普適泰對(duì)SD大鼠慢性非細(xì)菌性前列腺炎作用的實(shí)驗(yàn)觀察

趙麗波

河北省肥鄉(xiāng)縣醫(yī)院藥劑科，河北肥鄉(xiāng) 057550

慢性非細(xì)菌性前列腺炎（chronic nonbacterial prostatitis）的發(fā)病機(jī)制至今尚未明確，病因?qū)W較為復(fù)雜，目前存在爭議[1]，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為其病因主要與炎癥、精神心理因素、盆腔相關(guān)疾病、病原體感染和免疫異常等有關(guān)[2-3]，其臨床主要表現(xiàn)為會(huì)陰、肛周部、恥骨和尿道等部位疼痛和排尿異常。近年來其發(fā)病率逐漸增高，慢性非細(xì)菌性前列腺炎的發(fā)病率占前列腺炎的90%左右。目前，慢性非細(xì)菌性前列腺炎的治療目的主要為改善患者的排尿癥狀、緩解疼痛和提高患者的生活質(zhì)量[4]，其治療以藥物治療為主。普適泰片（Prostat Tablets）可抑制白三烯前列腺素合成及阻礙體內(nèi)體內(nèi)睪酮轉(zhuǎn)化為二氫睪酮，有研究顯示，其治療慢性前列腺炎療效顯著[4]。筆者就此對(duì)大鼠進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，將40只大鼠隨機(jī)分為化學(xué)模型組（1%λ-角叉菜膠）、化學(xué)模型普適泰組、免疫模型組及免疫模型普適泰組，以探討普適泰片對(duì)慢性非細(xì)菌性前列腺炎作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

選取40只清潔級(jí)SD大鼠，均為雄性，體重為220～250 g，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供，所有大鼠均于清潔級(jí)動(dòng)物房內(nèi)飼養(yǎng)，室內(nèi)濕度保持為45%～70%，室溫保持在21～26℃，光照、黑暗各12 h。選取動(dòng)物后適應(yīng)性飼養(yǎng)1周，將40只SD大鼠隨機(jī)分為四組，每組各10只，分別為化學(xué)模型組（1%λ-角叉菜膠）、化學(xué)模型普適泰組、免疫模型組及免疫模型普適泰組。

1.2 儀器與試劑

1.2.1 儀器 日立7020生化儀，萊卡RM2126切片機(jī)，法國AB&VET ABC血球計(jì)數(shù)儀，Anthos Zenith 200st酶標(biāo)儀。

1.2.2 試劑 完全弗氏佐劑（FCA）（Sigma公司生產(chǎn)），百白破疫苗（武漢生物制品研究所生產(chǎn)），普適泰片（南京美瑞制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20070404，國藥準(zhǔn)字H20000486），λ-角叉菜膠（Sigma公司生產(chǎn)，批號(hào)：10/11/05）。

1.3 免疫模型的制備

首先進(jìn)行手術(shù)器械的手術(shù)操作臺(tái)的消毒，選取約300 g的SD大鼠5只進(jìn)行脫頸椎處死，徹底消毒后置于操作臺(tái)上，使用無菌剪刀剪開大鼠腹部皮膚，依次剪開大鼠腹部肌肉，暴露膀胱，將膀胱提起充分暴露大鼠的前列腺，將大鼠的膀胱和前列腺輕輕取下置于冰0.9%氯化鈉溶液中，將膀胱及脂肪清除，并清洗干凈[4]。將前列腺組織剪碎，置于勻漿器中勻漿，然后置于冰塊中，使勻漿后的前列腺組織保持低溫，于4℃、15 000 r/min高速離心30 min，離心后吸除上層脂肪組織，留取上清液-20℃冷凍保存?zhèn)溆谩Ｈ∩锨逡?.2 mL進(jìn)行等比稀釋，然后置于96孔板中，讀取其OD值，將蛋白提取液稀釋為80 g/L。免疫模型組于第0、7天在大鼠兩頸部、腹股溝及腳掌處注入等比混合的FCA與大鼠前列腺蛋白提純夜1 mL，劑量：頸部0.4 mL，腹股溝0.4 mL，腳掌0.1 mL×2只；并于大鼠腹腔注射百白破疫苗0.5 mL，并于第21天給予大鼠腹腔注射前列腺蛋白提純液0.5 mL。

1.4 化學(xué)模型的制備

給予大鼠3%戊巴比妥鈉麻醉，劑量為0.1 mL/100 g，腹部消毒后再腹正中部剪一約2 cm的切口，依次打開腹腔暴露前列腺[5]。模型組在大鼠前列腺背側(cè)葉注射1%角叉菜膠生理鹽水0.1 mL，然后逐層關(guān)閉腹腔，放回籠繼續(xù)飼養(yǎng)。

