毛櫻桃核殼及核仁揮發油成分分析

孫晶波, 王 潔, 劉春巖, 齊志偉, 曹成文, 喬瑩瑩, 張 菁, 張成義

(北華大學 藥學院, 吉林 吉林 132013)

毛櫻桃(Prunustomentosa), 俗稱山櫻桃、 野櫻桃, 屬薔薇科, 李屬野生或半野生植物[1], 其根、 葉、 核及鮮果均可入藥, 具有調中和益脾的功效, 可治療四肢癱瘓、 風濕腰疼及炎癥性疾病等[2-4]. 本文通過水蒸汽蒸餾法提取毛櫻桃核殼及核仁中的揮發油, 并利用氣相色譜/質譜(GC-MS)對其成分進行分析對比.

1 儀器與試劑

6890N/5973I型GC-MS(美國安捷侖公司)； BB89-2000型揮發油提取器(北京中西遠大科技有限公司)； AB135-S型電子天平(美國梅特勒公司)； HHSI1-NI4型調溫電熱套(北京長安公司). 毛櫻桃果核購于吉林市土特產批發市場, 經北華大學藥學院李鳳麗教授鑒定為長白山脈產毛櫻桃的果核, 經人工破碎篩選出核殼和核仁; 其他試劑均為國產分析純.

2 實 驗

2.1 毛櫻桃核殼及核仁中揮發油的提取 將常溫干燥的毛櫻桃核殼及核仁粉碎, 過40目篩. 稱取30 g, 置于500 mL圓底燒瓶中, 加入300 mL雙蒸水, 按2010年版《中國藥典》附錄XD揮發油測定法, 將其連接揮發油提取器提取揮發油, 加熱回流6 h, 利用重蒸乙醚萃取揮發油, 經無水碳酸鈉干燥, 過濾, 除水后的萃取液濃縮為2.0 mL無色油狀液體, 置于冰箱中備用.

2.2 測試條件 氣相色譜條件： 色譜柱為DB-1(30 mm×0.25 mm×0.25 μm)毛細管柱. 升溫程序： 柱溫50 ℃保持2 min, 以10 ℃/min升至180 ℃, 保持1 min, 以6 ℃/min升至280 ℃, 保持10 min； 進樣口溫度為250 ℃； 分流比為40∶1； 載氣為氦氣； 載氣流量為1.0 mL/min； 溶劑延遲為1.9 min. 質譜條件: 離子源為電子轟擊(EI)； 離子化模式為負離子； 電離電壓為70 eV；m/z為35～550； 離子源溫度為250 ℃； MS譜庫為NIST庫.

3 結果與討論

3.1 GC/MS分析鑒定結果 分別取毛櫻桃核殼及核仁揮發油乙醚液0.2 μL, 采用GC-MS法對其分析檢測, 結果如圖1和圖2所示, 共檢測出68種成分, 通過檢索標準數據庫, 并結合文獻[5-6]解析, 確認了毛櫻桃核殼及核仁揮發油的化學成分36種. 利用峰面積歸一化法計算求得各化學成分在揮發油中的相對質量分數, 結果列于表1.

圖1 核殼揮發油總離子流Fig.1 Total ions flow chart of the shell essential oil

圖2 核仁揮發油總離子流Fig.2 Total ions flow chart of the kernel essential oil

編號保留時間/min化合物相對質量分數/%核殼核仁編號保留時間/min化合物相對質量分數/%核殼核仁12.081醋酸0.08167.804苯甲醇1.421.6822.216乙酸乙酯0.272.45177.881苯乙醛0.3032.372甲基環戊烷0.13188.809苯甲酸甲酯0.0242.569苯0.06199.892(+)-二苯甲酰-L-酒石酸酐0.92 52.8403-羥基-2-丁酮0.042010.069苯甲酸2.880.9663.265乙縮醛二乙醇0.192110.058苯甲酸乙酯1.3773.587乳腈0.030.682210.445水楊酸甲酯0.0483.6812,3-丁二醇0.322311.033安息香乙醚0.3538.6294.303四氫異噁唑3.592411.792苯乙醇腈1.61104.310(1)-3-甲基-2-丁醇1.782511.9214,5-二甲基-2-苯基-1,3-二氧戊環0.07 114.3693-糠醛0.082612.174反,反-2,4-癸二烯醛0.03124.4452-乙氧基-丁烷0.082718.080苯甲酸芐酯0.160.36135.151乙基苯0.022819.586鄰苯二甲酸二苯酯0.03146.610苯甲醛87.7448.752920.944鄰苯二甲酸二丁酯0.02157.5861-五烯-3醇0.02

