秋楓化學成分的研究

楊大松，楊永平，楊永紅，李曉莉*

1中國科學院昆明植物研究所資源植物與生物技術所級重點實驗室;2中國科學院青藏高原研究所昆明部;3云南農業大學植物保護學院，昆明 650201

秋楓(Bischofia javanica)又名重陽木、紅桐、秋風子，屬大戟科(Euphorbiaceae)秋楓屬(Bischofia)的常綠或半常綠大喬木，常生于海拔800 m以下山地潮濕溝谷林中或平原栽培的行道樹［1］。該植物作為拉祜族民間常用藥已有200多年藥用歷史，該藥性涼，味微辛，澀，能行氣活血，消腫解毒，可用于治療風濕骨痛、食道及胃包塊、傳染性肝炎、小兒疳積、肺炎、癰疽、瘡瘍、毒蛇咬傷等［2］。迄今為止，國內外對該種化學成分研究較少，分離得到的化合物主要為三萜［3］、黃酮苷［4］、鞣質［5］。為了進一步揭示其藥效的物質基礎，為民族藥用植物資源的合理開發利用奠定基礎，本文進一步對秋楓根中的化學成分進行了研究，從90%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位中分離鑒定了11個化合物，并對它們的提取分離和結構鑒定進行了報道。

1 儀器與材料

Finnigan MAT 90型質譜儀，Bruker AM-400型和DRX-500型核磁共振儀，以TMS為內標測定;Agilent 1200型高效液相色譜儀(DAD檢測器)，硅膠G(200～300目)及薄層色譜硅膠板GF254均為青島海洋化工廠生產，Sephadex LH-20為Amersham Biosciences公司產品，RP-18為Merck公司產品，MCI為三菱公司產品;TLC檢測采用熒光或者15%硫酸乙醇溶液處理后加熱顯色。

秋楓于2010年采自云南省西雙版納自治州，由中國科學院昆明植物研究所楊永平研究員鑒定為秋楓Bischofia javanica，標本保存于中國科學院昆明植物研究所標本館。

圖1 化合物1～11的化學結構Fig.1 The chemical structures of compounds 1-11

2 提取與分離

秋楓的干燥根8.5 kg，粉碎后用90%乙醇浸泡提取3次，每次7 d，濾過，合并提取液，減壓回收乙醇得粗浸膏983 g，加適量水混懸后，用乙酸乙酯萃取三次，得乙酸乙酯浸膏48 g，浸膏用乙醇溶解經MCI脫色處理后用硅膠柱色譜進行粗分，以氯仿/丙酮(100/0至50/50)梯度洗脫，合并相同流分，得8部分(F1～F8)。F2經RP-18、硅膠柱層析、氯仿-乙酸乙酯(9∶1)薄層制備得化合物11(6 mg);F5經硅膠、凝膠柱層析反復分離純化得化合物1(13 mg);F6用氯仿-甲醇(9∶1)硅膠、凝膠柱層析純化后經35%甲醇-水HPLC分離得化合物5(14 mg)、6(20 mg)和7(7 mg);F7 經氯仿-甲醇(5∶1)硅膠柱層析分為兩部分，第一部分用凝膠純化后經22%甲醇-水HPLC分離得化合物2(12 mg)、3(8 mg)和4(5 mg)，第二部分經氯仿-甲醇(4∶1)硅膠、凝膠反復分離純化得化合物10(8 mg);F8經氯仿-甲醇(3∶1)硅膠、凝膠柱層析反復分離純化得到化合物8(3 mg)和9(10 mg)。

3 結構鑒定

化合物1 淡黃色油狀液體，1H NMR(400 MHz，CD3COCD3)δ:6.70(1H，d，J=7.9 Hz，H-5)，6.69(1H，s，H-2)，6.53(1H，d，J=7.9 Hz，H-6)，3.64(2H，t，J=6.4 Hz，H-8)，2.63(2H，t，J=6.4 Hz，H-7);13C NMR(100 MHz，CD3COCD3)δ:145.6(s，C-3)，144.1(s，C-4)，131.8(s，C-1)，120.9(d，C-6)，116.8(d，C-5)，115.8(d，C-2)，64.2(t，C-8)，39.7(t，C-7)。以上波譜數據與文獻［6］中報道的3，4-二羥基苯乙醇基本一致。

