雞甲胺磷中毒性遲發性神經病電生理測定及藥物干預研究

胡軼虹 譚興文 張征驕 江新梅

雞甲胺磷中毒性遲發性神經病電生理測定及藥物干預研究

胡軼虹 譚興文 張征驕 江新梅

目的 ①建立雞甲胺磷中毒遲發性神經病模型。②通過周圍神經電生理檢測確定周圍神經損傷情況并評價三磷酸胞苷二鈉(CTP)對周圍神經的保護作用。方法 萊亨母雞隨機分為2組，甲胺磷經消化道染毒，從染毒后第2天開始A、B組分別每天給鹽水和CTP1周，染毒后1、2、3、4、8周取雞坐骨神經進行電生理檢測。結果 甲胺磷致遲發性神經病早期以軸索損害為主，繼之出現脫髓鞘改變，但各組間比較差異無統計學意義。結論 ①利用甲胺磷染毒萊亨雞可成功構建遲發性神經病模型。②電生理檢測陽性率高，且早于臨床體征的出現，是診斷遲發性神經病的客觀指標之一。③本病有自愈傾向，遠期預后較好。

甲胺磷；遲發性神經病；三磷酸胞苷二鈉；周圍神經電生理

近年來，隨著有機磷農藥中毒搶救成功率的提高，遲發性神經病的發病率也呈上升趨勢，發生率5%左右[1]，因此對其發病進行正確的評估及積極地預防治療是我們的重要任務。本實驗應用甲胺磷染毒leghorn雞，并在患雞出現肌無力等臨床表現前進行神經電生理檢測，評估CTP對OPIDN(遲發性神經病)的預防及保護作用。

1 資料與方法

1.1 構建動物模型及實驗分組 選取營養狀態良好的萊亨母雞(購自長春市生物制品所免疫室)50只，雞齡8～14個月，體質量2 kg左右，單只飼養，用植物油溶解甲胺磷(購自湖北沙隆達股份有限公司)，濃度為5 mg/ml，雞斷食24 h后，依照2 ml/kg灌入甲胺磷，分別于染毒前20 min、染毒后3、6、10 h肌肉注射阿托品(購自河北省鄭州獸藥廠)保持度過急性期。A組為鹽水組，染毒后連續一周肌注生理鹽水(1 ml/kg)。B組為CTP(購自北京三九萬東藥業有限責任公司)組(濃度3 mg/ml)，染毒后連續一周肌注1 ml/kg。

1.2 標本的留取及電生理檢測 染毒后1、2、3、4、8周隨機留取標本。雞固定在特制木板上，室溫25℃，腹腔注射水合氯醛麻醉，下肢去皮，從髂關節至膝關節，沿坐骨神經走行剝離肌肉，游離坐骨神經，取坐骨神經長約3 cm浸于臺式液中，除去周圍脂肪組織，其后應用生物信號記錄儀(澳大利亞艾德公司生產，吉林大學生理實驗室提供)行電生理檢查。潛伏期為刺激偽跡前沿到動作電位起始處時間間隔；波幅為上相波頂點與下相波的最低點之間的距離；運動神經傳導速度為兩記錄電極間距離除以兩動作電位潛伏期差。

2 結果

2.1 臨床表現 甲胺磷染毒后5～10 min，雞出現萎靡、流涎、瞳孔縮小、喜臥的臨床表現，在第2～6天陸續出現死亡，共死亡6只，兩組間比較無差異，實驗組平均死亡率為12%。經過1周后，雞開始出現全身無力，喜臥，后出現行走不穩，重者出現站立困難，沒有完全癱瘓者，至第4周肌力幾乎恢復正常，兩組總體發病率(15.9%)，組間比較差異無統計學意義。

2.2 波幅檢測結果 第1周，波幅呈明顯降低，其后2，3周波幅逐漸恢復，至第4周波幅已近恢復正常。兩實驗組比較差異無顯著性。詳見表1。

2.3 運動神經傳導速度檢測結果 第2周開始出現運動神經傳導速度減慢，第3、4周持續出現運動神經傳導速度減慢，至第8周運動神經傳導速度已基本恢復正常。各個實驗組比較差異無統計學意義。詳見表2。

