王素玲,劉洪志,季小慧
(1.黑龍江省齊齊哈爾林業學校,黑龍江 齊齊哈爾161006;2.黑龍江省葦河林業局青山林木種子園,黑龍江 哈爾濱150628;3.黑龍江省森林與環境科學研究院,黑龍江 齊齊哈爾161005)
連錢草(Glechomalongituba)(活血丹)為唇形科活血丹屬多年生草本,具匍匐莖,逐節生根,直立莖,高6~30cm,基部通常淡紫紅色,被短柔毛,單葉對生,葉片心型或倒腎型,長0.8~3.2cm,寬1~3cm,邊緣具圓齒,被短柔毛,背面常常紫色。輪傘花絮,通常2花,稀具3~5花,花唇型,花冠淡藍色,淡紫色至淡藍紫色,長1.4~2.3cm,花期5—6月,果期6—7月,綠期4—10月,生于林緣、林下、山坡、路旁,黑龍江省大部分地區有分布。
連錢草是黑龍江省西部半干旱地區園林綠化中不可多得的耐陰地被植物。連錢草綠期長,枝葉繁茂,稠密,根系發達,極耐干旱,花后即匍地生長,形成地毯狀地面,草層低矮,在林下侵占能力強,一旦成片,雜草不易侵入,在株行距15cm×15cm,全光照條件下,45d左右蓋度可達100%。在一定庇陰條件下,如40%~60%光照條件下生長最為宜,觀賞效果最好,在20%的光下也能生長,耐陰性較強,耐踐踏,而且生長速度不很快,不會瘋長、失控,繁殖容易,管理粗放,適宜做庇陰條件下的地被,在封閉性林下或林緣成片進行栽植,或栽植于大型公園林下作地被,其粗糙寬大的葉片,能夠增加許多野趣[1]。
連錢草以往的繁殖方式以種子和扦插繁殖為主,然而,種子量少,不易采集。扦插繁殖系數較低,影響推廣應用進度。為此,開展組培快繁對于擴大連錢草種群規模、保存種質資源等具有十分重要的意義。我們與2011—2012年對其進行了組培快繁的試驗研究。
植株新萌發的側芽為外植體
6- 芐基腺嘌呤(BA)、α- 萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA),均為分析純試劑,由上海伯奧生物科技有限公司提供。生產試驗中使用的瓊脂粉也由上海伯奧生物科技有限公司提供,以綿白糖代替蔗糖。
誘導分化培養基:1/2MS+BA 2.0mg·L-1+NAA 0.5mg·L-1(單位下同);增殖培養基:MS+BA 0.5~1.5+ NAA 0.1~0.5(見表1);生根培養基:1/2MS+IBA 0~1.0+NAA 0~1.0(見表2)。誘導分化培養基和增殖培養基蔗糖濃度為2.0%,生根培養基蔗糖濃度為2.0%;瓊脂6g·L-1;pH值在高壓滅菌前保持5.8~6.0;培養溫度(25±2)℃、光照強度2000lx,連續光照10h·d-1。
側芽連同莖段取出,流水下沖洗30min后,留上部莖段長0.5~1.0cm,置超凈工作臺中,先在75%酒精中浸30s,用無菌水沖洗1次,轉入0.1%升汞中消毒30s~1min,用無菌水沖洗3~5次后,用無菌吸水紙吸去材料表面水分,接種到誘導分化培養基中,再依次轉入增殖、生根培養基中,觀察培養結果,生根后煉苗移栽。
在誘導分化培養基中20d左右的無菌苗四周萌發不定芽。將苗切下轉入增殖培養基中。

表1 不同激素對連錢草組培苗增殖的影響
表1顯示,連錢草在設計的幾種培養基中均能繁殖、分化,相比之下,不同細胞分裂素和生長素濃度處理中,組培苗以培養基1/2MS+BA1mg·L-1+NAA1mg·L-1中的側芽萌發迅速,30d形成叢生苗,長勢良好,繁殖系數可達5.5左右。BA濃度低增殖率下降,BA濃度過高,組培苗分化多、長勢弱。
從增殖培養基中切取長為1cm左右的莖段連同小葉,轉接到生根培養基(見表2)中。結果表明:連錢草容易生根,在設計的幾種培養基中均能生根,相比之下1/2MS+NAA0.1+IBA0.1的生根最佳,生根率達100%。根部成輻射狀對稱。

表2 不同生根培養基對組培苗生根的影響
將連錢草生根培養瓶上的扎口繩松開,使組培苗初步接觸空氣,讓植株開始長出角質層。然后移去瓶口包扎物,讓組培苗充分接觸空氣,2~3d后,組培苗對外界環境已逐漸適應,且培養基已開始長出菌類,此時進行組培苗的出瓶煉苗。首先,小心地用鑷子夾持組培苗將苗從瓶中移出,用流水慢慢沖凈植株根部的培養基,注意切勿傷及根部的根毛,小心地將洗凈的脫毒苗移栽到事先已經滅菌處理過的營養杯中,并用塑料膜進行覆蓋,使營養杯內的相對濕度保持在80%左右,以后定期放風,逐漸降低棚內的相對濕度,直至將塑料膜去掉,移栽成活率在95%以上。
通過試驗篩選出連錢草增殖培養基和生根培養基,并成功移栽組培苗,發現連錢草在離體條件下生長迅速,分化和生根培養良好,作為黑龍江省少有的地被植物,在繁殖過程中,應該考慮在簡化組織培養程序后,開展工廠化生產來提高繁殖系數,擴大連錢草種群,早日廣泛應用于生產。
[1]王杰青.地被植物連錢草和紫花地丁的研究[D].哈爾濱:東北林業大學,2002