化合物2 淡黃色油狀液體，1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ:6.99(1H，s，H-2)，6.71(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，6.66(1H，d，J=8.0 Hz，H-6)，4.75(1H，d，J=7.0 Hz，H-1')，3.80(2H，t，J=7.0 Hz，H-8)，2.71(2H，t，J=7.0 Hz，H-7);13C NMR(100 MHz，CD3OD)δ:146.7(s，C-3)，146.6(s，C-4)，132.1(s，C-1)，125.2(d，C-6)，119.5(d，C-5)，116.9(d，C-2)，104.4(d，C-1')，78.3(d，C-5')，77.6(d，C-3')，74.9(d，C-2')，71.4(d，C-4')，64.3(t，C-8)，62.5(t，C-6')，39.5(t，C-7)。以上波譜數據與文獻［7］中報道的2-(3，4-dihydroxy)-phenylethyl-O-β-D-glucopyranoside 基本一致。

化合物3 白色粉末，1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ:6.80(1H，d，J=2.5 Hz，H-3)，6.69(1H，d，J=8.6 Hz，H-6)，6.58(1H，dd，J=2.5，8.6 Hz，H-5)，4.74(1H，d，J=7.2 Hz，H-1')，3.90(1H，dd，J=1.7，11.9 Hz，H-6'α)，3.82(3H，s，OCH3)，3.68(1H，dd，J=5.5，11.9 Hz，H-6'β);13C NMR(100 MHz，CD3OD)δ:152.8(s，C-4)，149.2(s，C-2)，142.9(s，C-1)，116.0(d，C-6)，110.0(d，C-5)，103.8(d，C-3)，103.7(d，C-1')，78.2(d，C-3')，78.1(d，C-5')，75.0(d，C-2')，71.6(d，C-4')，62.6(t，C-6')，56.3(q，OCH3)。以上波譜數據與文獻［8］中報道的tachioside基本一致。

化合物4 白色粉末，1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ:7.01(1H，d，J=8.7 Hz，H-6)，6.46(1H，d，J=2.6 Hz，H-3)，6.29(1H，dd，J=2.6，8.7 Hz，H-5)，4.70(1H，d，J=7.4 Hz，H-1')，3.85(1H，dd，J=1.8，13.8 Hz，H-6'α)，3.80(3H，s，OCH3)，3.68(1H，dd，J=5.2，13.8 Hz，H-6'β);13C NMR(100 MHz，CD3OD)δ:154.9(s，C-4)，152.0(s，C-2)，141.0(s，C-1)，120.5(d，C-6)，107.6(d，C-5)，104.3(d，C-1')，101.8(d，C-3)，78.1(d，C-3')，77.8(d，C-5')，75.0(d，C-2')，71.4(d，C-4')，62.5(t，C-6')，56.5(q，OCH3)。以上波譜數據與文獻［9］中報道的isotachioside基本一致。

化合物5 白色粉末，1H NMR(400 MHz，CD3COCD3)δ:6.89(1H，d，J=1.7 Hz，H-2')，6.79(1H，d，J=8.1 Hz，H-5')，6.76(1H，dd，J=1.7，8.1 Hz，H-6')，6.03(1H，d，J=2.2 Hz，H-8)，5.88(1H，d，J=2.2 Hz，H-6)，4.58(1H，d，J=7.6 Hz，H-2)，4.03(1H，m，H-3)，2.91(1H，dd，J=5.5，16.1 Hz，H-4α)，2.54(1H，dd，J=8.4，16.1 Hz，H-4β);13C NMR(100 MHz，CD3COCD3)δ:157.6(s，C-7)，157.1(s，C-5)，156.8(s，C-9)，145.6(s，C-3')，145.5(s，C-4')，132.1(s，C-1')，120.1(d，C-5')，115.7(d，C-6')，115.2(d，C-2')，100.6(s，C-10)，96.1(d，C-6)，95.4(d，C-8)，82.6(d，C-2)，68.3(d，C-3)，28.7(t，C-4)。以上波譜數據與文獻［10］中報道的兒茶素基本一致。

