低鹽低亞硝板鴨腌制方法改良與品質鑒評

李鵬程，潘道東，2，* ，曹錦軒

(1.寧波大學海洋學院食品系，浙江寧波315211;2.南京師范大學食品系，江蘇南京210097)

板鴨是我國特有的傳統地方腌臘水禽制品之一。隨著人們生活水平的日益提高，對食品的健康要求也隨之增長。由于傳統板鴨采用高鹽高亞硝腌制，含鹽量通常都在10%以上，相對普通食品含鹽量較高，食用時口感偏咸［1］。而食用高鹽高亞硝食品對人體有害，已不能適應現代消費需求，正面臨著消費群體不斷減小的問題。因此傳統板鴨加工工藝急待改善，低鹽低亞硝化是板鴨產品改進的主要目標之一［2-3］。本研究對板鴨的腌制方法進行了初步的改進，降低了食鹽及亞硝酸鈉的添加量，并對低鹽低亞硝板鴨產品品質進行評鑒。為改善板鴨加工工藝，制作新型健康板鴨提供理論依據和實踐指導。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

原料鴨(櫻桃谷鴨) 寧波大學農貿菜市場;生姜、蔥、八角、食鹽 市售;亞硝酸鈉 食品級;透明高溫蒸煮袋。

C-LM3B 數顯式肌肉嫩度儀 中國天翔飛域國際有限公司;KD 723 可見分光光度計 上海佑科;梅特勒PL403 電子分析天平 上海梅特勒儀器公司;DK-80 型電熱恒溫水槽 廣州東征化玻儀器有限公司;WSC-S 測色色差儀 上海科圣儀器設備有限公司;H2500R-2 湘儀離心機 湘儀離心機儀器有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 樣品制備 在傳統板鴨制作工藝( 肉鴨預處理→干腌→復鹵→風干→成品包裝貯藏) 基礎上，進行改良［4-5］。

肉鴨預處理:選擇大小適中、肌肉豐滿、鴨皮潔白的櫻桃谷鴨為宜。將從市場買來的肉鴨去翅(橈骨、尺骨以下)去鴨蹼，在其翅腋下劃一長約5～6cm的半月口，取出內臟。接著用清水洗去殘留在鴨體內的剩余內臟部分和表面血污，并將其置于清水中1～2h以浸出鴨體內的血液，浸泡結束后瀝干水分再進行腌制。

干腌:將肉鴨用4%食鹽和0.005%(W/W)亞硝酸鈉腌制。食鹽內加少量磨細的茴香后進行炒干，先取3/4 的鹽放入鴨體腔，反復涂抹使鴨體腹腔全部布滿食鹽。把剩下的食鹽從大腿下部開始向上抹，將肌肉由下向上推，逐步抹到胸部兩旁肌肉、鴨脖及鴨口腔內，充分揉搓使食鹽盡可能滲透到鴨肉內。要注意的是去翅去腿以及刀口部分由于鴨皮的破壞容易遭到微生物的侵害，所有這些部分適當增加抹鹽量。將抹完鹽的鴨體置于4℃的保鮮柜中腌制24h。

復鹵即濕腌:腌制結束后除盡鴨體腔內滲出的鹽水，將之前浸泡鴨體得到的血水(血水在貯藏期間需定期煮沸)加鹽配制成新鹵進行復鹵，確保鹵水完全浸過整個板鴨，于4℃的保鮮柜中濕腌12h。

風干:將復鹵結束的板鴨瀝干整型后將其置于煙熏機內，設定25℃條件下進行風干處理，加速板鴨水分的散失，風干時間為5d。

真空包裝:將制得的板鴨成品真空包裝，于-40℃的條件下貯藏，作為待檢測的樣品。

1.2.2 鹽分的測定 按GB/T 12457-2008《鹽分的測定》［6］進行。

1.2.3 水分的測定 按GB/T 5009.3-2003《食品中水分的測定》［7］進行。

1.2.4 剪切力的測定 按NY/T 1180-2006《肉嫩度的測定剪切力測定法》［8］進行。

1.2.5 蛋白質的測定 按GB 5009.5-2010《食品中蛋白質的測定》［9］進行。

1.2.6 脂肪的測定 按GB/T 5009.6-2003《食品中脂肪的測定》［10］進行。

1.2.7 灰分的測定 按GB 5009.4-2010《食品中灰分的測定》［11］進行。

1.2.8 水分活度的測定 按GB/T 23490-2009《食品中灰分的測定》［12］進行。

1.2.9 過氧化值的測定 按GB/T 5538-2005《動植物油脂過氧化值測定》［13］進行。

1.2.10 蒸煮損失率/貯藏失重率的測定 根據公式計算蒸煮損失率及貯藏失重率:

蒸煮損失(%)=(蒸煮前肉重-蒸煮后肉重)/蒸煮前肉重×100

貯藏失重(%)=(貯藏前肉重-貯藏前肉重)/貯藏前肉重×100

1.2.11 硫代巴比妥酸值(TBARS 值)的測定 參考王小軍等人的測定方法［14-15］。

1.2.12 色差的測定 選擇自然光充足之處，剪取大小適合的樣品置于放樣皿中，將色差儀鏡頭垂直置于肉樣橫斷面，鏡口緊扣肉面(不漏光)，同一樣品轉動放樣皿測定3 次，記錄L*、a*、b*值［16］。

1.2.13 羰基值和雙烯值的測定 參考Folch 等［17］的測定方法。

1.2.14 全蛋白提取 將1g 肉樣絞碎，加入2.5mL 提取液(2%SDS，10mmol/L Na2HPO4-NaH2PO4pH7.0)勻漿30s，離心(15min，1500 × g)，除去少量不溶成分，離心后的上清液即為全肌肉蛋白溶液［18］。

1.2.15 蛋白降解及酶活的測定 分別參考汪家政和郭堯君、Elphick、高瑞昌等人的方法［19-22］。

2 結果與分析

2.1 低鹽低亞硝板鴨成分的測定

從制作出的低鹽低亞硝板鴨中隨機取樣(n =5)，分別取其胸肉、腿肉測定各項成分含量，結果如表1 所示。由于風干作用，鴨肉水分含量從79.38%±2.58%下降到41.28%～46.02%，各成分含量相對提高。其中粗脂肪的含量可能由于風干階段油脂的損失而偏低。

同時，還測定分析了不同食鹽及亞硝酸鈉添加量對板鴨鹽分和亞硝酸鹽含量的影響。不同食鹽添加量對板鴨鹽分的影響結果如表2 所示，風干結束時，不同食鹽添加量組總體均數間差異顯著(p ＜0.05)，多重比較各組之間鹽分含量差異顯著(p ＜0.05)。說明食鹽添加量的不同顯著影響了板鴨的鹽分含量。

現階段傳統板鴨亞硝酸鹽添加量通常為0.01%以上，如表3 所示，不同的亞硝酸鈉添加量板鴨胸腿肉中亞硝酸鹽的殘留量差異顯著(p ＜0.05)，說明降低添加量可明顯降低板鴨產品中的亞硝酸鹽的殘留量。

表1 低鹽低亞硝板鴨主要成分Table 1 Main content of dry-cured duck

表2 不同食鹽添加量對板鴨含鹽量的影響Table 2 The influence of different addition of salt on salt content of dry-cured duck

表3 不同亞硝酸鈉添加量對板鴨亞硝殘留量的影響Table 3 The influence of different addition of sodium nitrite on nitrite residue of dry-cured duck

表4 低鹽低亞硝板鴨理化指標Table 4 Typical properties of dry-cured duck

表5 低鹽低亞硝板鴨加工前后的色差值變化Table 5 Changes of color difference of dry-cured duck at different processing stages

2.2 低鹽低亞硝板鴨相關指標的測定

水分活度與食物的安全性和貨架儲藏期密切相關，水分活度越小的食物貯藏期越長，較少出現腐敗變質現象。鴨肉原料的Aw 值為0.98，經腌制后的鴨胸肉Aw 為0.93，腿肉的Aw 為0.96。風干結束后成品各指標變化如表4 所示，板鴨胸肉Aw 值平均為0.83，腿肉的Aw 平均為0.86，隨著水分的減少，板鴨水分活度逐漸降低。一般說來，低鹽低亞硝板鴨能抑制絕大多數的微生物生長(細菌的生長必需水分活度為Aw ＞0.9，酵母為Aw ＞0.87，霉菌為Aw ＞0.8，而肉毒梭菌、沙門氏菌等致病菌的生長必需水分活度在0.92～0.93［23］)，而其主要的微生物侵害是霉菌，需在之后的貯藏階段提高警惕。

