漿液性卵巢癌組織中CD44和CD24的表達*

白 晶, 李愛軍#, 王麗萍，張 斌, 張 毅

1)鄭州大學第一附屬醫院婦產科 鄭州 450052 2)鄭州大學第一附屬醫院腫瘤科 鄭州 450052 3)美國德克薩斯州大學圣安東尼奧醫學中心醫學系 圣安東尼奧 77027703 4)鄭州大學第一附屬醫院生物細胞治療中心 鄭州 450052

卵巢癌是女性三大惡性腫瘤之一。目前有研究[1]表明細胞黏附分子與腫瘤的發生相關。CD44是一種糖蛋白，是細胞黏附分子的成員之一，主要位于細胞表面，它在免疫識別、細胞運動、細胞間黏附、細胞與基質間相互作用及淋巴細胞歸巢中均起促進作用，是接受細胞外基質糖基化、透明質酸化信息的受體。CD24是一種低相對分子質量高度糖基化的黏附分子， 介導癌細胞與活化血小板和內皮細胞的結合，可能促進腫瘤細胞的增殖、侵襲和轉移，參與腫瘤的發生發展[2-3]。該實驗采用免疫組化方法，觀察CD44和CD24在漿液性卵巢癌組織中的表達情況，并分析二者與卵巢癌各臨床參數間的關系，為卵巢癌的診斷和治療提供理論依據。

1 材料與方法

1.1標本來源30例漿液性卵巢癌標本取自鄭州大學第一附屬醫院婦產科2008年1月至2012年1月手術切除的卵巢癌組織，患者年齡25～73(49.7±13.8)歲；10例正常卵巢組織標本取自同期在鄭州大學第一附屬醫院婦產科行子宮肌瘤手術切除的卵巢組織，術后病理示卵巢組織無病變，患者年齡48～65(52.3±6.8)歲。按照國際婦產科聯盟(FIGO)的病理分期標準[4]將卵巢癌分為4期，其中Ⅰ期6例，Ⅱ期9例，Ⅲ期8例，Ⅳ期7例；組織學分級[5]G1期(高分化)15例，G2期(中分化)9例，G3期(低分化)6例；無淋巴結轉移者19例，有淋巴結轉移者11例；腫瘤直徑≥5 cm者6例，<5 cm者24例；患者年齡>49歲者17例，≤49歲者13例。所有標本經體積分數10%中性甲醛溶液固定，常規石蠟包埋，6 μm厚切片備用。

1.2 2種卵巢組織中CD44和CD24的檢測采用北京中杉金橋生物技術有限公司SP-9000免疫組化染色試劑盒和DAB顯色試劑盒進行染色。兔抗人CD44單克隆抗體(ZA-0573，1200稀釋)、鼠抗人CD24單克隆抗體(ZA-0274，1200稀釋)均購自北京中杉金橋生物技術有限公司。石蠟標本常規脫蠟至水后沖洗，抗原修復,去離子水消除內源性過氧化物酶活性，正常山羊血清封閉非特異性結合位點，滴加一抗和二抗,DAB顯色，蘇木素復染，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹脂封片[6]。用PBS代替一抗作為陰性對照，用已知陽性染色的乳癌組織標本作為陽性對照。

1.3結果判斷以胞膜呈棕黃色或棕褐色顆粒為陽性，每張切片觀察10個400倍視野，綜合染色強度和陽性細胞所占比例進行判定。染色強度評分標準：不著色0 分，黃色1分，棕黃色2 分，黃褐色3 分。陽性細胞所占比例評分標準[7]：陽性細胞率<5%者0分，5%～者1分，25%～者2分，50%者3分，75%～ 者4分。2種評分相乘，0分為陰性，1～12分為陽性。

1.4統計學處理采用SPSS 17.0進行統計學處理,漿液性卵巢癌和正常卵巢組織中CD44及CD24陽性表達率的比較、漿液性卵巢癌組織中CD44、CD24與不同病理特征的關系均采用Fisher確切概率法，漿液性卵巢癌組織中CD44和CD24的關聯性分析采用Pearson列聯系數，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1不同卵巢組織中CD44、CD24的表達正常卵巢組織中CD44呈陰性表達；漿液性卵巢癌組織中CD44表達于癌細胞的細胞膜及部分細胞質中，呈彌漫棕黃色顆粒。正常卵巢組織中CD24呈陰性表達；與CD44表達部位不同，CD24表達于漿液性卵巢癌組織的細胞膜頂端邊緣部位，呈棕黃色顆粒。見圖1和表1。

2.2漿液性卵巢癌組織中CD44及CD24的表達與臨床病理特征的關系結果見表2。

2.3漿液性卵巢癌組織中CD44和CD24表達間的關系結果見表3。

圖1 各種卵巢組織中CD44、CD24的表達情況(SP,×400)

表1 正常卵巢和漿液性卵巢癌組織中CD44和CD24的表達 例(%)

表2 漿液性卵巢癌組織中CD44及CD24的表達與臨床病理特征的關系 例(%)

表3 漿液性卵巢癌組織中 CD44和CD24表達間的關系 例

rP=0.397,P=0.018。

3 討論

腫瘤的侵襲、轉移是一個具有高度組織性和器官選擇性的多因素、多步驟的過程。雖然已知很多因素參與腫瘤的侵襲和轉移，但不同組織來源的腫瘤細胞侵襲發生的機制還不清楚。卵巢癌是婦科常見的三大惡性腫瘤之一，在各年齡段均可發病，由于卵巢組織成分非常復雜，是全身原發腫瘤類型最多的器官，不同組織學類型的卵巢腫瘤，其生物學行為存在很大的差異。上皮性卵巢腫瘤是最常見的卵巢腫瘤，其中漿液性卵巢癌占上皮性卵巢癌的75%,患者經手術、化療后，70%的患者經過幾個月或幾年又復發[8-9]，5 a生存率僅30.6%[10]。 正是由于卵巢癌不易發現、即使臨床發現后生存率低且易復發的特點，近年來對卵巢癌發病機制的研究越來越多，研究人員試圖通過各種途徑找到卵巢癌浸潤和轉移的機制，以阻斷卵巢癌的進一步發展，但至今為止其機制仍不十分清楚。

該實驗選擇10例正常卵巢組織及30例漿液性卵巢癌組織，從黏附分子的角度分析CD44和CD24的表達與臨床特征的關系，發現CD44和CD24在漿液性卵巢癌組織中的陽性表達率均高于正常卵巢組織，推測黏附分子CD44和CD24的表達可能參與腫瘤的發生。漿液性卵巢癌組織中兩者的表達與淋巴結轉移、FIGO分期和組織學分級有關，而與年齡、腫瘤直徑無關。病理分期增高，兩者的表達均增加，說明隨病理分期增高，腫瘤細胞與基質的黏附性增強，更容易向組織深層浸潤。組織學分級越高，腫瘤的分化越差，黏附分子CD44與CD24的陽性表達率越高，說明腫瘤細胞分化程度越低，越具有原始細胞的一些特性，越具有侵襲和轉移的能力。此外，該研究中CD44 和CD24 在漿液性卵巢癌組織中的表達呈正關聯。這提示兩者可能在卵巢癌的發生發展及侵襲中起共同的作用，但作用的機制有待于進一步研究。

該研究結果表明，CD44和CD24在漿液性卵巢癌組織中的表達可能促進了卵巢癌的發生和發展，共同檢測CD44和CD24的表達可以為臨床診斷卵巢癌、確定其惡性程度提供依據。關于兩者共同作用的機制有待于進一步研究。

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