化合物6 白色粉末，1H NMR(400 MHz，CD3COCD3)δ:7.04(1H，d，J=1.8 Hz，H-2')，6.82(1H，dd，J=1.8，8.1 Hz，H-6')，6.77(1H，d，J=8.1 Hz，H-5')，6.01(1H，d，J=2.3 Hz，H-8)，5.91(1H，d，J=2.3 Hz，H-6)，4.86(1H，s，H-2)，4.19(1H，m，H-3)，2.85(1H，dd，J=4.6，16.6 Hz，H-4α)，2.73(1H，dd，J=3.1，16.6 Hz，H-4β);13C NMR(100 MHz，CD3COCD3)δ:157.5(s，C-7)，157.4(s，C-5)，157.1(s，C-9)，145.4(s，C-4')，145.2(s，C-3')，132.2(s，C-1')，119.3(d，C-5')，115.4(d，C-6')，115.2(d，C-2')，100.0(s，C-10)，96.1(d，C-6)，95.6(d，C-8)，79.3(d，C-2)，66.9(d，C-3)，28.9(t，C-4)。以上波譜數據與文獻［10］中報道的表兒茶素基本一致。

化合物7 白色粉末，1H NMR(400 MHz，CD3COCD3)δ:6.44(2H，s，H-2'，6')，6.01(1H，d，J=2.2 Hz，H-8)，5.87(1H，d，J=2.2 Hz，H-6)，4.50(1H，d，J=7.4 Hz，H-2)，3.95(1H，m，H-3)，2.86(1H，dd，J=5.3，16.1 Hz，H-4α)，2.51(1H，dd，J=8.1，16.1 Hz，H-4β);13C NMR(100 MHz，CD3COCD3)δ:157.6(s，C-7)，157.1(s，C-5)，156.8(s，C-9)，146.2(s，C-3'，5')，133.2(s，C-4')，131.5(s，C-1')，107.1(d，C-2'，6')，100.5(s，C-10)，96.0(d，C-6)，95.4(d，C-8)，82.7(d，C-2)，68.2(d，C-3)，28.4(t，C-4)。以上波譜數據與文獻［10］中報道的沒食子兒茶素基本一致。

化合物8 無色粉末，1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ:7.09(2H，s，H-2″，6″)，6.94(1H，d，J=8.7 Hz，H-6)，6.43(1H，d，J=2.7 Hz，H-3)，6.17(1H，dd，J=2.7，8.7 Hz，H-5)，4.67(1H，d，J=7.2 Hz，H-1')，4.54(1H，dd，J=1.9，11.8 Hz，H-6'α)，4.42(1H，dd，J=6.4，11.8 Hz，H-6'β)，3.78(3H，s，OCH3);13C NMR(125 MHz，CD3OD)δ:168.3(s，C-7″)，154.9(s，C-4)，152.1(s，C-2)，146.6(s，C-3″，5″)，141.1(s，C-1)，139.4(s，C-4″)，121.6(s，C-1″)，120.7(d，C-6)，110.4(d，C-2″，6″)，107.9(d，C-5)，104.6(d，C-1')，102.0(d，C-3)，77.8(d，C-3')，75.7(d，C-5')，75.1(d，C-2')，71.8(d，C-4')，64.8(t，C-6')，56.7(q，OCH3)。以上波譜數據與文獻［11］中報道的4-羥基-2-甲氧基苯酚 1-O-β-D-(6'-O-沒食子酰基)葡萄糖苷基本一致。