1.5 處理方法

于造模后第8天給予大鼠普適泰片灌胃，給藥體積4mL/kg，連續(xù)灌胃26 d，并于停止給藥1 d內(nèi)處死大鼠。

1.6 觀察項(xiàng)目

觀察4組SD大鼠第1、3、5周的體重變化情況，以及白細(xì)胞、血清C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）、血清免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）、血清雌二醇（E2）、睪酮（T）、前列腺特異抗原（prostate specific antigen，PSA）；記錄普適泰對(duì)大鼠前列腺、睪丸、附睪、包皮腺、脾臟以及淋巴結(jié)系數(shù)的影響。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 16.0對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠體重的變化情況

給予大鼠普適泰灌胃后，免疫模型組給藥第1、3、5周大鼠體重?zé)o任何變化，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；化學(xué)模型組大鼠在第3周時(shí)體重明顯低于化學(xué)模型普適泰組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 各組大鼠體重變化情況（kg，±s）

表1 各組大鼠體重變化情況（kg，±s）

注：與化學(xué)模型普適泰組比較，t=8.019，aP＜0.05

組別 只數(shù) 第1周 第3周 第5周化學(xué)模型組化學(xué)模型普適泰組免疫模型組免疫模型普適泰組10 10 10 10 230.5±5.2 229.2±7.8 229.4±6.8 231.1±5.0 281.3±14.1a 297.5±9.3 278.9±14.3 277.2±13.6 334.1±26.2 350.1±17.9 350.1±21.3 349.2±18.5

2.2 普適泰對(duì)各組大鼠生化指標(biāo)的影響

化學(xué)模型普適泰組大鼠的白細(xì)胞明顯低于其他3組，與化學(xué)模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與免疫模型普適泰組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。免疫模型普適泰組的血清T明顯高于模型組，兩組間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而血清CRP、血清IgG、血清E2及血清PSA間無明顯差異。見表2。

表2 普適泰對(duì)各組大鼠生化指標(biāo)的影響（±s，n=10）

表2 普適泰對(duì)各組大鼠生化指標(biāo)的影響（±s，n=10）

注：與化學(xué)模型組比較，t=9.657，*P＜0.05；與免疫模型普適泰組比較，t=10.166，#P＜0.05；與免疫模型組比較，t=12.783，&P＜0.05；CRP：C反應(yīng)蛋白；IgG：免疫球蛋白G；E2：雌二醇；T：睪酮；PSA：前列腺特異抗原

組別 白細(xì)胞（×109/L）血清CRP（mmol/L）血清IgG（g/L）血清E2（ng/mL）血清T（ng/mL）血清PSA（mmol/L）化學(xué)模型組化學(xué)模型普適泰組免疫模型組免疫模型普適泰組4.8±1.5 3.3±0.9*#4.4±0.9 4.5±0.5 58.6±16.3 52.1±13.4 55.7±9.3 54.5±21.2 1.78±0.04 1.91±0.25 2.01±0.35 2.00±0.31 112.5±50.6 124.1±51.3 117.3±55.2 125.2±59.5 6.3±1.5 5.8±2.2 2.6±1.1 6.9±3.1&14.6±4.5 13.9±4.2 15.4±2.6 15.7±3.1

2.3 普適泰對(duì)大鼠臟器系數(shù)的影響

給予普適泰后，化學(xué)模型組的前列腺系數(shù)明顯低于化學(xué)模型普適泰組，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；免疫模型組的脾臟系數(shù)明顯高于免疫模型普適泰組，兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而在睪丸、包皮腺、附睪以及淋巴結(jié)的系數(shù)無明顯差異。見表3。

表3 普適泰對(duì)大鼠臟器系數(shù)的影響（±s，n=10）

表3 普適泰對(duì)大鼠臟器系數(shù)的影響（±s，n=10）

注：與化學(xué)模型組比較，t=8.277，*P＜0.05；與免疫模型組比較，t=7.988，#P＜0.05

組別 前列腺 睪丸 包皮腺 附睪 脾臟 淋巴結(jié)化學(xué)模型組化學(xué)模型普適泰組免疫模型組免疫模型普適泰組0.17±0.04 0.24±0.04*0.22±0.06 0.21±0.06 0.88±0.04 0.90±0.07 0.91±0.06 0.90±0.10 0.025±0.010 0.028±0.011 0.027±0.012 0.030±0.014 0.28±0.06 0.30±0.05 0.31±0.05 0.31±0.04 0.24±0.03 0.23±0.04 0.26±0.03 0.20±0.05#0.023±0.011 0.021±0.009 0.021±0.009 0.019±0.008

