氣相色譜－質(zhì)譜法測(cè)定硫酸亞鐵緩釋片中鄰苯二甲酸二辛酯含量

黃朝輝，桑旭峰

(浙江省寧波市藥品檢驗(yàn)所，浙江 寧波 315048)

塑化劑是一種人工合成的化學(xué)物質(zhì)，主要用于工業(yè)生產(chǎn)，添加在塑膠中可增加柔軟度、延展性。塑化劑的分子結(jié)構(gòu)類似激素，被稱為“環(huán)境荷爾蒙”，若長(zhǎng)期食用可能引起生殖系統(tǒng)異常，甚至造成畸胎、癌癥的危險(xiǎn)[1－2]。2011年4月，臺(tái)灣衛(wèi)生部門例行抽驗(yàn)食品時(shí)，在一款“凈元益生菌”粉末中發(fā)現(xiàn)含有鄰苯二甲酸二辛酯(DOP)，濃度高達(dá)600×10－6。塑化劑的陰影不僅僅存在于食品、保健品之中，在藥品中亦可能普遍存在。為使藥物成分能均勻地混懸在兌水稀釋后的藥液中，不影響藥效，就需要使用藥用輔料如塑化劑等。此外，在使用腸包衣的片劑類、乳劑類和緩釋類藥品中，塑化劑的使用也相對(duì)廣泛。而藥用輔料，如用塑料做的包裝材料和藥瓶中，也有塑化劑。我國(guó)2010年頒布的新版《中華人民共和國(guó)藥典》，只收載了鄰苯二甲酸二乙酯(DEP)[3]。2011年6月，經(jīng)中國(guó)食品藥品檢定研究院檢驗(yàn)，在葛蘭素史克公司生產(chǎn)的阿莫西林克拉維酸鉀干混懸劑中檢出鄰苯二甲酸二異癸酯(DIDP)。檢測(cè)DOP的方法有氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用(GC－MS)法[4]、液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用(LC－MS)法[5－6]等。本研究中建立了檢測(cè)硫酸亞鐵緩釋片中DOP含量的GC－MS法。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Agilent 7890－5975C型氣相色譜－四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用儀 (美國(guó)Agilent公司);SB－5200DTN型超聲波清洗器(寧波新芝生物科技股份有限公司);R 200 D型電子分析天平(德國(guó)賽多利斯公司);CH80－2型臺(tái)式低速離心機(jī)(上海優(yōu)浦科學(xué)儀器有限公司)。甲醇(HPLC級(jí)，默克公司);DOP對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定研究院，藥品中塑化劑監(jiān)測(cè)用對(duì)照物質(zhì));硫酸亞鐵緩釋片(批號(hào)分別為 20101101，20110101，20100604，吉林精優(yōu)長(zhǎng)白山藥業(yè)有限公司);硫酸亞鐵片(批號(hào)分別為101118，110210，廣西梧州三箭制藥有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜－質(zhì)譜條件

采用Agilent7890－5975C型氣相色譜－四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用儀，HP－5MS型色譜柱(30m ×0.25mm，0.25μm)，流速 1.0mL/min，不分流。程序升溫:起始溫度為60℃，保持1min，20℃ /min升溫至220℃，保持1min，再5℃ /min升溫至300℃，保持7min。接口溫度280℃;離子源溫度230℃，電離方式EI+;四級(jí)桿溫度150℃，掃描質(zhì)量范圍:45～500 amu。在上述條件下，DOP的色譜峰見圖1。

圖1 DOP氣相色譜圖

2.2 溶液制備

精密稱取DOP對(duì)照品19.75mg，置50mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密移取1.0mL，置50 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液，用甲醇稀釋制成約1.58μg/mL的溶液作為對(duì)照品溶液。取供試品約1 g，研細(xì)，精密稱定，置20mL錐形瓶中，精密加入甲醇 5mL，超聲 30min，離心 5min(3 000 r/min)，吸取上清液，作為供試品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察:精密吸取對(duì)照品儲(chǔ)備液 1，2，4，6，8，10mL，分別置10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，制成質(zhì)量濃度為0.79～7.9μg/mL 的系列對(duì)照品溶液。取 1μL，注入氣相色譜儀，按上述色譜條件，以各對(duì)照品總離子流峰面積對(duì)進(jìn)樣量進(jìn)行回歸，計(jì)算回歸方程為 Y=3×106X+99 132(r=0.998 1)。結(jié)果表明，DOP 進(jìn)樣量線性范圍是 0.79 ～7.9 ng。

定量限及檢測(cè)限測(cè)定:用甲醇將質(zhì)量濃度為0.79μg/mL的對(duì)照品溶液逐步稀釋，依法測(cè)定。DOP的 S/N=3時(shí)的檢出限為0.018 ng，S/N=10 時(shí)的定量限為 0.082 ng。

精密度試驗(yàn):精密吸取對(duì)照品溶液(質(zhì)量濃度為1.58μg/mL)1μL，按2.1項(xiàng)色譜質(zhì)譜條件，連續(xù)進(jìn)樣5次，測(cè)定DOP色譜峰峰面積。結(jié)果的 RSD為1.8%(n=5)。

穩(wěn)定性試驗(yàn):精密量取對(duì)照品溶液(質(zhì)量濃度為1.58μg/mL)1 μL，分別于制備后 0，2，4，6，8，12 h 進(jìn)樣，測(cè)定 DOP 的色譜峰峰面積。結(jié)果的 RSD為1.9%(n=6)，表明溶液在室溫放置12 h內(nèi)基本穩(wěn)定。

加樣回收試驗(yàn):取樣品6份，每份約1 g，精密稱定，分別置20mL錐形瓶中，再分別精密加入DOP對(duì)照品儲(chǔ)備液(質(zhì)量濃度為7.9μg/mL)適量，照2.2項(xiàng)下方法制得供試品溶液，分別精密吸取1μL，注入氣相色譜儀，測(cè)定色譜峰峰面積，計(jì)算DOP的平均回收率為 95.0%，RSD 為 2.3%(n=6)。

2.4 樣品含量測(cè)定

取硫酸亞鐵緩釋片，研細(xì)，取細(xì)粉約1 g(共5批)，精密稱定，置20mL錐形瓶中，按2.2項(xiàng)下方法制得供試品溶液。分別精密吸取供試品溶液、對(duì)照品溶液各1μL，注入液相色譜儀，測(cè)定DOP的總離子流峰面積，按外標(biāo)法計(jì)算樣品中DOP濃度，進(jìn)一步換算為固體樣品中DOP的含量(μg/g)。結(jié)果見表1。

表1 樣品含量測(cè)定結(jié)果(μg/g，n=3)

3 討論

由于塑化劑廣泛存在于塑料制品中，因此配制樣品時(shí)不能使用塑料制品，而是全部采用玻璃容器。美國(guó)食品與藥物管理局認(rèn)為，DOP可耐受的日攝入量為600μg/kg。試驗(yàn)結(jié)果表明，5批硫酸亞鐵緩釋片中DOP的含量均很小，按照藥品說(shuō)明書的要求使用，攝入的DOP量對(duì)人體幾乎無(wú)害。

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