表1 各實驗組波幅變化

注：組內比較1、2、3與4、8周間差異有統計學意義(P<0.05)，組間比較差異無統計學意義(P>0.05)

表2 各實驗組運動神經傳導速度變化

注：組內比較1、8周與2、3、4周間差異有統計學意義(P<0.05)，組間比較差異無統計學意義(P>0.05)

3 討論

甲胺磷是一種高毒、低殘留、廣譜應用的有機磷殺蟲劑[2]。消化道，呼吸道和皮膚接觸均可導致急性中毒，但消化道途徑中毒后，發生遲發性神經病的可能性最大。不同種屬的動物對有機磷的敏感性也不盡相同，人和雞相對敏感。[3]。我們應用甲胺磷染毒萊亨母雞，發現在染毒后1～2周先后出現了波幅及運動神經傳導速度改變(陽性率90%)，2周出現不同程度的肌無力表現(總發病率15.9%)，成功的構建了遲發性神經病的動物模型。

本研究發現染毒后1周出現波幅明顯降低，說明早期神經損傷表現為軸索變性，2周開始出現運動神經傳導速度減慢，提示出現脫髓鞘改變，這與神經病理檢查結果相吻合。同時發現波幅降低(染毒后1周)明顯早于肌無力(染毒后2周)的出現，電生理檢查的陽性率(90%)也明顯高于臨床表現的陽性率(15.9%)，而肌無力癥狀的恢復(4周)明顯早于波幅及神經傳導速度的恢復(8周)。因此，我們認為有機磷農藥中毒的患者，即使成功渡過急性期，仍需定期隨訪，及時發現遲發性周圍神經損害。神經電生理檢查不但能夠發現早期周圍神經損害，對神經修復的預后判定也是一重要指標。

目前有機磷中毒性遲發性神經病尚無特異的治療方法。虞炳慶等應用激素治療25例OPIDN患者，發現其能顯著提高遲發性神經病1年內痊愈顯效率[4]，但有4例出現柯興氏征，因此開發和應用新藥取替它是我們緊迫的任務。CTP為核苷酸類藥物，在機體內參與磷脂類及核酸的合成和代謝。具有營養神經，提高神經細胞抗損傷能力，增強神經細胞活性，促進神經突起生長的作用。王敏等[5]對22例有機磷中毒后遲發性神經病患者進行為期10～14 d的CTP治療，發現總有效率達77%。本實驗中應用CTP進行早期干預治療，但各時間點電生理檢測組間比較差異無統計學意義，說明該藥并不能阻止遲發性神經病的發生，至第8周，電生理檢測結果已近恢復正常，提示本病有自愈傾向。為了在OPIDN治療上有所突破，還應進行發病機制方面的相關研究。

[1] 王漢斌，阮金秀.急性有機磷農藥中毒致臟器損害與并發癥的防治.中華急診醫學雜志，2001，10：285-287.

[2] 范永仙, 陳小龍, 姜曉平,等.甲胺磷農藥的生物降解研究進展. 微生物學雜志，2002，22: 45-47.

[3] 郭斌，郭麗華，郭洪志，等.有機磷中毒引起的遲發性神經病的臨床與電生理研究.中風與神經疾病雜志，1997，14：186-187.

[4] 虞炳慶，劉保群，芮曉東，等.糖皮質激素治療有機磷農藥中毒后遲發神經病的療效觀察.臨床神經病學雜志，1995，11：46-47.

[5] 王敏，李華，王桂華，等.三磷酸胞苷二鈉在有機磷中毒后遲發性神經病中的應用.中國現代藥物應用，2007,1:19-20.

130021吉林省人民醫院神經內科(胡軼虹 譚興文 張征驕);吉林大學第一醫院神經內科(江新梅)

江新梅