士的寧透皮劑對家兔實驗性面癱的電生理學研究

李建偉，蘭 天，閆 青，吳 倩，張文杰＊

（吉林大學 基礎醫學院1.生物化學及分子生物學實驗中心；2.生理學系；3.遺傳學系，吉林 長春130021）

面癱是由各種原因導致的面神經受損而引起的病癥，表現在面部運動功能障礙，口角流涎、口眼歪斜等癥狀。面癱的真正原因尚不完全清楚，多數患者在受到涼風吹襲后突然發病，出現臨床癥狀。多數學者認為炎癥、病毒感染或過敏等導致血運供給紊亂產生面神經水腫而發生面部癱瘓。常規治療方法大多使用類固醇激素，改變細胞生物膜的磷脂成分或膜的穩定性起到抗過敏、抗炎、抗水腫作用，使面神經水腫消退，恢復面神經功能［1］。本實驗通過建立面神經麻痹模型，然后給予不同濃度的士的寧透皮膏劑，觀察其對面神經誘發電位（Antidromic Nerve Evoked Potentials，AEP）和肌電圖（electromyography，EMG）的作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物分組及實驗藥品 實驗動物及分組：家兔60只（2.0－2.5kg），由吉林大學實驗動物中心提供。隨機分為6組，每組10只。對照組、模型組、模型＋0.25%士的寧、模型＋0.5%士的寧、模型＋1%士的寧、陽性對照藥物組（模型＋地塞米松組）。模型建立后，每組每只動物每日給予維生素B110 mg、維生素B1250mg。實驗藥品：士的寧膏劑由吉林省天風制藥有限責任公司提供。

1.2 家兔面神經麻痹動物模型的制作 按文獻［2，3］方法。3%戊巴比妥鈉（1ml／kg）靜脈注射麻醉，分離左側面神經，在距莖乳孔0.5cm處（定位）用小號持針器鉗夾面神經總干，滿扣（壓力約5kg，時間為5s，損傷面寬約1.5mm），結束后分層縫合肌肉、皮膚，飼養。

面神經麻痹動物實驗模型制備后，給予適量青霉素，縫合切口給予消毒處理，在其靠近中樞端，皮膚外部外敷士的寧濃度為50mg、100mg和200mg（含0.25%、0.5%和1%士的寧成份）膏劑，每天2次，在30℃的室溫下復蘇，連續給藥7天后進行各項指標的測定。地塞米松組每日給予1mg／只，肌肉注射。

1.3 實驗儀器設備 電子刺激器（型號SEN－3201，日本光電公司），信號經平均疊加儀（DAT－100 NIHON KOHDEN，日本），示波器（VC－10，日本，濾波10K，時間常數0.5）。

1.4 家兔面神經逆行動作電位（AEP）和神經肌電圖（EMG）的測定 刺激電極放置于面神經遠端，經刺激隔離器給予15－50V，時程為100－200ms，頻率1Hz的刺激脈沖。記錄電極置于靠近面神經出莖突處，用銀絲電極記錄面神經的動作電位，信號經前置放大器放大（5000倍，濾波lK，時間常數0.25）后，用平均疊加儀疊加（疊加64次）信號顯示在示波器，記錄并計算動作電位的幅值及時程。

同心圓記錄電極放置于口輪匝肌處，接地電極置于耳緣部位，信號經平均疊加儀（DAT－100NIHON KOHDEN，日本）、示波器（VC－10，日本，濾波10K，時間常數0.5），幅值標尺為2mV／cm，時間標尺為2 ms／cm疊加16次信號顯示在示波器，用數碼照相機記錄原始數據，記錄神經肌電圖誘發電位［2，4］。

1.5 統計學方法 數值采用均數±標準差，組間比較用t檢驗。

2 結果

2.1 家兔面神經麻痹模型的建立 根據文獻［5］通過眨眼反射、觸須運動對面神經麻痹評分，誘發眨眼反射的刺激是用5ml注射器18號針頭距離兔眼3 cm瞬間吹風2ml，比較雙側眨眼反射的頻度、速度和幅度，評分標準：0分為雙側正常且對稱；1分為比健側減弱或延緩；2分為消失。觸須運動的觀察是通過比較雙側觸須細微顫搐、節律性拂動的程度進行評分：0分為雙側拂動正常且對稱；1分為比健側減弱；2分為消失。將兩項指標的評分相加進行面神經麻痹的評價：0、1分為無面神經麻痹；2、3分為不完全面神經麻痹；4分為完全性面神經麻痹。

