飲水氟暴露對成年男性血清睪酮及雄激素結合蛋白的影響*

崔蕊蕊，丁 中，崔留欣，楊如璞，席 豫，程學敏，任麗君，段麗菊，后加祥，巴 月#

1)鄭州大學公共衛生學院環境衛生學教研室 鄭州 450001 2)開封市疾病預防控制中心地方病科 開封 475000 3)通許縣疾病預防控制中心地方病科 通許 475400

高氟可影響精子數量和質量，破壞睪丸、附睪、前列腺的結構，進而影響雄性生殖能力[1-4]。研究[5-6]發現，氟能通過影響動物血清下丘腦-垂體-性腺軸多種激素水平，表現一定的生殖損傷和內分泌干擾作用。雄激素結合蛋白(androgen binding protein，ABP)作為睪丸支持細胞分泌的一種重要蛋白質，具有精細調節生精過程的功能[7]，可促進精子的生成和成熟。由于其功能上的重要性，ABP常作為睪丸支持細胞功能狀況的標志物之一[8]。已有動物實驗[9]證實氟可損害大鼠睪丸支持細胞。但由支持細胞分泌的ABP是否受到影響，目前少有報道。該研究通過測定不同氟暴露水平人群血清ABP和睪酮(testosterone,T)水平，探討氟暴露對成年男性 ABP的影響，為研究機體ABP在性激素調控中的作用提供依據。

1 材料與方法

1.1調查點的選擇在河南省開封市某縣選擇7個村莊為調查區，其中地方性氟病村2個﹑實施降氟改水工程村2個﹑對照村3個；所有調查地區經濟水平、自然條件、農作物種類、生活習慣、人口構成基本相同，且均無工業氟污染。

1.2調查對象的選擇整群抽取所選調查點18～50歲本地出生男性，排除有職業氟接觸、長期在外打工、患有消耗性疾病、長期或近期服用鈣制劑者，納入對象對照組175人、改水組75人、高氟組65人。

1.3標本采集在各個村莊采取水樣：對照區采自來水(對照組)16份，高氟區采深井水(高氟組)13份，改水區采自來水(改水組)8份；征得調查對象同意并簽署知情同意書后，采集晨尿及空腹靜脈血用于標志物測定。尿液-20 ℃保存待測，血液當天分離血清后-80 ℃低溫保存。

1.4標志物測定水氟測定步驟嚴格按照標準方法(離子選擇電極法，WS/T106-1999)，采用標準加入法測定。每個樣品平行測定2次，相對誤差均小于2%，變異系數為0.4%～2.9%。尿氟測定步驟嚴格按照標準方法(離子選擇電極法，WS/T89-1996)，采用標準曲線法測定。血清ABP測定采用ELISA法，試劑盒由美國R&D公司提供，全自動酶標儀由美國伯樂公司提供。血清T測定采用化學發光免疫分析法，化學發光儀及測定試劑盒均由鄭州安圖公司提供。測定設置平行樣，取均值，并按10%～15%的比例抽樣復檢。

1.5統計學處理采用SPSS 12.0分析數據。3組間水氟、尿氟及血清ABP、T水平比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗，血清T、ABP與年齡及尿氟水平的關系采用多重線性回歸方法進行分析。檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 3組生活飲用水中氟水平比較結果見表1。由表1可知，3個調查點水氟水平比較差異有統計學意義，且高氟組飲用水氟水平分別高于改水組和對照組。

表1 3組生活飲用水中氟水平比較 mg/L

F=12.289，P<0.001；*：與高氟組比較，P均<0.05。

2.2 3組尿氟、血清ABP及T水平比較結果見表2。由表2可知，3組尿氟水平比較差異有統計學意義，且兩兩比較差異均有統計學意義。3組血清ABP水平比較差異有統計學意義，且高氟組低于對照組和改水組。3組血清T水平比較，差異無統計學意義。

表2 3組尿氟、血清ABP及T水平比較

*:3組間兩兩比較，P均<0.05；#：與高氟組比較，P均<0.05。

2.3血清T、ABP與年齡及尿氟水平的關系結果見表3。由表3可知，在對照組和改水組中T與年齡呈負相關。

表3 血清T、ABP與年齡及尿氟水平的關系

3 討論

3.1氟暴露對男性血清ABP水平的影響ABP可以緩沖管內雄激素波動，使雄激素恒定釋放，減少波動，利于精子生成；其次，ABP與T結合后可隨睪丸液到達附睪，促進精子的成熟，ABP的缺乏不但影響精子的數量和質量，而且ABP正常合成與維持體內內分泌的平衡和生殖功能密切相關[10-12]。由于其功能上的重要性，ABP常作為睪丸支持細胞功能狀況的標志物之一。研究結果顯示：高氟組ABP水平低于對照組和改水組，提示長期飲水氟暴露可能導致ABP水平降低。ABP作為一種分泌性蛋白質，其合成之后要進入內質網腔內進行多肽鏈的折疊及修飾，然后轉運到細胞外發揮作用。氟含量增高可損傷內質網而引起氧化應激[13-14]，影響ABP的折疊和修飾過程，可能是ABP水平降低的重要原因。多個研究[15-16]發現，重金屬等可對ABP表達產生影響。該研究結果提示高氟可影響ABP水平。盡管改水組血清ABP水平也低于對照組，但差異無統計學意義，提示這種影響是可逆的，當脫離了氟暴露環境，其損傷可能修復，且這種修復需要一定時間。

3.2氟暴露對男性血清T水平的影響間質細胞分泌的T具有廣泛的生理作用，例如：促進和維持精子發生成熟,刺激附屬性器官發育，促進雄性副性征的出現并維持其正常狀態。還有研究[17]發現，血清T可以作為判斷嚴重創傷、顱腦損傷情況和預后的指標之一,T升高可使重構性心臟病理反應惡化。T水平主要受下丘腦和垂體分泌的促黃體生成素(LH)和促卵泡成熟激素調控。研究[18]發現, 高氟可使血清T水平降低、LH水平上升, 且與氟含量呈劑量-反應關系。陳培忠等[19]發現, 當給予大鼠氟化鈉28 d后血漿T水平降低。該研究結果顯示3組血清T水平比較差異無統計學意義，究其原因，可能是上述研究大多是動物實驗或所調查地區水氟水平遠遠高于該次調查區域水氟水平，在水氟水平較高情況下，可能造成睪丸器質性病變，從而產生T隨著尿氟水平的增加而降低的現象[7]。該次調查區域水氟水平可能還未使所調查人群血清T含量產生顯著的變化；其次人體血清T含量受下丘腦-垂體-性腺軸系統的調節，多個正、負反饋通路可能對T的合成和分泌產生綜合影響。在對照組和改水組中血清T與年齡呈負相關，符合人體正常生理情況[20-21]；但高氟組沒有發現這種相關關系，提示氟暴露對男性血清T產生一定影響。

綜上所述，環境氟暴露可能影響男性ABP水平。高氟組人群血清ABP水平明顯低于對照組和改水組，提示氟可能通過影響ABP水平表現其生殖內分泌干擾作用。

致謝 感謝參與現場調查工作的鄭州大學李仕群、李萍、唐春宇以及開封市疾病預防控制中心和通許縣疾病預防控制中心地方病科的工作人員；感謝所有參與該項研究的調查對象。

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