鴨肉原料的剪切力值約為1.99kgf，隨著水分的減少鴨肉質地發生變化，嫩度下降，剪切力增大。風干結束板鴨胸肉平均為8.87kgf，腿肉平均為6.44kgf。較大的剪切力是造成板鴨具有獨特口感的原因之一。

板鴨成品較小的初始pH 有利于抑制大多數微生物生長，延緩微生物性腐敗。而產品較高的TBARS 值(0.90)說明板鴨在風干階段脂肪氧化嚴重，應重視風干過程中脂肪氧化的控制。除此之外，根據資料顯示初始菌量與產品的貨架期成反比關系，成品的初始細菌總數在103，說明板鴨在制作的過程中受到了污染，應引起高度的重視。

2.3 低鹽低亞硝板鴨加工前后色差值的變化

低鹽低亞硝板鴨在加工前后色差值的變化情況如表5 所示，經SPSS 分析，L*值總體均數間差異不顯著(p ＞0.05)，多重比較各加工階段之間L*值差異不顯著;a*值總體均數間差異顯著(p ＜0.05)，多重比較得原料、干腌和濕腌階段與風干階段各組差異顯著;b*值總體均數間差異顯著，多重比較得原料和干腌階段與風干階段各組差異顯著;C*值(飽和度，肉色的深淺)總體均數間差異顯著，多重比較結果與a*值相同;H*值(色調角，表示色澤，越低說明肉色越鮮紅，越高說明肉色越黃)總體均數間不顯著，多重比較原料與干腌階段差異顯著。

亞硝酸鈉在肉類制品中不僅起著防腐的作用，還起著呈色的重要作用，使得腌制類肉品具有誘人的棕紅的腌肉色。在相同低亞硝添加量的條件下，研究了不同食鹽添加量對板鴨產品呈色的影響，結果如表6 所示，經分析得各組間C*值、H*值差異均不顯著(p ＞0.05)。

表6 不同食鹽添加量板鴨的色差值變化情況Table 6 Color difference of dry-cured duck processed under different amount of salt

2.4 加工過程中板鴨肌肉中脂肪氧化的測定

羰基與雙烯是脂肪氧化過程的中間體，羰基值即C =O 基團含量的變化，包括醛、酮、酸等，因此它也可以作為脂肪氧化程度的指示性指標;共軛雙烯值即=C—C =基團含量的變化，其指示意義與羰基值相似［24］。如圖1～圖2 所示，南京板鴨加工過程中胸部和腿部肌內脂肪羰基值和雙烯值呈現大致相似的變化趨勢。在原料處理到腌制結束的過程中，胸腿肉中原有的羰基和雙烯轉化為較為穩定的醛與酮，含量均有不同程度的下降，特別是干腌到濕腌階段，胸肉中的羰基值下降程度最大;而在風干過程中胸肉中的羰基值和雙烯值逐漸上升，經風干5d 后，脂肪氧化程度加大，胸腿部的雙烯值、羰基值升高并基本趨于一致。由于本身羰基值很小，受樣品個體差異影響又較大，所以標準差范圍較大。

圖1 板鴨鴨肉中羰基值在加工過程中的變化Fig.1 Changes of carbonyl compound value at different processing stages

圖2 板鴨鴨肉中雙烯值在加工過程中的變化Fig.2 Changes of conjugated dienes value at different processing stages

低鹽低亞硝板鴨加工過程中TBARS 值變化情況如圖3 所示，在腌制階段，由于脂肪與空氣接觸較少，TBARS 值變化不明顯;在風干階段，板鴨與空氣充分接觸，鴨體水分減少，氧氣充分進入鴨肌肉和皮下組織的間隙，脂肪氧化程度加大，TBARS 值明顯提高。腿肉的TBARS 值較胸肉的TBARS 值低，這可能是由于腿部肌肉比較厚實，水分含量有差異，造成氧化程度較小。濕腌工藝階段，板鴨胸腿部略有下降，這可能是由于鴨肉中的部分脂肪溶于鹵水有關。

圖3 板鴨鴨肉中TBARS 值在加工過程中的變化Fig.3 Changes of TBARS value at different processing stages

低鹽低亞硝板鴨加工過程中過氧化值變化情況如圖4 所示，在風干階段，隨著脂肪的氧化以及水分含量的降低，過氧化反應變快，過氧化值上升。但由于肌肉表面及內部的氧化程度不同，從而導致分析上的偏差。

