外界溫度和放置時間對網織紅細胞及其參數測定的影響

李玉芹，江峰錦

（1.四川省醫學科學院·四川省人民醫院檢驗科，成都 610072；2.重慶市渝北區人民醫院檢驗科，重慶 401120）

網織紅細胞是晚幼紅細胞脫核后仍含有殘留RNA的紅細胞，用煌焦藍染色后，根據RNA含量的多少著色呈點狀及網狀。其傳統分型方法是在顯微鏡下進行分類計數（計數1 000個紅細胞中的網織紅細胞），根據形態將其分為4型，此種方法費時費力，受人為因素的影響較大。隨著科學的不斷發展，自動化血液細胞分析儀器的廣泛使用，網織紅細胞計數也由全自動血細胞分析儀逐步代替手工操作，并將網織紅細胞精確分為高熒光強度網織紅細胞（HFR）、中熒光強度網織紅細胞（MFR）、低熒光強度網織紅細胞（LFR）3部分。但影響血細胞分析儀計數的因素很多，除了儀器本身的精密度與準確性、試劑質量、操作者自身水平的高低、標本采集等因素外，標本采集后保存溫度及放置時間也是很重要的影響因素。為此，筆者對53例不同溫度下放置不同時間的靜脈血標本測定其網織紅細胞及其參數，以了解時間和溫度對網織紅細胞及其參數測定的影響，現報告如下。

1 材料和方法

1.1 材料

53例標本來源于我院門診病人，標本收集以EDTA－K2鹽抗凝真空管（BD公司生產）采集新鮮靜脈抗凝全血。

1.2 儀器和試劑

日本希森美康公司生產的Sysmex XE－2100全自動血細胞分析儀及其配套試劑；質控品是Sysmex公司生產在線質控物，分為高、中、低3個水平。

1.3 方法

1.3.1 Sysmex XE－2100血細胞分析儀各項參數均經校準，每天用Sysmex公司生產高、中、低3個水平的質控品進行室內質控。

1.3.2 檢測 將靜脈血標本采集后立即上機檢測（用手動方法，為保證結果的可靠性，減少人員操作誤差，所有實驗均由1人完成）網織紅細胞及其參數（此次計數為0h結果），然后將標本均勻分成兩組（用未加抗凝劑的空白管），一組放室溫（24℃），另一組放冰箱（4℃），分別在2、4、6、8、10、12、24、48、72h測定網織紅細胞及其參數。

1.4 統計學方法

采用SPSS 12.0軟件進行統計學處理，統計數據以均數±標準差（±s）形式表示，運用配對t檢驗進行統計學計量分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 室溫（24℃）不同放置網織紅細胞及其參數測定結果

網織紅細胞及其參數在12h內與即刻值比較差異無統計學意義（P＜0.05），12h之后與即刻值比較差異有統計學意義（P＜0.05）（見表1）。

2.2 冰箱（4℃）不同放置時間網織紅細胞及其參數測定結果

與即刻值進行比較，網織紅細胞百分率和HFR在72h內差異無統計學意義（P＞0.05），IRF、LFR、MFR值與即刻值比較，差異有統計學意義（P＜0.05）（見表2）。

表1 室溫（24℃）不同放置時間網織紅細胞及其參數測定結果

表2 冰箱（4℃）不同放置時間網織紅細胞及其參數測定結果

3 討論

網織紅細胞是晚幼紅細胞脫核后到完全成熟紅細胞間的過渡細胞，是反映骨髓造血功能的重要指標。在貧血診斷、療效觀察、腫瘤化療及骨髓移植等方面都有重要的臨床價值［1－4］。

隨著檢驗技術的不斷發展，目前對網織紅細胞的檢測技術已由原先簡單傳統的手工計數法衍變成現在的血細胞分析儀檢測，不僅能更精確地計數網織紅細胞的個數，還能將網織紅細胞精確地分為HFR、MFR及LFR 3部分，即“分群”。熒光越高，表示網織紅細胞含核酸越多，細胞也就越幼稚。IRF為MFR和HFR之和（MFR＋HFR），表示幼稚細胞占總Ret的百分比。而對骨髓移植和腫瘤化療病人主要是觀察網織紅細胞參數即“分群”的變化，特別是分析 HFR 或IRF的變化［5－8］.

網織紅細胞的發育是從晚幼紅細胞、HFR、MFR到LFR的動態變化過程。為探討標本離體后溫度和時間對網織紅細胞及其參數的影響，我們進行了上述試驗。從表1可以看出網織紅細胞及其參數在室溫（24℃）12h內與即刻值比較無統計學差異，12h之后與即刻值比較均有統計學差異；從表2可以看出，4℃ 保存的標本72h內網織紅細胞百分率和HRF與即刻值比較差異無統計學意義，IRF、LFR、MFR值與即刻值比較24h內差異無統計學意義，24h之后差異有統計學意義。從表1、表2的均值可以看出，在4℃和24℃條件下，IRF均呈降低趨勢，而LFR有升高趨勢，其結果與叢玉隆等［8］報道有一定差異，與白壵等［10］報道一致。在4℃時網織紅細胞及其參數在72h內均值改變不明顯，而24℃時較明顯，對于這種現象，我們認為可能是由于低溫條件下，Ret成熟較慢，RNA消失延遲；還有可能是標本離體后，在較高溫度條件下越幼稚的網織紅細胞向成熟階段發育速度越快，而到了較成熟階段（LFR）發育速度有所減慢所致。

總之，為了保證檢驗結果的準確性，為臨床提供可靠的網織紅細胞及其參數結果，我們認為在測定網織紅細胞及其參數時，標本離體后在室溫12h、4℃24h內應完成檢測。

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