠將其作為廢渣拋棄，造成了環(huán)境的極大污染和資源的嚴(yán)重浪費(fèi)。研究發(fā)現(xiàn)，蘋果渣中含有豐富的多酚類物質(zhì)，如綠原酸、兒茶素、表糖兒茶素、蘋果縮合丹寧、根皮苷、槲皮苷、原花青素等[1]。藥理研究表明，蘋果多酚具有預(yù)防齲齒、高血壓、過(guò)敏反應(yīng)，抗血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化、阻礙紫外線吸收等多種保健功能[2-4]。蘋果多酚主要存在于果皮中，蘋果加工企業(yè)排出的果渣中絕大部分是果皮，所以，果渣中多酚含量非常豐富。本研究采用高脂大鼠為模型，給予相應(yīng)劑量的蘋果渣多酚，以藥理學(xué)的方法探討蘋果渣多酚對(duì)高脂大鼠體重及血清中脂質(zhì)代謝相關(guān)指標(biāo)的影響，從而為蘋果渣多酚的進(jìn)一步開發(fā)和利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 材料與儀器

紅富士蘋果：產(chǎn)自沂源燕崖。

蘋果渣多酚：淄博市食品藥品檢驗(yàn)所實(shí)驗(yàn)室自制。

SD 雄性大鼠50 只，體重160 g～190 g，山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司提供。

血清甘油三酯（TG）、血清總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDLC）試劑盒：保定長(zhǎng)城臨床試劑有限公司。

1.1.2 儀器

超聲洗滌儀：昆山市超聲儀器有限公司；HHS-4s電熱恒溫水浴鍋：上海南陽(yáng)儀器有限公司；754N 紫外可見分光光度計(jì)：上海精密科學(xué)儀器有限公司；TGL-16C 高速離心機(jī)：上海安亭科學(xué)儀器廠；TD12001 電子天平；冷凍干燥儀；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

1.2 方法

1.2.1 蘋果渣多酚的制備

蘋果清洗→破碎榨汁→果渣冷凍干燥→加70%乙醇超聲提取2 次→離心→減壓回收→蘋果渣多酚粗提物→乙醇溶解→XDA-5 型大孔樹脂純化→解析液減壓濃縮→冷凍干燥→蘋果渣多酚純化物（經(jīng)Folin-酚法[5]測(cè)定純度78.4%，以總酚計(jì)）。

1.2.2 高脂大鼠模型的建立

將50 只大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)5 d 后，隨機(jī)分為5 組，每組10 只。正常對(duì)照組給予基礎(chǔ)飼料，高脂模型組和蘋果渣多酚3 個(gè)劑量組大鼠飼喂高脂飼料[6]（基礎(chǔ)飼料84.5%，豬油5%，蛋黃粉10%，膽鹽0.5%）。大鼠飼喂高脂飼料14 d 后稱重，空腹12 h，眼眶取血測(cè)定血清甘油三酯（TG）、血清總膽固醇（TC）水平，以確定動(dòng)物模型的建立。

1.2.3 動(dòng)物給藥

高脂大鼠模型建立后，每天9：00 按不同劑量對(duì)大鼠進(jìn)行灌喂。蘋果渣多酚3 個(gè)劑量組給藥量分別為低劑量15 mg/kg·bw，中劑量30 mg/kg·bw，高劑量60 mg/kg·bw，連續(xù)28 d。試驗(yàn)期間大鼠自由飲水，飼養(yǎng)環(huán)境溫度為室溫。

1.2.4 實(shí)驗(yàn)指標(biāo)

實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分組后，稱重，眼眶取血分別測(cè)定血清血脂。試驗(yàn)期間，每周固定時(shí)間稱重。灌喂蘋果渣多酚28 d 后，禁食12 h，麻醉解剖大鼠，心臟采血，分離血清，分別測(cè)定TG、TC、HDL-C、LDL-C。解剖大鼠，剝離雙側(cè)睪丸墊脂肪，用濾紙吸去表面組織液，在電子天平上稱其濕重，計(jì)算脂體比。取出肝臟，進(jìn)行病理檢查。

1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS13.0 軟件中one-way ANOVA 進(jìn)行處理和顯著性分析檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 高脂大鼠模型的建立

大鼠飼喂14 d 后，稱重，空腹12 h，眼眶取血測(cè)定TC、TG 水平，以確定動(dòng)物模型的建立，結(jié)果見表1。

表1 蘋果渣多酚飼喂前大鼠血脂水平（n=10，）Table 1 Serum lipid level of rat before fed apple pomace polyphone（n=10，）

由表1 可見，4 個(gè)高脂飼料組其血脂水平明顯高于正常對(duì)照組（P＜0.01），說(shuō)明高血脂大鼠模型建立成功。

2.2 蘋果渣多酚對(duì)大鼠體重、內(nèi)臟脂肪及脂體比的影響

蘋果渣多酚對(duì)大鼠體重、內(nèi)臟脂肪及脂體比的影響結(jié)果見表2。

表2 蘋果渣多酚對(duì)大鼠體重、內(nèi)臟脂肪及脂體比的影響（n=10，）Table 2 Effect of apple pomace polyphone on rat weight，instrnal organs fat and fat/weight ratio（n=10，）