圖4 板鴨鴨肉中過氧化值在加工過程中的變化Fig.4 Changes of peroxide values at different processing stages

2.5 加工過程中板鴨鴨肉中亞硝酸鹽殘留量變化的情況

如圖5 所示，亞硝酸鈉的含量在風干第1d 內迅速上升，隨后含量下降。這是由于風干開始階段隨著水分減少，亞硝酸鹽含量提高。在風干1d 后，隨著板鴨水分的繼續下降，肉品呈弱酸環境，使亞硝酸鹽分解成亞硝根與肌紅蛋白發生成色反應，從而亞硝酸鹽的殘留量逐漸減少［25］。

圖5 亞硝酸鹽殘留量在加工過程中的變化Fig.5 Changes of nitrite residue at different processing stages

2.6 板鴨肌肉蛋白降解的情況

根據汪家政［19］等和郭堯君［20］的方法，采用不連續SDS—PAGE 電泳系統，如圖6 所示，在低鹽低亞硝板鴨加工各階段中，由于內、外源蛋白酶的主要作用下，肌肉全蛋白發生了一定程度的降解，蛋白濃度明顯降低。其中在風干5d 時的板鴨肌肉中31、20ku附近條帶幾乎消失，14.4ku 條帶明顯變弱。隨著蛋白質的降解，板鴨中氨基酸風味及滋味物質含量逐漸增加。

在低鹽低亞硝板鴨后續加工過程，主要是內源蛋白酶和氨肽酶參與蛋白的降解。NaCl 含量的提高對蛋白質水解酶活性有明顯的抑制作用特別是組織蛋白酶［26］。

按照Elphick 的方法，測定不同食鹽添加量的板鴨不同加工階段鈣蛋白酶活性的變化［21］。如表7 所示，不同食鹽添加量的板鴨肌肉中鈣蛋白酶活性變化不同，經SPSS 分析，兩組之間差異不顯著(p ＜0.05)，酶活性與加工階段有交互作用。

表7 低鹽低亞硝板鴨加工過程中鈣蛋白酶活性變化Table 7 Changes of enzyme activity of calpain during dry-cured duck processing

表8 低鹽低亞硝板鴨加工過程中組織蛋白酶B 的活性變化Table 8 Changes of enzyme activity of cathepsin during dry-cured duck processing

圖6 板鴨加工過程中全肌肉蛋白SDS-PAGE 電泳圖Fig.6 SDS-PAGE of muscle protein during dry-cured duck processing

按照高瑞昌等人［22］的方法測定不同食鹽添加量的板鴨不同加工階段組織蛋白酶活性的變化。如表8 所示，低鹽組的酶活性均高于高鹽組。經SPSS 分析，兩組之間顯著差異(p ＜0.05)，酶活性與加工階段有交互作用。

3 結論

低鹽低亞硝板鴨產品的水分活度基本在0.75～0.86，說明即使降低了食鹽添加量，也可保證板鴨的較低的水活度，使其較少出現腐敗變質現象［23］。相對傳統工藝制作的板鴨(高鹽高亞硝)，低鹽低亞硝板鴨產品含鹽量及亞硝酸鹽殘留量顯著降低。

低鹽低亞硝板鴨加工過程中脂肪氧化產生的酮醛類物質是風味物質的重要成分，但是在加工過程和貯藏中過度的脂肪氧化將導致大量的短鏈酮和醛類物質積累，致使脂肪酸敗等多種副反應的發生，從而使其品質發生劣變［27-28］。所以必須在低鹽低亞硝板鴨加工過程中把脂肪氧化控制在一個適當的程度。

低鹽低亞硝板鴨加工過程中肌肉蛋白發生不同程度的降解，導致多肽、非蛋白氮和游離氨基酸含量的逐漸上升。低鹽組的組織蛋白酶相對高鹽組具有更高的活性，更有益于蛋白的降解。在板鴨成熟過程中，這些風味物質前體單獨或與脂類降解產物共同反應生成板鴨獨特的風味物質［29-31］。

由于受實驗條件和時間的限制，本實驗只是根據已有的文獻報道，對食鹽及亞硝酸鈉的添加量做了單一的處理。對于低鹽低亞硝對板鴨的貯藏保鮮，風味變化等問題還有待于進一步研究。

［1］劉曉華，熊勇華，董閩鮮，等.腌制方法對板鴨含鹽量的影響研究［J］.食品工業科技，2004(8) :85-87.

