原發(fā)性肝癌中PTEN、Kiss-1和c-myc的表達(dá)及意義

黃文峰 張小玲 謝志軍 舒 濤 (贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，江西 贛州 341000)

研究顯示腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中出現(xiàn)明顯的基因和蛋白異常表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)了與腫瘤進(jìn)展有關(guān)的相關(guān)蛋白及通路〔1〕。PTEN、Kiss-1和c-myc在腫瘤中表達(dá)改變，對腫瘤的進(jìn)展可能有促進(jìn)作用。本文關(guān)注原發(fā)性肝癌中PTEN、Kiss-1和c-myc的表達(dá)特點(diǎn)，相關(guān)性及對預(yù)后的判斷價值。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 2007年1～12月行原發(fā)性肝癌手術(shù)的患者87例作為觀察組，均符合WHO關(guān)于原發(fā)性肝癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)。男性47例，女性40例，年齡47～79〔平均(61.3±7.7)〕歲。手術(shù)前均未進(jìn)行放、化療。同時選取距腫瘤邊緣大于5 cm的切端正常肝組織60例作為對照組，其中男女各30例，年齡47～76〔平均(59.9±9.7)〕歲。兩組在常規(guī)資料的比較中，差別無統(tǒng)計學(xué)意義。

1.2 免疫組化檢測 PTEN、Kiss-1和 c-myc蛋白的表達(dá)PTEN、Kiss-1和c-myc蛋白的濃縮液均購自武漢博士德生物技術(shù)有限公司，按不同比例進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇最佳配比濃度進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)。采用免疫組織化學(xué)技術(shù)SP法檢測組織中PTEN、Kiss-1和c-myc蛋白的表達(dá)，嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)步驟，均由同一技師操作，減少誤差，嚴(yán)格質(zhì)控。

1.3 PTEN、Kiss-1和c-myc蛋白檢測結(jié)果的判定方法 陽性結(jié)果以細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞膜中出現(xiàn)均勻棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞，每張切片選擇10個400倍的高倍視野，取其平均值作為樣本最終的陽性表達(dá)率，以陽性細(xì)胞≥25%定為陽性，以陽性細(xì)胞＜25%定為陰性。計算組間陽性率的差別。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SAS6.12統(tǒng)計軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、相關(guān)分析和生存分析。

2 結(jié)果

2.1 觀察組與對照組中PTEN、Kiss-1和c-myc蛋白表達(dá)陽性率的比較 PTEN和Kiss-1在觀察組中表達(dá)的陽性率明顯低于對照組(P＜0.05)，c-myc在觀察組中表達(dá)的陽性率明顯高于對照組(P＜0.05)，見表1。

2.2 觀察組中不同臨床特征患者PTEN、Kiss-1和c-myc蛋白表達(dá)陽性率的比較 觀察組中PTEN、Kiss-1和c-myc的表達(dá)與腫瘤直徑、分化程度、轉(zhuǎn)移、脈管浸潤密切相關(guān)。見表2。

表1 觀察組與對照組中PTEN、Kiss-1和c-myc蛋白表達(dá)陽性率的比較〔n(%)〕

表2 觀察組中不同臨床特征患者PTEN、Kiss-1和c-myc蛋白表達(dá)陽性率的比較〔n(%)〕

2.3 觀察組中PTEN、Kiss-1和c-myc表達(dá)的相關(guān)性分析PTEN和Kiss-1的表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.42，P=0.022 3)，PTEN和 c-myc(r=-0.45，P=0.032 8)、Kiss-1 和 c-myc(r=-0.40，P=0.040 9)的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。

2.4 觀察組PTEN、Kiss-1和c-myc表達(dá)的生存分析 原發(fā)性肝癌中PTEN、Kiss-1和c-myc的表達(dá)均與預(yù)后相關(guān)(P＜0.05)，即PTEN、Kiss-1低表達(dá)、c-myc高表達(dá)患者的預(yù)后差。

3 討論

原發(fā)性肝癌在病變的進(jìn)展中，多種癌基因和抑癌基因均起作用。PTEN是由多功能磷酸酶編碼的腫瘤抑制基因，不僅具有磷酸酯酶的活性，還具有多種腫瘤生物學(xué)的作用特征〔2〕，其基因定位在染色體的10q23.3，由9個外顯子和8個內(nèi)含子組成，全長為200 kb，其編碼的蛋白質(zhì)具有403個氨基酸，分子量為560 kD在人體內(nèi)多種細(xì)胞和組織中均可有不同程度的表達(dá)。相關(guān)研究認(rèn)為PTEN通過其脂質(zhì)磷酸酶活性調(diào)節(jié)局灶聚集黏附激酶和SHC磷酸化對細(xì)胞與細(xì)胞間的黏附作用、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的降解作用進(jìn)行有效的調(diào)節(jié)，從而多方面調(diào)節(jié)腫瘤的生物學(xué)功能〔3〕。也有觀點(diǎn)認(rèn)為PTEN可以有效地抑制腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移、活化、聚集和黏附作用，可能與整合素的信號途徑有關(guān)〔4〕。Kiss-1也被認(rèn)為是抑癌基因和轉(zhuǎn)移抑制基因，可以通過抑制血管形成、抑制細(xì)胞外基質(zhì)的降解及促進(jìn)凋亡發(fā)揮生物學(xué)功能〔5〕。c-myc是Myc基因家族的重要成員，屬于核蛋白類，是決定細(xì)胞從G0/G1期進(jìn)入S期的開關(guān)，在細(xì)胞由正常轉(zhuǎn)向腫瘤性生長過程中起到了至關(guān)重要的促進(jìn)作用〔6〕。c-myc對腫瘤的作用可能與KAI1基因有通路作用有關(guān)。基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究認(rèn)為cmyc可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的定向運(yùn)動，引起腫瘤細(xì)胞通過細(xì)胞外基質(zhì)向遠(yuǎn)處播散，出現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶。c-myc可以對有絲分裂原的刺激產(chǎn)生反應(yīng)，表現(xiàn)為促進(jìn)腫瘤細(xì)胞分化的作用，且受許多分化誘導(dǎo)劑的影響〔7〕。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示原發(fā)性肝癌中PTEN、Kiss-1和c-myc異常表達(dá)，對病變的進(jìn)展有明顯促進(jìn)作用，提示三種蛋白可以調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞間的物質(zhì)代謝，進(jìn)而使細(xì)胞間、基質(zhì)間信息傳遞出現(xiàn)失控性增生和分化成熟障礙，引起腫瘤進(jìn)展。PTEN基因在調(diào)節(jié)中可能與增殖有關(guān)，即PTEN在正常上皮中高表達(dá)，對腫瘤性的增殖有明顯的抑制作用，一旦PTEN失活，將無限制地引起以Ki67陽性細(xì)胞為主細(xì)胞的增殖功能，此時腫瘤細(xì)胞失控性增生、分化障礙，進(jìn)而癌變、浸潤和轉(zhuǎn)移。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示PTEN、Kiss-1和c-myc可能在癌基因的促進(jìn)和抑制角度具有通路作用，其調(diào)節(jié)的作用可能是多元性的，共同促進(jìn)腫瘤的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移。相關(guān)研究也顯示PTEN和Kiss-1可以抑制腫瘤的血管生成〔8〕，而c-myc可以通過VEGF的作用促進(jìn)血管生成，因此，三者的作用可能通過VEGF為中介蛋白發(fā)揮協(xié)同作用，但是具體機(jī)制尚有待研究。

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