羅 琴,陳丹美,林惠昆
(1.楚雄師范學院化學與生命科學系,云南 楚雄 675000;2.福建長樂市溪湄小學,福建 長樂 350206;3.德宏師范高等專科學校理工系,云南 德宏 678400)
紅茶加工過程中,兒茶素類等多酚類物質在內源酶的催化作用下發生反應,形成茶黃素和茶紅素,統稱為紅茶色素[1—2]。茶黃素類是一類具有苯駢卓酚酮結構的混合物,在紅茶中含量一般為0.3%—1.5%。茶紅素在紅茶中的含量在9%—19%,其結構、組成及性質都不甚清晰[3—6]。
紅茶色素是一種天然食用色素,具有降血脂、抗動脈粥樣硬化、抗血脂過氧化、清除氧自由基、增強免疫功能、改善微循環、減肥及抗腫瘤的藥理作用[7]。目前對紅茶色素的提取方法、提取工藝及性質的研究已有報到,但得出結論各異[8—10]。而提取溶劑及pH對紅茶色素吸收光譜的影響未見報到。
經我們研究發現,提取溶劑種類及提取體系的pH等因素對紅茶色素有影響。本文對云南滇紅茶提取溶劑及pH對紅茶色素的影響進行研究。旨在為紅茶色素的提取及紅茶色素的開發利用提供依據,同時也為進一步研究云南滇紅茶色素提供參考。
1.1 原料及試劑
材料:滇紅茶 (云南滇紅股份有限公司鳳慶茶廠)。
試劑:95%乙醇、60%乙醇、99%乙酸、1%乙酸、乙酸乙脂、乙醚、石油醚、鹽酸、氫氧化鈉,均為分析純;純水。
1.2 儀器設備
島津UV-2401紫外分光光度計 (日本島津公司);PHS-3CW型數字精密酸度計 (上海鵬順科技儀器有限公司);分析天平 (TG328B上海五七三廠)。
1.3 紅茶色素提取工藝[8]
稱取紅茶 (滇紅)→溶劑浸泡→過濾→含紅茶色素濾液→得到待測溶液→調節濃度→調節pH→待測溶液[9]。
1.4 色素溶液制備及測試[10—11]
將紅茶磨碎,準確稱取8份紅茶,每份1g,然后分別用20mL的提取溶劑 (純水、95%乙醇、60%乙醇、99%乙酸、1%乙酸、乙酸乙脂、乙醚和石油醚)室溫浸泡1小時,過濾后得到含紅茶色素的溶液。用移液管取1mL濾液,用25mL容量瓶定容,搖勻,用1cm石英比色皿,在UV-2401紫外分光光度計上,以提取溶劑為參比,于200—600nm波長范圍內掃描。
用移液管取1mL濾液,用25mL容量瓶定容,搖勻,然后移取定容溶液并用稀鹽酸和稀氫氧化鈉溶液調節酸度,并用PHS-3CW型數字精密酸度計測酸度,分別配成pH=2至pH=11共10份溶液。用1cm石英比色皿,在UV-2401紫外分光光度計上,以提取溶劑為參比,于200—600nm波長范圍內掃描。
2.1 不同溶劑對紅茶色素的提取效果
按上述方法分別用不同溶劑提取紅茶色素,過濾后觀察溶液顏色如表1所示。

表1 不同提取溶劑提取的溶液顏色
表1表明,用純水、95%乙醇、60%乙醇、99%乙酸、1%乙酸五種溶劑所提取的溶液是橙黃色,用乙酸乙脂、乙醚和石油醚所提取的溶液是綠色。根據茶紅素、茶黃素是水溶性色素,而茶綠素、葉綠素等是脂溶性色素[5],結合實驗可知,在純水、95%乙醇、60%乙醇、99%乙酸、1%乙酸五種溶劑中溶出的色素絕大部分是茶紅素與茶黃素;在乙酸乙脂、乙醚和石油醚中溶出的色素絕大部分是茶綠素和葉綠素。

圖1 不同提取溶劑制備紅茶色素溶液的吸收光譜圖
2.2 不同提取溶劑制備紅茶色素溶液的吸收光譜
六種有機溶劑的極性由強到弱的順序是:純水>乙醇>乙酸>乙酸乙脂>乙醚>石油醚。以不同溶劑提取紅茶色素,按1.4所述方法,用島津UV-2401紫外分光光度計測定吸收光譜如下圖1所示。
由吸收光譜圖可知,在相同的條件下,不同溶劑的紅茶色素溶液均在270nm處有最大的吸收峰。而且,隨著溶劑極性不同,最大吸收峰的吸光度呈現一定規律性變化,如表2。

表2 不同溶劑條件紅茶色素溶劑的最大吸收峰值 (A)

圖2 不同pH值條件下紅茶色素溶液的吸收光譜圖
從圖1及表2分析,270nm處有最大的吸收峰主要是茶紅素、茶黃素芳環結構在紫外區產生的吸收峰。而隨著溶劑極性減小,270nm吸收峰吸光度減小,近一步表明紅茶中的茶色素主要是茶紅素和茶黃素。提取溶劑的極性強弱對茶紅素和茶黃素的溶出有很大影響,提取溶劑極性增強對茶紅素和茶黃素的溶出有促進作用,而提取溶劑極性減弱對茶紅素和茶黃素的溶出有抑制作用,水做溶劑主要提取的是茶紅素和茶黃素。
2.3 不同pH對紅茶色素吸收光譜影響
按上述方法,用純水做溶劑,調節不同酸堿度,提取紅茶色素,用島津UV-2401紫外分光光度計測定相應吸收光譜,其光譜如圖2。
由圖2得,純水作提取溶劑時,不同pH值條件下紅茶色素在270nm最大吸收峰處的光度值如表3。

表3 不同pH值條件下紅茶色素溶液的最大吸光度 (A)
綜合圖2分析,隨著pH值由強酸性變化到強堿性,茶色素的紫外-可見吸收光譜基本無變化。表明茶紅素和茶黃素對酸堿穩定,與花色苷不同,其結構受酸堿影響較小。
由表3得出,以水做溶劑提取茶色素,pH值對提取率的影響并不顯著。
3.1 云南滇紅茶中的茶色素主要由茶紅素和茶黃素兩種水溶性色素構成。提取溶劑的極性強弱對茶紅素和茶黃素的溶出有很大影響,提取溶劑極性增強對茶紅素和茶黃素的溶出有促進作用,而提取溶劑極性減弱對茶紅素和茶黃素的溶出有抑制作用,以水做溶劑主要提取的主要是茶紅素和茶黃素。
3.2 以水做溶劑提取茶色素,pH值對提取率的影響并不顯著。茶紅素和茶黃素對酸堿穩定,與花色苷不同,其結構受酸堿影響較小,有較寬的pH穩定范圍。并且,由于茶色素來源的安全性,在食品色素中有較好的應用前景。
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