3 討論

慢性非細(xì)菌性前列腺炎（chronic nonbacterial prostatitis）的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜[6]，至今尚未明確，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為其病因主要與病原體感染（如支原體、厭氧菌、沙眼衣原體等感染）、精神心理因素（如焦慮、抑郁等精神心理疾病）、盆腔相關(guān)疾病（如精索靜脈曲張、前列腺外周帶靜脈叢擴(kuò)張、間質(zhì)性膀胱炎等）和免疫反應(yīng)異常等有關(guān)。近年來研究顯示，慢性非細(xì)菌性前列腺炎可能是一種自身免疫疾病或過敏性炎性反應(yīng)[7]，李冬梅等[8]選取了32只SD大鼠，建立了自體免疫性前列腺模型，結(jié)果顯示其與免疫因素有明顯相關(guān)性。有學(xué)者認(rèn)為其與炎癥有一定的相關(guān)性，前列腺在炎癥的作用下導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生促炎因子，血液、前列腺液、組織等的IL-6、IL-8、IL-10等細(xì)胞因子水平發(fā)生改變，使前列腺局部發(fā)生免疫反應(yīng)，從而對(duì)機(jī)體造成影響。項(xiàng)領(lǐng)等[9]對(duì)慢性前列腺炎患者的前列腺液進(jìn)行了細(xì)菌學(xué)檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，216例患者中分離出200株菌株，分離率達(dá)73.6%。目前，慢性非細(xì)菌性前列腺炎的治療目的主要為改善患者的排尿癥狀、緩解疼痛和提高患者的生活質(zhì)量，其治療方法主要為藥物治療。

普適泰片（Prostat Tablets）的主要成分為脂溶性花粉提取物EA10和水溶性花粉提取物P5，作用機(jī)制可能與其可抑制白三烯前列腺素合成及阻礙體內(nèi)體內(nèi)睪酮轉(zhuǎn)化為二氫睪酮相關(guān)。研究顯示，普適泰片對(duì)慢性非細(xì)菌性前列腺炎的療效顯著，副作用小，安全可靠[10-11]。黃誼[12]對(duì)138例前列腺炎患者進(jìn)行了研究，結(jié)果顯示聯(lián)合普適泰治療組的總有效率為84.06%，明顯高于未給予普適泰組的59.42%。λ-角叉菜膠為一種海藻類植物中提取的膠體物質(zhì)，K+、Ca2+等離子可影響其黏度，其具有增稠、乳化、膠凝、成膜等特性，在一定濃度下對(duì)熱體無害。

本研究中，筆者給予SD大鼠普適泰進(jìn)行干預(yù)，結(jié)果顯示，給予大鼠普適泰灌胃后，免疫模型組給藥第1、3、5周大鼠體重?zé)o任何變化；化學(xué)模型組大鼠在第3周時(shí)體重明顯低于化學(xué)模型普適泰組。化學(xué)模型普適泰組大鼠的白細(xì)胞明顯低于其他3組，與化學(xué)模型組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與免疫模型普適泰組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。免疫模型普適泰組的血清T明顯高于模型組；化學(xué)模型組的前列腺系數(shù)明顯低于化學(xué)模型普適泰組；免疫模型組的脾臟系數(shù)明顯高于免疫模型普適泰組。由此可見，化學(xué)刺激對(duì)大鼠的前列腺產(chǎn)生了影響，普適泰片可改善大鼠前列腺血流的變化，可抑制炎性反應(yīng)。免疫模型組中大鼠的血清睪酮明顯升高，與以往報(bào)道相符[13]。化學(xué)模型組中大鼠的白細(xì)胞明顯降低，白細(xì)胞在炎性反應(yīng)過程中其重要作用[14-15]，其通過可釋放蛋白水解酶和活性氧，增加血管的通透性，引起組織損傷。化學(xué)模型組中的普適泰可通過減少白細(xì)胞，從而減少炎癥因子的釋放，從而修復(fù)組織損傷。睪酮的化學(xué)名稱為17β-羥基雄甾-4-烯-3-酮丙酸酯，為一種類固醇，主要由男性的睪丸分泌，其對(duì)人體作用的化學(xué)機(jī)制尚未明確，其可以影響男性前列腺的增長，對(duì)男性的發(fā)育至關(guān)重要，免疫模型組中SD大鼠的血清睪酮明顯升高，可見普適泰片可以使大鼠前列腺中的睪酮增加，從而起到治療的作用。可見，化學(xué)模型普適泰組與免疫模型普適泰組的作用機(jī)制不同，化學(xué)模型普適泰組是通過作用于大鼠血液中的白細(xì)胞而發(fā)揮治療的作用，而免疫模型普適泰組則是通過作用于大鼠血清中的睪酮而發(fā)揮作用。

綜上所述，普適泰對(duì)兩種慢性前列腺炎均有顯著療效，但作用機(jī)制有所不同。本研究上尚有不完善之處，以期以后進(jìn)行更完善的實(shí)驗(yàn)以證實(shí)此結(jié)論。

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