化合物9 無色粉末，1H NMR(400 MHz，CD3COCD3)δ:7.32(2H，s，H-2″，6″)，6.98(1H，d，J=8.7 Hz，H-5)，6.47(1H，d，J=2.7 Hz，H-2)，6.16(1H，dd，J=2.7，8.7 Hz，H-6)，4.73(1H，d，J=7.6 Hz，H-1')，4.71(1H，dd，J=2.0，11.7 Hz，H-6'α)，4.37(1H，dd，J=7.2，11.7 Hz，H-6'β)，3.85(6H，s，3″，5″-OCH3)，3.75(3H，s，3-OCH3);13C NMR(100 MHz，CD3COCD3)δ:166.5(s，C-7″)，154.6(s，C-4)，151.9(s，C-3)，148.3(s，C-3″，5″)，141.7(s，C-4″)，140.8(s，C-1)，121.2(s，C-1″)，120.3(d，C-2)，108.0(d，C-2″，6″)，106.9(d，C-6)，104.0(d，C-1')，101.7(d，C-5)，77.7(d，C-3')，75.2(d，C-5')，74.8(d，C-2')，71.5(d，C-4')，65.0(t，C-6')，56.7(q，3″，5″-OCH3)，56.2(q，3-OCH3)。以上波譜數據與文獻［12］中報道的 4-hydroxy-3-methoxyphenol-β-D-［6-O-(4-hydroxy-3，5-dimethoxylbenzoate)］glucopyranoside基本一致。

化合物10 淡黃色粉末，ESI-MS m/z:473［M+Na］+，923 ［2M+Na］+.1H NMR(400 MHz，CD3OD)δ:6.98(2H，d，J=8.2 Hz，H-2'，6')，6.57，6.55(1H，each，d，J=8.2 Hz，H-3'，5')，6.04(1H，s，H-7)，5.93(1H，s，H-5)，4.85，4.75(1H，each，d，J=7.3 Hz，H-1″)，3.08(2H，s，H-α);13C NMR(100 MHz，CD3OD)δ:196.9(s，C-3)，174.6(s，C-4)，171.7(s，C-6)，158.4，158.3(s，C-8)，157.2(s，C-4')，132.5(d，C-2'，6')，125.5(s，C-1')，115.8，115.7(d，C-3'，5')，107.7，107.6(s，C-2)，103.5，103.4(s，C-9)，101.7，101.6(d，C-1″)，97.6，97.3(d，C-7)，93.3，93.2(d，C-5)，78.4，78.3(d，C-5″)，77.4，77.3(d，C-3″)，74.0，73.9(d，C-2″)，71.1(d，C-4″)，62.3(t，C-6″)，42，1，42.0(t，C-α)。以上波譜數據與文獻［13］中報道的maesopsin-6-O-glucopyranoside基本一致。此化合物為噢哢類化合物，因為2位半縮酮結構的存在，導致其在非對映異構體間可逆轉換，因此此化合物最典型的特征就是13C NMR上的信號呈非常靠近的雙峰(峰高1:1)，氫譜部分信號也有此特征，這在天然產物中比較少見。

化合物11 無色粉末，ESI-MS m/z:491［M+Na］+.1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ:5.27(1H，t，J=8.3 Hz，H-12)，4.49(1H，t，J=8.2 Hz，H-3)，2.05(3H，s，CH3CO)，1.12(3H，s，H-27)，0.93(6H，s，H-25，26)，0.92(6H，s，H-29，30)，0.86(6H，s，H-23，24)，0.84(3H，s，H-28);13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ:171.1(s，C-32)，143.6(s，C-13)，122.5(d，C-12)，80.9(d，C-3)，55.2(d，C-5)，47.5(d，C-9)，46.5(t，C-19)，41.5(s，C-14)，40.9(d，C-18)，39.2(s，C-8)，37.8(s，C-4)，37.7(t，C-1)，37.0(t，C-22)，36.9(s，C-10)，33.7(t，C-21)，33.0(q，C-29)，32.5(t，C-7)，32.4(s，C-17)，30.6(s，C-20)，28.5(q，C-28)，27.9(q，C-23)，27.6(t，C-2)，25.9(q，C-27)，23.5(q，C-30)，23.4(t，C-15)，23.3(t，C-16)，23.0(t，C-11)，21.3(q，C-31)，18.1(t，C-6)，17.1(q，C-24)，16.6(q，C-26)，15.3(q，C-25)。以上波譜數據與文獻［14］中報道的β-香樹脂醇乙酸酯基本一致。

致謝:感謝中國科學院昆明植物研究所植物化學與西部植物資源持續利用國家重點實驗室分析測試中心測試所有圖譜。

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