由表2 可以看出，實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，各實(shí)驗(yàn)組之間大鼠體重?zé)o顯著差異（P＞0.05）；實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，蘋果渣多酚中、高劑量組大鼠體重、內(nèi)臟脂肪重與高脂模型組相比，有顯著差異（P＜0.05），說(shuō)明蘋果渣多酚對(duì)大鼠體重及脂肪的形成有明顯抑制作用。蘋果渣多酚高劑量組大鼠脂體比減少具有顯著差異（P＜0.05）。

高脂模型組大鼠肝臟呈黃色，已呈明顯脂肪變（正常大鼠肝臟呈褐色）。蘋果渣多酚各劑量組病變輕于高脂模型組，且蘋果渣多酚劑量越高，肝臟顏色越接近正常對(duì)照組。表明蘋果渣多酚對(duì)高脂飼料致大鼠脂肪肝形成有阻止作用，且與劑量有一定相關(guān)性。

2.3 蘋果渣多酚對(duì)大鼠TG、TC、HDL-C、LDL-C 的影響

蘋果渣多酚對(duì)大鼠TG、TC、HDL-C、LDL-C 的影響，見表3。

表3 蘋果渣多酚對(duì)大鼠血清TG、TC、HDL-C、LDL-C 的影響（n=10，）Table 3 Effect of apple pomace polyphone on serum TG，TC，HDL-C and LDL-C levels of rat（n=10，）

由表3 可知，蘋果渣多酚中、高劑量組TG 含量與高脂模型組之間存在顯著差異（P＜0.05）。隨著蘋果渣多酚劑量增加，TG 含量呈下降趨勢(shì)，蘋果渣多酚劑量越大，降TG 效果越好。

從TC 指標(biāo)可以看出，蘋果渣多酚低、中劑量組與高脂模型組之間存在極顯著性差異（P＜0.01），說(shuō)明蘋果渣多酚能夠降低高脂大鼠的TC 含量。隨著蘋果渣多酚劑量增加TC 呈上升趨勢(shì)，說(shuō)明蘋果渣多酚與降低TC 濃度之間存在量效關(guān)系，在此范圍內(nèi)，蘋果渣多酚低劑量組降TC 效果最好。

從HDL-C 指標(biāo)看，蘋果渣多酚低劑量組與高脂模型組之間存在極顯著性差異（P＜0.01），中、高劑量組與高脂模型組之間也存在顯著性差異（P＜0.05）。說(shuō)明蘋果渣多酚可以有效提高HDL-C 的含量，并且蘋果渣多酚對(duì)提高HDL-C 的含量有一定的量效關(guān)系，即隨著劑量的增加，HDL-C 呈下降趨勢(shì)，其中蘋果渣多酚低劑量組對(duì)提高HDL-C 含量效果最好。

從LDL-C 指標(biāo)看，蘋果渣多酚各劑量組與高脂模型組之間存在極顯著性差異（P＜0.01）。這說(shuō)明蘋果渣多酚可以有效降低LDL-C 的含量，其中蘋果渣多酚中劑量組降低LDL-C 含量效果最好。

3 討論

隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展，人民生活水平的不斷提高，高脂血癥、肥胖逐漸成為影響身體健康的重要因素[7]。高脂血癥和肥胖是動(dòng)脈粥樣硬化和心血管病發(fā)生發(fā)展的重要因素。蘋果多酚在今年來(lái)備受科研工作者的關(guān)注，研究熱點(diǎn)之一就是對(duì)血脂的影響[8]。研究表明，實(shí)驗(yàn)劑量的蘋果多酚可以通過(guò)促進(jìn)膽固醇代謝分解和抑制腸吸收，來(lái)發(fā)揮降低膽固醇和抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用[9]。蘋果多酚可以在基因水平影響大鼠膽固醇調(diào)控酶[10]，從而實(shí)現(xiàn)降低膽固醇的作用。蘋果渣多酚與蘋果多酚成分基本一致，所以在研究蘋果渣多酚過(guò)程中，可以很好地借鑒蘋果多酚的研究成果。本研究結(jié)果表明，蘋果渣多酚可以明顯抑制大鼠體重增長(zhǎng)，并可以明顯降低高脂血癥大鼠血清TG 和TC 含量，提高HDL-C 含量，降低LDL-C 含量。因此，蘋果渣多酚對(duì)大鼠具有減肥降血脂的作用。蘋果渣多酚之所以有很好的減肥降脂作用，是因?yàn)槠渲泻卸喾N多酚類的有效成分。究竟其中何種多酚類成分在減肥降脂過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵性作用，尚待進(jìn)一步研究。

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[5]Singleton VL,Rossi JA.Colorimertry of total phenolics with phosphomolybdic-phosphotungstic acid reagents[J].American journal of enology and viticulture,1965,32：58-63

[6]徐淑云.現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M]北京：人民衛(wèi)生出版社,1991：1260-1265

[7]王麗云,凌寶銀,趙榮.復(fù)方茶多酚片預(yù)防性降脂減肥作用研究[J].中國(guó)生化藥物雜志,2006,27(5)：299-301

[8]張澤生,史坤,張穎,等.蘋果多酚的研究進(jìn)展[J].食品研究與開發(fā),2011,32(5)：174-178

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