3.2 討 論 采用GC-MS檢測揮發油類成分, 并與標準數據庫比較, 不需要標準品, 與其他鑒定方法相比具有簡單、 快速、 準確的優點[7-8]. 從毛櫻桃核殼揮發油中共分離出48種成分, 鑒定了其中的24種成分, 占揮發油總檢測峰面積的97.45%. 其中質量分數較高的成分是苯甲醛(87.74%)、 苯甲酸(2.88%)、 (1)-3-甲基-2-丁醇(1.78%)、 苯乙醇腈(1.61%)和苯甲醇(1.42%). 從毛櫻桃核仁揮發油中檢測并鑒定出12種化學成分, 其中質量分數較高的成分是苯甲醛(48.75%)、 安息香乙醚(38.62%)、 四氫異噁唑(3.59%)、 乙酸乙酯(2.45%)、 苯甲醇(1.68%)和苯甲酸乙酯(1.37%). 分析結果表明, 苯甲醛在核殼和核仁揮發油中的質量分數均較高, 天然苯甲醛對霉菌和細菌均有一定的抑制作用[9]. 在質量分數大于1%的化合物中, (1)-3-甲基-2-丁醇(1.78%)和苯乙醇腈(1.61%)僅存在于毛櫻桃核殼中, 苯甲酸(1.37%)和四氫異噁唑(3.59%)僅存在于核仁中. 可見毛櫻桃核殼與核仁揮發油中所含成分及各成分的質量分數存在較大差異. 毛櫻桃核殼及核仁揮發油中以醇、 醛、 酸和酯類成分為主, 與其他揮發油中常見的檸檬烯、 萜烯和萜醇類成分不同[10], 與田棣等[11]報道的假奓包葉果殼揮發油成分類型相近, 但各成分的質量分數差異較大.

綜上, 本文通過研究毛櫻桃核殼及核仁的化學成分, 得到了毛櫻桃核殼及核仁揮發油的成分及質量分數, 為毛櫻桃在藥理和藥效學的研究奠定了理論基礎.

[1] GAO Hai-sheng, XIAO Yue-juan, LIU Xiu-feng, et al. Study on the Nutritive Compositions ofPrunustomentosaThunb Fruit [J]. Food Science, 2002, 23(6): 110-112. (高海生, 肖月娟, 劉秀鳳, 等. 毛櫻桃果實營養成分分析研究 [J]. 食品科學, 2002, 23(6): 110-112.)

[2] GAO Hai-yan, ZHAO Lei, HU Xiao-song, et al. Study on the Extraction and Stability of Cherry Pigment [J]. Food and Fermentation Industries, 2003, 29(4): 54-57. (高海燕, 趙鐳, 胡小松, 等. 櫻桃色素的提取及穩定性研究 [J]. 食品與發酵工業, 2003, 29(4): 54-57.)

[3] XIONG Wei-wei, DING Xue-xing, FU Yao, et al. A Study on Cherry’s Ingredient and Its Pharmacological Effects [J]. Journal of Beihua University: Natural Science, 2010, 11(5): 408-411. (熊蔚蔚, 丁雪馨, 付瑤, 等. 櫻桃成分及其藥理作用的研究 [J]. 北華大學學報: 自然科學版, 2010, 11(5): 408-411.)

[4] Zhang C Y, Shao S H, Chen X, et al. Anti-frostbite Effects ofPrunustomentosaThunb Total Flavone [J]. European Journal of Inflammation, 2011, 9(1): 65-71.

[5] 從浦珠, 李筍玉. 天然有機質譜學 [M]. 北京: 中國醫藥科技出版社, 2002: 783-808.

[6] Heller S R, Milne G W A. EPA/NIH Mass Spectral Data Base [M]. Washington: Government Printing Office, 1978: 125-129.

[7] BAO Yu-min, ZHANG Li, XU Ling, et al. Species Analysis of Five Trace Elements inTroliuschinensis[J]. Journal of Jilin University: Science Edition, 2011, 49(2): 327-330. (包玉敏, 張力, 徐玲, 等. 蒙藥材金蓮花中5種微量元素的形態分析 [J]. 吉林大學學報: 理學版, 2011, 49(2): 327-330.)

[8] GU Xiao-lin, WANG Lu-li, LI Hong-bin, et al. Chemical Constituents ofClinopodiumchinensisO.Kuntzevar.grandiflorum(Maxim.) Hara [J]. Journal of Jilin University: Science Edition, 2011, 49(4): 772-776. (谷曉琳, 王陸黎, 李洪斌, 等. 風車草的化學成分 [J]. 吉林大學學報: 理學版, 2011, 49(4): 772-776.)

[9] LI Xue-ling, LING Wei-wei. Study on Extraction Technology and Antimicrobial Effects of Benzaldehyde in Peach Kernel [J]. Journal of Biology, 2010, 27(3): 31-33. (李雪玲, 凌瑋瑋. 桃仁中苯甲醛的提取及其抑菌作用研究 [J]. 生物學雜志, 2010, 27(3): 31-33.)

[10] ZHAO Ou, ZHOU Jian-wei, BAN Da-ming. Analysis of Volatile Oil from Different Parts ofLitseacubeba[J]. Journal of Chinese Medicinal Material, 2010, 33(9): 1417-1419. (趙歐, 周建威, 班大明. 山雞椒不同部位揮發油化學成分的GC/MS分析 [J]. 中藥材, 2010, 33(9): 1417-1419.)

[11] TIAN Di, REN Lu, DOU Fang, et al. GC-MS Analysis of Essential Oil from Different Parts ofDiscocleidionrufesens[J]. Northwest Pharmaceutical Journal, 2011, 26(5): 331-333. (田棣, 任璐, 竇芳, 等. 假奓包葉不同部位揮發油的分析比較 [J]. 西北藥學雜志, 2011, 26(5): 331-333.)