血必凈注射液的抗炎作用機制研究進展

吳江瑩綜述，劉曉新審校（.天津市環湖醫院重癥科 300060；.天津中醫藥大學第一附屬醫院針灸科，天津 30093）

血必凈注射液由我國中西醫結合急救醫學奠基人王今達教授基于古方，根據菌、毒、炎并治理論研制，已用于臨床多年，其含有從多種中藥中提取的紅花黃色素A、川芎嗪、阿魏酸、丹參素、芍藥苷、原兒茶醛等有效成分，可治療由感染引發的多器官功能障礙綜合征（MODS）等多種急危重病，療效滿意。大量的臨床實踐表明該藥有抗炎、改善微循環等作用，近年來對其抗炎作用機制的研究已較為深入，現將其抗炎作用機制研究進展綜述如下。

1 血必凈注射液的抗炎有效成分研究

血必凈注射液是復方中藥制劑，由紅花、赤芍、川芎、丹參、當歸5味中藥組成，其主要有效成分包括紅花色素、酚酸、黃酮苷和苯乙基苷類等。冀蘭鑫等［1］基于該注射液復方組成的5味中藥的化學成分，最終確定了血必凈注射液中11種主要化學成分：尿苷、沒食子酸、鳥苷、丹參素鈉、芍藥苷、原兒茶醛、阿魏酸、丹酚酸B、紅花黃色素A、洋川芎內酯I和洋川芎內酯H，其中許多成分具有抗炎作用。研究顯示口服和腹膜腔內注射沒食子酸，可顯著阻止四氯化碳誘導的大鼠急性肝損害，推測沒食子酸抵抗四氯化碳誘導肝炎的作用機制可能是超氧化物歧化酶（SOD）類似活性和／或對細胞膜的保護作用［2］；丹參素亦具有很強的抗脂質過氧化及清除自由基的能力；芍藥苷可阻斷一氧化氮毒性損傷及細胞內鈣超載；原兒茶醛可抗炎、改善微循環等，作用的基礎機制可能和原兒茶醛對白細胞趨化游走和外周血單個核細胞產生白細胞介素（IL）－8的抑制作用相關［3］。阿魏酸也具有抗炎作用，其抗炎作用機理可能涉及對抗炎性介質等多個方面［4］。紅花黃色素同樣具有抑制血小板活化因子活性的抗炎作用。

2 血必凈注射液的抗炎作用機制

2.1 血必凈注射液對細胞釋放的炎性介質和細胞因子的作用機制研究 炎性反應中細菌、毒素將刺激機體單核／巨噬細胞等炎性細胞造成大量炎性介質“瀑布樣”釋放［5］。腫瘤壞死因子（TNF）－α是炎性的啟動因子，不但可以自身激活，還可以通過炎性反應因子級鏈反應激活、釋放更多炎性介質，形成“瀑布效應”，最終會導致 MODS的發生［6］。IL－6就是由 TNF－α誘導產生并參與機體炎性反應。明自強等［7］研究證明血必凈注射液可以抑制內源性炎性介質TNF－α、IL－6的失控釋放。中性粒細胞是主要的炎性細胞，林福清等［8］研究了血必凈注射液對全身炎性反應綜合征（SIRS）患者中性粒細胞功能的影響，發現治療7d后，外周血中性粒細胞的趨化、吞噬、氧化呼吸爆發功能及臨床表現等較對照組明顯改善，且MODS的發生率大大降低。說明血必凈注射液可改善中性粒細胞、單核－巨噬細胞等免疫細胞的功能，減少炎性介質的釋放，調節機體的免疫功能。李湘民［9］研究了血必凈注射液對重度急性有機磷農藥中毒患者SIRS的保護作用及其機制，以在正規治療的基礎上加用血必凈注射液，結果血必凈治療組患者白細胞計數、C反應蛋白、TNF－α、IL－6及IL－8明顯降低。張淑文等［10］觀察了血必凈注射液對膿毒癥時促炎／抗炎免疫功能的影響，測定血中IL－10和TNF－α水平并檢測全血細胞中輔助性T細胞1／2（Th1／Th2）比值，結果血必凈組Th1／Th2僅在72h才明顯升高，且血必凈組TNF－α和IL－10的水平明顯降低，表明其機制可能是血必凈注射液能提高機體特異性免疫功能，降低炎性反應，減少細胞因子及炎性介質釋放等。朱志強等［11］、王藹卿和曹書華［12］的研究也有類似結果。

