狄斯瓦螨對蜜蜂的影響——蜜蜂個體蜂螨數與殘疾、死亡率的關系

狄斯瓦螨（ Anderson and Trueman），一種以西方蜜蜂幼蟲、蛹和成年蜂的血淋巴為食的蜜蜂體外寄生蟲，對意大利蜜蜂蜂群危害嚴重。狄斯瓦螨對蜂群的寄生涉及到很多不同的侵染機制，受到侵害的蜂群通常在三到五年內死亡。無論單只蜜蜂還是整個蜂群都是由于眾多內部有害因素引起的蜂群消失。狄斯瓦螨對蜜蜂的傷害程度與侵染程度成正比，雄蜂蛹受侵染程度高于工蜂蛹，相當于大約20個雌蜂螨侵入一個雄蜂蛹房。

在入侵封蓋的蜂房后不久，成年雌蜂螨以一種貫穿于整個幼蟲、蛹皮膚外的方式生存，以保證他們及其后代以血淋巴為食。起初，雌蜂螨在幼蟲的不同位置獨立取食。由于幼蟲皮外被一層很薄的彈性角質層所覆蓋，短期內蜂螨很難定位一些小的取食口，受傷的表皮也可能迅速愈合。隨著幼蟲的不斷生長，咬傷的傷口不斷增大，但深度不斷減小。形成的穿孔在寄主傷口周圍對寄主組織形成傷害，以吸取血淋巴為食的蜂螨及其后代不斷地在穿孔處取食。這些蜂螨通常在預蛹和蛹期各做一個穿孔取食，已達到不斷感染蜂群的效果。蜜蜂預蛹期時，蜂螨不斷的在蜜蜂的第六腹板取食，并形成穿孔。雌蜂螨最終在寄主蛹期蛻化時形成穿孔，其通常位于寄主蜜蜂腹部第二段的一側，傷口持續幾日不愈合，直至蛹期結束。蜂螨將致大約98～99%的雄蜂和75%的工蜂在胸部一側位置出現更大程度的穿孔。蛹化后測量這些穿孔，其直徑大概都在50～60 μm左右。在呈現褐色的蛹期，穿孔可能到達80～100 μm，甚至更大。

狄斯瓦螨的唾液被認為是導致傷口持續的開裂和觀察到傷口畸形愈合的主要因素。理查德等人對從蜂螨上收集的唾液腺分泌物進行了電泳分析，發現至少有15種截然不同的蛋白條帶，其分子量范圍從17kDa到130kDa。與此同時，用蜂螨唾液腺的分泌物對孵育18小時的番茄蛾毛蟲血細胞進行連續滴定，表明唾液腺分泌物可破壞血細胞并抑制寄主偽足的生長和聚合物形成的能力。故狄斯瓦螨唾液腺分泌物能夠抑制血

山東省蜂業良種繁育推廣中心，泰安271000秦浩然譯

狄斯瓦螨（Varroa destructorAnderson and Trueman），一種以西方蜜蜂幼蟲、蛹和成年蜂的血淋巴為食的蜜蜂體外寄生蟲，對意大利蜜蜂蜂群危害嚴重。狄斯瓦螨對蜂群的寄生涉及到很多不同的侵染機制，受到侵害的蜂群通常在三到五年內死亡。無論單只蜜蜂還是整個蜂群都是由于眾多內部有害因素引起的蜂群消失。狄斯瓦螨對蜜蜂的傷害程度與侵染程度成正比，雄蜂蛹受侵染程度高于工蜂蛹，相當于大約20個雌蜂螨侵入一個雄蜂蛹房。

在入侵封蓋的蜂房后不久，成年雌蜂螨以一種貫穿于整個幼蟲、蛹皮膚外的方式生存，以保證他們及其后代以血淋巴為食。起初，雌蜂螨在幼蟲的不同位置獨立取食。由于幼蟲皮外被一層很薄的彈性角質層所覆蓋，短期內蜂螨很難定位一些小的取食口，受傷的表皮也可能迅速愈合。隨著幼蟲的不斷生長，咬傷的傷口不斷增大，但深度不斷減小。形成的穿孔在寄主傷口周圍對寄主組織形成傷害，以吸取血淋巴為食的蜂螨及其后代不斷地在穿孔處取食。這些蜂螨通常在預蛹和蛹期各做一個穿孔取食，已達到不斷感染蜂群的效果。蜜蜂預蛹期時，蜂螨不斷的在蜜蜂的第六腹板取食，并形成穿孔。雌蜂螨最終在寄主蛹期蛻化時形成穿孔，其通常位于寄主蜜蜂腹部第二段的一側，傷口持續幾日不愈合，直至蛹期結束。蜂螨將致大約98～99%的雄蜂和75%的工蜂在胸部一側位置出現更大程度的穿孔。蛹化后測量這些穿孔，其直徑大概都在50～60 μm左右。在呈現褐色的蛹期，穿孔可能到達80～100 μm，甚至更大。

狄斯瓦螨的唾液被認為是導致傷口持續的開裂和觀察到傷口畸形愈合的主要因素。理查德等人對從蜂螨上收集的唾液腺分泌物進行了電泳分析，發現至少有15種截然不同的蛋白條帶，其分子量范圍從17kDa到130kDa。與此同時，用蜂螨唾液腺的分泌物對孵育18小時的番茄蛾毛蟲血細胞進行連續滴定，表明唾液腺分泌物可破壞血細胞并抑制寄主偽足的生長和聚合物形成的能力。故狄斯瓦螨唾液腺分泌物能夠抑制血

