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探討酶聯免疫吸附試驗(ELISA)診斷梅毒螺旋體(TP)感染中的臨床應用

2013-08-15 01:50:56王娟娟
大家健康(學術版) 2013年2期
關鍵詞:血清檢測方法

王娟娟 朱 坤

(1.山東省萊蕪中心血站 山東 萊蕪 271100;2.山東省萊蕪市衛生職工中等專業學校 山東 萊蕪 271100)

血清學檢測是診斷梅毒的常用實驗室檢測方法[1]。其特異性較差,常用于大樣本的初步篩選。本文采用ELISA方法對我院2010年1月至2012年9月就診的梅毒患者68例進行檢測,,探討其在TP感染診斷中臨床應用價值,現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料:我院2010年1月至2012年9月性病專科經過臨床診斷和血清學檢測診斷梅毒患者68例,其中Ⅰ期10例、Ⅱ期50例、Ⅲ期6例、潛伏期2例。同期內,我院接收自身免疫性疾病患者30例,均采用臨床診斷和自身血清抗體檢測,排除了梅毒陽性患者。

1.2 血清樣本采集:采集梅毒患者68例和自身免疫性疾病患者30例的靜脈血清樣本6ml,冷藏備用。

1.3 儀器與試劑:奧地利TECAN生產的全自動酶標儀、美國BIO-RAD洗板機、恒溫水浴箱、上海榮盛生物技術有限公司的TRUST試劑盒(批號20100907)、廣州中山生物公司的ELISA試劑盒(批號20100713)、日本富士會社TPPA試劑盒(批號20101006)。

1.4 檢測方法:采用TRUST和ELISA試劑分別檢測研究對象血清樣本,具體操作步驟嚴格按照試劑盒說明書要求進行檢測。

1.5 統計學處理:采用SPSS18.0統計軟件進行分析。

2 結果

血清TRUST、ELISA、TPPA檢測結果TRUST試驗檢測陽性50例、陰性48例,其中潛伏期2例、Ⅰ期梅毒2例、Ⅱ期梅毒4例,以及已經治愈的患者10檢測結果均是陰性。TRUST假陽性率、假陰性率分別為16.67%(5/30)、26.47%(18/68)。與TPPA檢測結果比較,TRUST假陽性率、假陰性率與TPPA有明顯差異(χ2=6.37,P<0.05)。TP-ELISA試驗檢測陽性68例、陰性30例,TP-ELISA的假陽性率、假陰性率均為0。TPELISA與TPPA檢測結果完全一致,無假陽性和假陰性結果。TP-ELISA方法檢測的假陽性率和假陰性率分別顯著性低于TRUST(χ2=7.19,P<0.05)。見表1、表2。

3 討論

梅毒是一種受到TP感染的傳播性疾病,在臨床備血、產前檢查時對血清中TP的檢測意義很大,提高TP正確診斷率是有效防止疾病傳播的主要手段之一。TPPA減少了TPHA出現的假陽性和假陰性現象,檢測結果更準確可靠,且特異性強,操作方便,但是價格較昂貴,不適合大樣本及療效觀察應用。

表1 TRUST、TP-ELISA方法與TPPA的一致性(例數)

表2 TRUST、TP-ELISA方法的假陽性率和假陰性率

Zrein等在1995年合成了TpN47和TpN15,將其用于梅毒檢測,發現ELISA方法的正確診斷率是99.8%,敏感性99.9%[2]。人體受到TP感染后4周~8周在血清中才能檢測到一定數量的抗體[3],特異性抗體較非特異性抗體早出現。本研究中發現,TRUST的假陽性率、假陰性率分別為16.67%(5/30)、26.47%(18/68)。表明 TRUST用于梅毒螺旋體感染的初步篩查也不適用。TP-ELISA方法采用酶聯免疫吸附技術檢測血清中存在的特異性抗體,可以作為梅毒螺旋體感染的單一篩選方法。本研究中發現,TP-ELISA試驗檢測陽性68例、陰性30例,TP-ELISA的假陽性率、假陰性率均為0。

有文獻報道[4],在孵育過程中適當振蕩可以消除溝狀效應。TP-ELISA方法利用了基因重組工程合成抗原,檢測血清中特異性抗體,特異性強、靈敏度高,與TPPA檢測結果保持一致。TP-ELISA方法檢測結果可靠,可以作為篩選和確認梅毒的首選方法,值得臨床推廣應用。

[1]馬聰,王芳,徐武夷.梅毒螺旋體實驗室檢測技術的研究進展[J].中華醫院感染學雜志,2002,12(12):958-950

[2]叢憲玲,姜日花 ,朱明姬,等.580例梅毒患者實驗室檢測結果分析[J].中國實驗診斷學,2003,7(3):264-265

[3]Castro R,Prieto ES,Santo I,et al.Evaluation of an enzyme immunoassay technique for detection of antibodies against Treponema pallidum[J].J ClinMicrobiol,2003,41(1):250-253

[4]楊建蘭,郎亦波.不同血清學診斷方法檢測梅毒螺旋體的結果分析[J].臨床研究雜志,2009,8(5):90-91

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