進一步的研究觀察了血必凈注射液對TNF－α等炎性物質作用的分子機制。李銀平等［13］探討了血必凈注射液對膿毒癥大鼠蛋白C（PC）及TNF－α基因表達的影響，觀察到血必凈注射液可有效延緩肝組織PC mRNA表達下調時間及降低其下調幅度，減輕膿毒癥對組織PC mRNA表達的負向影響，提示血必凈注射液可以降低局部組織TNF－α基因表達，阻斷TNF－α介導的失控性炎性反應，其機制可能是通過促進肝組織PC的合成而影響TNF－α基因表達。

2.2 血必凈注射液的抗氧化作用機制研究 目前認為膿毒血癥、SIRS等炎性病癥是由于嚴重的氧化應激，導致氧化還原失衡，使大量的活性氧（ROS）包括氧自由基、脂性自由基產生，造成細胞主要分子的損害所致。抗氧化治療能提高重癥患者機體的抗氧化能力，減輕氧化損傷，可發揮抗炎作用。孫軍平等［14］在一項對內毒素致兔急性肺損傷（ALI）模型的研究中發現：內毒素致傷組的肺丙二醛（MDA）明顯高于對照組，而SOD明顯低于對照組。這表明在內毒素導致肺損傷時有大量的脂質過氧化物產生，同時機體清除氧自由基的能力明顯下降。血必凈注射液干預組肺中MDA明顯降低，SOD明顯升高，據此認為血必凈注射液起到了抗氧自由基的作用。何國鑫等［15］研究了血必凈注射液對ALI大鼠氧自由基變化的影響，結果顯示血必凈注射液干預可顯著降低ALI大鼠MDA濃度，顯著升高ALI大鼠降低的SOD濃度，減輕肺組織形態學損傷，認為血必凈注射液可抑制氧自由基產生，減少了機體細胞膜受氧自由基攻擊和破壞。楊春燕等［16］觀察了血必凈注射液對急性百草枯中毒大鼠MDA、SOD和谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）的影響也得出類似結果，血必凈注射液可以明顯降低急性百草枯中毒大鼠MDA的生成，并增加SOD、GSH－Px的活力，可使急性百草枯中毒大鼠引起的脂質過氧化損害得到改善，具有抗氧化治療的作用。馬俊清等［17］將肺泡Ⅱ型上皮細胞原代培養后，使用百草枯制成損傷模型，加入不同濃度血必凈溶液，觀察細胞培養上清液中SOD、MDA等含量及肺泡Ⅱ型上皮細胞成活率。結果顯示不同濃度的血必凈在各時間點上均具有不同程度SOD活性上升，MDA含量降低，細胞成活率增加，同樣證實了血必凈注射液對SOD、MDA的作用，因而具有較強的清除氧自由基、抗氧化能力。

2.3 血必凈注射液對NO的作用及機制研究 炎性反應過程中NO與體內的抗炎作用密切相關。NO可以抑制白細胞的黏附、細胞外摻和趨化性，調節多種與炎性反應有關的細胞因子、化學因子的產物和功能，因此NO調控著炎性的發生發展。謝穎光等［18］探討了血必凈注射液對于重癥監護室患者血管內皮細胞的保護作用及對血漿中NO水平的影響，患者分為2組，常規治療組患者給予常規西醫綜合治療，血必凈組在常規西醫治療的同時，在診斷明確后應用血必凈注射液。對所有患者在治療前后檢測血中循環內皮細胞數（CEC）和內皮素（ET）－1、NO水平。結果血必凈注射液治療組更能顯著降低患者血中CEC和ET－1、NO水平，表明血必凈注射液可以保護重癥患者的內皮細胞，降低循環中NO水平，改善重癥患者的病情。