結果表明：對照組與假手術組未出現面神經麻痹現象，模型組左側面神經壓榨后，與右側面相比較，7天后10只家兔均出現2分以上面神經麻痹狀態，表現為左側眨眼反射、觸須活動減弱或消失。同時，對家兔面神經干動作電位和口輪匝肌肌電圖記錄的結果表明，與假手術組相比較，模型組損傷面神經干動作電位的幅值從197.00±17.67降低到60.50±16.06明顯減小。肌電圖幅值從373.10±44.19μV降低到150.10±43.21μV，潛伏期從1.79±0.28ms延長到3.60±0.70ms（P＜0.001，n＝10）。上述結果表明，家兔面神經麻痹模型成立［5］。

2.2 士的寧對家兔面神經麻痹模型AEP和EMG的作用 實驗結果提示，外敷一定濃度士的寧，可使面神經誘發電位（AEP）、肌電圖（EMG）幅值增加，肌電圖（EMG）潛伏期縮短，呈現劑量依賴性，其作用和地塞米松相似。表明士的寧通過修復受損動物面神經功能和神經肌肉的興奮性，產生治療面神經麻痹的作用。實驗結果見表1和表2。

表2 士的寧對家兔神經肌電圖的影響

3 討論

面神經是人體中穿過骨管最長的腦神經，主要包括運動神經纖維和感覺神經纖維，其中大多數為運動神經纖維，因此面神經主要以運動功能為主。所以，面神經從中樞到末梢之間的任何部位受到損傷，都可以導致部分性或完全性面神經麻痹。面神經損傷大多在膝狀神經節處，比較靠近面神經的中樞側，一旦受損，面神經的變性影響范圍較廣，而且面神經骨管緊緊包繞著面神經，間隙較窄，受損后對其所支配的運動功能會產生嚴重的影響［6］。

面神經麻痹早期由于面神經水腫、脫髓鞘致神經傳導速度減慢，主要表現為面神經功能性障礙，使得面神經運動潛伏期延長、波幅降低。伴隨著病情的發展和電生理的異常改變病情愈加嚴重。因此，面神經AEP和EMG對臨床面癱的定位診斷和預后可提供可靠的理論依據，目前是臨床治療面癱常用的生理指標。

士的寧（strychnine）又被稱為番木鱉堿，是從馬錢子中提取的一種生物堿，能選擇性的興奮脊髓，增強骨骼肌的緊張度。具有興奮脊髓反射和抑菌作用，能直接擴張外周血管，提高動物耐氧能力并有抑菌作用，臨床上通常被用于面癱的治療。士的寧進入體內以后，可以興奮中樞神經系統的某些部位，對脊髓產生興奮作用，提高神經肌肉的反射功能，增加肌肉緊張度。現有研究報道，靜脈注射士的寧也可穿透血腦屏障，直接對中樞系統產生作用［7，8］。

本實驗應用動物實驗模型觀察了士的寧對面癱的作用機制，在一定劑量范圍內外敷士的寧，0.5%到1%范圍的士的寧可使面癱實驗動物模型組的動作電位的幅值顯著增加，肌電圖電位的幅值明顯增加，潛伏期顯著縮短。其作用明顯優于激素類藥物地塞米松的作用，提示士的寧可能通過某些途徑，修復受損面神經，改善面神經肌肉的傳導功能，恢復面部神經肌肉的興奮性，產生治療面神經麻痹的作用。這些結果為士的寧治療面神經麻痹的作用機理提供了實驗室的依據。

［1］陸海泉，顧月萍，湯善發.大劑量地塞米松遞減法治療Bell面癱64例［J］.上海鐵道大學學報，2000，21（3）：83.

［2］宣麗穎，張文杰，曹玉鳳，等.士的寧對豚鼠實驗性面癱的治療作用［J］.內蒙古民族大學學報（自然科學版），2010，25（4）：430.

［3］劉 穩，高志強.周圍性面神經麻痹的動物模型［J］.國際耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2006，30（3）：138.

［4］彭更生，余青云.特發性面癱肌電圖及面神經運動傳導速度的觀察［J］.中國神經精神疾病雜志，2000，26（3）：186.

［5］劉 穩，高志強，神 平，等.單純皰疹病毒性面神經炎的動物模型［J］.中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2006，41（1）：17.

［6］葉愛萍.面神經麻痹肌電圖及面神經傳導速度的觀察［J］.中國臨床康復，2003，7（1）：106.

［7］蔡寶昌，徐曉月，潘 揚.馬錢子生物堿在大鼠體內的組織分布［J］.中國藥理學通報；2004，20（4）：421.

［8］魏 寧，張松偉.馬錢子的研究進展［J］.航空軍醫，2004；32（3）：131.