細胞介導傷口愈合并阻止對寄主的反饋，從而不斷的在寄主上取食。

臨近蛹期結束的時候，越來越多的傷口開始逐漸愈合。出現疤痕后，成年蜂在蜂螨出現前封蓋巢房，保護了蛹的生長環境以避免細菌感染。我們觀察到蜜蜂被單一的蜂螨感染后，從蛹脫皮到成蟲時表皮通常是完全閉合的。蛹房通常受到四至五只蜂螨的侵染，延遲蛹傷口愈合。就像成年蜂在脫蛹前一樣，我們在雄性蜂上觀察到患有高度寄生后愈合不完全的大傷口。這意味著剩余的傷口可能會使寄生蟲進入到寄主的體內。在蛹發育時期，這些取食的傷口會受到細菌的感染。工蜂蛹的胸口及雄蜂蛹腹部穿孔處的傷口受到大量細菌侵染，因蜂螨的感染程度不同，約15～30%的蛹傷口出現大量細菌，但有沒觀察到相應的死亡。

通過狄斯瓦螨對單個蜜蜂身體和生理的影響的研究，發現蜂螨可引起很多病癥。感染蜂螨后，初出房蜜蜂的濕重、干重及含水量與蜂螨數的增長呈現負相關。據估計，所有雌蜂螨都出現在蜜蜂的發育階段，寄主將流失其身體3%的水分。寄生蜂螨的蜜蜂頭部和腹部蛋白濃度降低，腹部的碳水化合物濃度同樣出現降低的現象，但檢測不到脂質物質，并沒有出現代謝物質的損失。然而，判斷死亡率的高低和最終崩潰蜂群的蜂房中是否存在蜂螨直接相關。約8.5%的初出房蜜蜂形態畸形，且畸形率與蛹房中蜂螨數量呈正相關。但我們發現不同感染程度的蜜蜂都存在畸形，這可能與傳染性病原體等其他因素有關。蜂螨在24小時內吸取以C14標記的活蜂、死蜂，從而得出一個成年雌蜂螨24小時內可以消耗0.67 μl血淋巴。這同樣證明了蜂螨從一個標記的蜜蜂轉移寄主后，將C14標記傳遞到了一個先前非放射性標記的蜜蜂?；蚴窃醋苑潋谄鞯奈廴舅斐傻霓D移，這是支持蜂螨為病原體介質（如病毒）的重要觀點。

與未感染狄斯瓦螨的蛹相比，感染狄斯瓦螨的蛹其血液中蛋白質含量較低。由于蛋白質通常與個體發育中重要器官的形成有關，這可能表明血淋巴中蛋白含量的降低，對蛹期感染蜂螨的蜜蜂組織出現畸形或不生長的原因。在蛹發育期，未感染的蜜蜂人工孵化后立即出現感染，與未感染的蜜蜂相比咽下腺發育不成熟，這證明了寄生蟲利用幼小寄主的能量和營養，從導致寄主發育不良。

對感染等量狄斯瓦螨后，相同初生重的雄性蜂蛹和工蜂蛹的影響進行比較，發現不同性別蜂都出現了體重下降的現象，這表明蜂螨從工蜂和雄性蜂血淋巴上獲取的營養物質是相同的。同時也證明了，除在孵化時出現體重下降外，與未感染狄斯瓦螨的蜜蜂相比，蛹期感染狄斯瓦螨的存活時間較短。

通過熱量法、呼吸運動計量法和資源利用率，測定了蜂螨代謝所需的能量和營養。通過熱量生成速率計算得到蜂螨的能量代謝，對不同性別和不同發育周期的無蜂螨蜜蜂進行檢測，發現這在蜂群崩潰的眾多原因中顯得微不足道。蜂蛹的感染水平不同，蜂螨的代謝速率在1.1～2.4%之間。由于蜂螨的代謝機制較低，但對營養物質的要求又非常高，故在幼蟲階段可利用幼蟲組織中高達25%的營養物質。蜂螨的侵染將導致蜜蜂乃至整個蜂群的畸形和虛弱。

狄斯瓦螨作為細菌和真菌的載體，已被證明為感染潛伏病毒的載體和誘導物。被寄生蟲侵染、破壞的寄主組織和免疫系統，通過釋放被破壞組織的感染物和刺激病毒性傳染物的復制來誘導潛在病毒感染。通過提取蜂螨的個體和部分組織，我們可以觀察到直徑為27nm的病毒顆粒。凈化制備病毒制劑，同時準備一種抗血清物質來檢測單個蜂螨中的病毒。免疫組織學研究表明，胃盲囊被嚴重感染，而在像唾液腺、腦、直腸或生殖器官等其他組織中沒發現病毒的增殖。在電子顯微鏡下發現胃盲囊細胞中對位結晶格的大聚焦病毒顆粒。像小核糖核酸這樣的病毒顆粒主要存在于細胞質中，而大部分病毒顆粒稀疏的分布在液泡中。有時在細胞中的小泡膜或長管式膜結構中，可以觀察到病毒顆粒，這表明病毒是在蜂螨中進行復制的。

大量實驗證明，狄斯瓦螨是殘翅病毒（DWV）在蜜蜂中廣泛傳播的介質。除了可能存在的濃度效應外，在自然感染DWV蜂蛹中發現的成年雌蜂螨，其存在的病毒可能遠遠超過那些在他們寄主上發現的病毒。我們發現蜂螨的增長和單個蜜蜂形態畸形的發病率、死亡率之間存在一定的關系，蜂螨大量的傳播病毒顆粒，最終導致蜜蜂在出房之前就已經死亡。