其機制目前研究與NO的合成有關。NO的合成以左旋精氨酸和分子氧為底物由NO合成酶（NOS）催化啟動。NOS有誘導型NO合酶（iNOS）等3種同工酶，iNOS為炎性過程關鍵酶。當細胞受到細胞因子或免疫微生物刺激時，iNOS催化產生大量NO，引起炎性反應。朱海云等［19］觀察了血必凈注射液對膿毒癥大鼠iNOS表達的影響，觀察到血必凈治療組iNOS蛋白表達較對照組顯著降低，表明血必凈注射液能抑制膿毒癥大鼠iNOS的表達。趙光舉等［20］研究了血必凈注射液對創傷弧菌膿毒癥大鼠肺組織iNOS活性和NO含量的影響，結果血必凈組肺組織NO含量與同時間點模型組比較均明顯下調，表明血必凈注射液干預治療能顯著下調肺組織iNOS活性及NO生成，這和謝穎光等［18］、朱海云等［19］的研究結果一致。

2.4 其他抗炎作用機制研究 血必凈注射液還具有其他抗炎作用機制。茅堯生等［21］聯合應用血必凈、烏司他丁治療重癥膿毒癥患者，治療后，血必凈＋烏司他丁組、單一血必凈治療組、單一烏司他丁治療組和對照組脂多糖、IL－6、TNF－α、血清降鈣素原水平均下降，其中血必凈＋烏司他丁治療組在第4、8天下降幅度顯著大于單一血必凈治療組、單一烏司他丁治療組和對照組，認為作用機制可能除了與抑制促炎因子釋放外，還具有拮抗脂多糖、阻斷Toll樣受體和影響血清降鈣素原水平有關。呂杰等［22］觀察了盲腸結扎穿孔術制備的膿毒癥大鼠模型，在膿毒癥發生初期，內毒素及各種致炎因子引起組織血管內皮細胞的損傷，進一步可引起凝血及纖溶系統的紊亂，在膿毒癥早期使用血必凈注射液對大鼠纖溶系統的激活有一定的促進作用，這可能在一定程度上改善膿毒癥早期機體的高凝狀態，減少微血栓的形成，改善微循環，從而起到抗炎作用。

3 結 語

目前炎性反應發病機制不是完全清楚。在炎性反應發生和發展中，多個過程相互結合，多種物質相互作用。因此，單一作用的抗炎制劑往往難以取得令人滿意的療效，血必凈注射液是成分復雜的中藥制劑，其機制不能以拮抗單一致病因素的理論來解釋，而是同時具有多靶點作用，具有此類機制的藥物正是目前研究的熱點方向。

血必凈注射液抗炎機制研究目前雖較為深入，但仍然存在一些不足。例如，該領域的研究已發展到分子水平但具體途徑不明。血必凈注射液含有數百種化學成分，阿魏酸、丹參素、川芎嗪等成分均具有清除氧自由基的作用，上述成分或其他成分也可能通過其他途徑發揮類似的作用。因此，血必凈注射液抗炎作用，到底是通過哪些成分、哪些途徑發揮效應，彼此之間是否有協同作用或拮抗作用尚不清楚。再如抗炎構效關系研究欠缺，大規模臨床研究匱乏等。以上均需進一步深入研究與探討。

綜上所述，血必凈注射液具有較強抗炎作用，進一步整體闡明其作用深層機制，將更加深刻地揭示其本質，為開發新的適應證、指導臨床用藥提供依據，具有深遠現實意義。

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