徐 荔 彭 霞 王 娟 卯明霞
(云南省西雙版納州食品藥品檢驗所,云南 景洪 666100))
傣藥黑面神為大戟科植物黑面神Breynia fruticosa(L.)Hook.f.的干燥根,《西雙版納傣藥志》(第一集)及文獻[1~2]記載為傣族地區傣族醫習用藥材,西雙版納傣醫將黑面神藥材稱為“哈帕彎藤”。黑面神性涼,味苦,入水、土、風塔。有調補水血,清火解熱,消腫止痛之功。用于產后腹痛,水血不足;月經不調,痛經,閉經;感冒發熱,咽喉腫痛,咳嗽,痄鰓;腹痛下利,痢疾;風濕痹痛,斑疹;跌打損傷,淤血腫痛。目前對其質量評價方法的研究未見文獻報道,為了有效控制其藥材質量,作者對3批不同產地藥材的性狀、成分系統預試驗、顯微鑒別、薄層色譜鑒別、水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物、急性毒性等方面對黑面神藥材進行了研究,為黑面神藥材的質量評價提供了科學依據。
1.1 材料:樣品采自景洪市嘎灑鎮(1號樣)、景洪市景訥鄉(2號樣)、勐臘縣勐臘鎮(3號樣),植物標本經中國科學院西雙版納熱帶植物園鑒定為大戟科植物黑面神Breynia fruticosa(L.)Hook.f.。硅膠 G(青島海洋化工廠),所用其它試劑均為分析純。
1.2 儀器 LEICA RM-2016生物組織切片機(上海徠卡儀器有限公司)、SA3300PL生物顯微鏡(北京泰克儀器有限公司)、計算機顯微分析系統(北京泰克儀器有限公司)。
2.1 性狀:本品為短柱狀,長0.5~3cm。表面灰褐色至淺紅棕色,具須根及須根痕,有的外皮脫落。質硬,斷面皮部薄,木部黃白色。殘留莖斷面可見同心環。髓部小,色稍深。氣微,味淡、微澀。
2.2 成分系統預試驗:試驗顯示含有還原糖、多糖類、酚類、鞣質、內酯類、香豆素、強心苷、有機酸、蒽醌類等成分。
2.3 顯微鑒別:橫切面:木栓細胞5~8列,外被落皮層,有時形成2個木栓層帶。皮層細胞形狀不規則,內側有乳汁細胞散在,內含顆粒狀物。韌皮部細胞較小,排列緊密。形成層環明顯。木質部寬廣,導管多為單個徑向排列,射線多為3~5列細胞,薄壁細胞中含有淀粉粒及少量草酸鈣簇晶(見圖1)。
粉末:粉末棕色。木栓細胞類方形、長方形、多角形,壁略厚,有的細胞內含黃棕色物質。具緣紋孔導管碎片直徑20~40μm。韌皮纖維長條形、長梭形,壁厚,孔溝明顯,胞腔內含黃棕色物質;木纖維多成束,細長、破碎,壁略增厚,可見壁孔。木薄壁細胞類方形、菱形,壁呈連珠狀增厚,壁孔明顯。乳汁細胞不規則條狀、片塊狀,內含黃棕色顆粒狀物。淀粉粒多復粒,由2~4分粒組成,少單粒,類圓形、橢圓形,臍點點狀、短縫狀,層紋不明顯,直徑5~10μm。草酸鈣簇晶多見,直徑10~20μm??梢婞S棕色色素塊(見圖2)。

圖2 黑面神藥材粉末顯微圖
2.4 薄層色譜鑒別:取本品粉末1g,加乙醇15ml,超聲處理20分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇1ml使溶解,作為供試品溶液。另取黑面神對照藥材1g,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》一部附錄)試驗,吸取上述兩種溶液各3μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以三氯甲烷-丙酮-甲酸(6∶6∶1)為展開劑,預平衡15分鐘,展開,取出,晾干,噴以5%香草醛硫酸溶液。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點(見圖3)。

圖3 黑面神藥材薄層色譜圖(T:29℃ ,RH:35%)
2.5 水分:取1、2、3號樣粉末約2g,精密稱定,照水分測定法(《中國藥典》2010年版一部附錄第一法)測定,結果分別為.48%、9.84%、10.20%,平均值為.84%。
2.6 總灰分:取、2、3 號樣粉末約g,精密稱定,照(《中國藥典》2010年版一部附錄),結果分別為2.52%、2.37%、2.57%,平均值為.49%。
2.7 酸不溶性灰分:取總灰分結果按(《中國藥典》2010年版一部附錄),結果分別為.32%、0.27%、0.33%,平均值為.31%。
2.8 重金屬:取1、2、3 號樣粉末約2g,精密稱定,照(《中國藥典》2010年版一部附錄),結果均未超過百萬分之一。
2.9 浸出物:取1、2、3號樣粉末約4g,精密稱定,照水溶性浸出物測定法項下的熱浸法(《中國藥典》2010年版一部附錄)測定,結果分別為.58%、12.88%、12.54%,平均值為.67%。
2.10 急性毒性試驗:對黑面神藥材的水煎濃縮液(13.34g生藥/ml)進行了小鼠急性毒性試驗。取18~22gSPF級ICR小鼠,雌雄各半,每組10只,共6組,以5.34g生藥/ml為最大給藥濃度,其余按1∶0.70等比稀釋,各組按40ml/kg灌胃給藥1次,觀察14天。根據小鼠中毒和死亡表現,按改進Bliss法程序計算,小鼠灌胃給予黑面神的LD50為123.87g生藥/kg,95%可信區間為.41 ~147.75g生藥/kg。中毒表現主要為活動減少、呼吸急促及死亡,死亡時間集中在給藥后48小時至72小時內。死亡動物和觀察結束后處死的小鼠,肉眼觀察除肺部瘀血外,心、肝、脾、腎等各主要臟器色澤、形狀、大小等未見異常。
3.1 水分、總灰分、酸不溶性灰分和浸出物是評價藥材質量的重要參數,因此制定相應的限度是十分必要的。根據試驗結果,規定其水分不得過12.0%,總灰分不得過3.5%,酸不溶性灰分不得過1.0%,浸出物不得少于8.0%。重金屬結果均未超過百萬分之十,暫不在質量標準中設置此項目。
3.2 試驗分別以水、乙醇、稀乙醇為溶劑,采用冷浸法及熱浸法測定本品浸出物的含量。結果表明,水浸出量高于乙醇和稀乙醇的浸出量,熱浸法浸出量高于冷浸法浸出量。因此,確定以水為溶劑,熱浸法測定本品浸出物的含量。
3.3 在急性毒性試驗中測出LD50為123.87g生藥/kg,顯示黑面神藥材在處方用藥范圍內仍是安全的。
3.4 上述研究項目內容全面,方法簡便快速,能有效控制傣藥材黑面神的質量。
[1]林艷芳,依專,趙應紅.中國傣醫藥彩色圖譜[M].昆明:云南民族出版社,2003.643~646
[2]國家中醫藥管理局《中華本草》編委會.中華本草(傣藥卷)[M].上海:上??萍汲霭嫔?,2005.244 ~245