［2］尚永彪，夏楊毅，李紅軍，等.低鹽即食板鴨加工工藝初步研究［J］.糧油加工與食品機械，2003(7) :59-60.

［3］胡會萍，袁娜，丁立孝.低鹽傳統發酵食品的研究進展［J］.中國調味品，2010，35(10) :40-42.

［4］陳婉珠，芮漢明，張玲.板鴨生產工藝及質量關鍵控制點［J］.食品與發酵工業，2005，31(4) :141-143.

［5］曾凡梅，孫衛青.板鴨工藝改良及品質分析［J］.肉類研究，2009(6) :21-23.

［6］GB/T 12457-2008，鹽分的測定［S］.2008.

［7］GB/T 5009.3-2003，食品中水分的測定［S］.2003.

［8］NY/T 1180-2006，肉嫩度的測定剪切力測定法［S］.2006.

［9］GB 5009.5-2010，食品中蛋白質的測定［S］.2010.

［10］GB/T 5009.6-2003，食品中脂肪的測定［S］.2003.

［11］GB 5009.4-2010，食品中灰分的測定［S］.2010.

［12］GB/T 23490-2009，食品中灰分的測定［S］.2009.

［13］GB/T 5538-2005，動植物油脂過氧化值測定［S］.2005.

［14］王小軍，袁文鵬，孟秀梅，等.板鴨貯藏過程中微生物及理化性質的研究［J］.食品工業科技，2008，29(10) :240-243.

［15］孫群.肉制品脂類氧化: 硫代巴比妥酸實驗測定醛類物質［J］.食品科學，2002，23(8) :331-334.

［16］楊明，文勇立，王文建，等.牦牛與黃牛背長肌和股二頭肌宰后色差變化及差異性分析［J］.食品科學，2009，30(19) :104-108.

［17］FOLCH J M，LEES G H，SLOANE S.A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues［J］.Journal of Biology and Chemistry，1957，226(3) :487-509.

［18］陸應林，周光宏，徐幸蓮，等.南京板鴨加工過程中肌肉蛋白降解的研究［J］.食品科學，2009，27(7) :44-47.

［19］汪家政，范明.蛋白質技術手冊［M］.北京: 科學出版社，2001:77-110.

［20］郭堯君.蛋白質電泳實驗技術［M］.北京: 科學出版社，2001:86.

［21］Tsujinaka T，Kajiwara Y，Kambayashi J，et al.Synthesis of a new cell penetrating calpain inhibitor( calpeptin) ［J］.Biochemical and Biophysical Research Communications，1988，153 ( 3) :1201-1208.

［22］高瑞昌，蘇麗，黃星奕，等.腌干鰱魚組織蛋白酶B、L 活力變化的響應面法預測研究［J］.食品科學，2012，33( 17) :136-140.

［23］翁航萍，徐雄新.肉與肉制品的水分活度［J］.肉類研究，2009(5) :67-70.

［24］徐為民，周光宏，徐幸蓮，等.南京板鴨加工過程中脂肪氧化研究［J］.江蘇農業學報，2006，22(4) :452-455.

［25］林婉玲，芮漢明.亞硝酸鹽在板鴨加工過程中的變化［J］.食品與發酵工業，2006，32(7) :42-45.

［26］黃明，羅欣.內源蛋白酶在肉嫩化中的作用［J］.肉類研究，1999(2) :9-14.

［27］RU IZ C J，VENTANAS J，CAVA R，et al.Texture and appearance of dry-cured ham as affected by fat content and fatty acid composition［J］.Food Research International，2000，33:91-95.

［28］TIMONM L，VENTANAS J，CARRAPISO A I，et al.Subcutaneous and intermuscular fat characterization of dry-cured Iberian hams［J］.Meat Science，2001，58:85-91.

［29］GANDEMER G.Lipids in muscles and adipose tissues，changes during processing and sensory properties of meat products［J］.Meat Science，2002，62:309-321.

［30］Huan yan，Zhou guanghong，Zhou gaiming，et al.Changes in flavor compounds of dry - cured Chinese Jinhua ham during processing［J］.Meat Science，2005，71:291-299.

［31］徐為民，周光宏，徐幸蓮，等.南京板鴨生產過程中風味成分組成及其變化［J］.南京農業大學學報，2007，30(1):105-119.