融水縣肉鴨禽流感疫苗免疫試驗分析報告

【摘 要】通過把不同品種的肉鴨（即融水香鴨和櫻桃谷鴨）分成A組（融水香鴨）和B組（櫻桃谷鴨），每組均于12日齡用0.6ml/羽的禽流感疫苗分別以頸部皮下和胸部肌內注射兩種免疫注射方法進行免疫，在免疫后10d、20d、30d采樣檢測抗體滴度，結果表明：①免疫后10d，兩品種肉鴨采用這兩種注射方法抗體合格率都為0%。②免疫后20d的采樣結果：A組皮下注射合格率為44%，A組肌內注射合格率為36%；B組皮下注射合格率為39%，B組肌內注射合格率為35%。③免疫后30d采樣結果：A組皮下注射合格率為78%，A組肌內注射合格率為80%；B組皮下注射合格率為81%，B組肌內注射合格率為72%。筆者發現，免疫后20d內抗體產生相差不大，這表明這兩個品種的肉鴨采用皮下注射和肌注后20d內產生抗體的速度基本一致；免疫后30d，A組肌內注射產生抗體比B組肌內注射產生抗體合格率高8%，而皮下注射差異僅3%，這表明A組肌注產生抗體速度比B組快，而皮下注射兩者產生抗體速度相當。不過，兩者不論是用皮下注射還是肌注，免疫后30d抗體都達到70%以上，這可為今后禽流感免疫工作提供科學指導。

【關鍵詞】肉鴨；禽流感疫苗；免疫試驗

禽流感屬正黏病毒科中的A型流感屬，它不僅會感染豬、馬、海豹、貂、鯨魚以及幾乎所有禽類，還能感染人。其宿主很廣泛，自然界的鳥類帶毒現象最為普遍，已知帶AIV的鳥類多達88種。我國已發現17種野鳥帶毒，候鳥是洲際間傳播的主要媒體之一，候鳥遷徙使鴨面臨被感染的威脅更甚，因此必須做好禽流感防控工作，以防給養殖業造成巨大經濟損失。

在我縣的飲食文化中，無鴨肉不成宴，不論是紅白喜事還是接待親朋好友，鴨肉必不可少。近年來，隨著人民群眾生活水平的提高，不同烹制方法的鴨肉產品更是受到廣大消費者的青睞，因此，融水香鴨、櫻桃谷鴨等不同品種的肉鴨養殖都取得了一定的經濟效益，廣大養殖戶的積極性很高，在政府的產業引導下，柳州實隆禽業有限公司進駐我縣，以“公司+基地+農戶”的形式大力發展櫻桃谷鴨。此外，融水香鴨已取得了國家地理標志證明商標，養殖量也有很大提高。肉鴨的廣泛養殖給禽流感防控提出了挑戰。預防和控制禽流感最有效的辦法是進行疫苗免疫接種，為了解我縣肉鴨禽流感免疫抗體水平，以及時掌握禽流感的免疫效果和對禽流感防控進行科學指導，我中心于2013年上半年對20個鴨場進行了禽流感免疫效果監測，現報告如下。

1 材料與試驗方法

1.1 試驗對象

1.1.1 融水香鴨

選擇來自同一個孵化場健康鴨苗的養殖場10個，每場飼養1000羽。

1.1.2 櫻桃谷鴨

選擇來自同一個孵化場健康鴨苗的養殖場10個，每場飼養5000羽。

1.2 試驗時間

2013年1月至5月。

1.3 試驗疫苗

本次采用廣東永順生物制藥股份有限公司生產的重組禽流感病毒滅活疫苗（H5N1亞型，Re-6株），批號：2013015，生產日期：20130202，有效期：20140201，用量：0.6ml/羽，2～8℃保存。

1.4 試驗動物分組

1.4.1 A組

把飼養條件相同的融水香鴨10個場設為A組。

1.4.2 B組

把飼養條件相同的櫻桃谷鴨10個場定設為B組。

1.5 接種方法。

（1）選定A組其中的5個場采用頸部皮下注射方法，此種方法稱為A1組；選定剩余的5個場采用胸肌內注射方法，此方法稱為A2組。

（2）選定B組其中的5個場采用頸部皮下注射方法，此種方法稱為B1組；選定剩余的5個場采用胸肌內注射方法，此方法稱為B2組。

（3）接種日齡。A組、B組均是12日齡。

1.6 采樣

（1）A1、A2組分別在接種后10d、20d、30d分3次采樣，每場每次隨機采樣20份，3次共600份。

（2）B1、B2組分別在接種后10d、20d、30d分3次采樣，每場每次隨機采樣20份，3次共600份。

2 檢測方法與判斷

2.1 檢測方法

參照《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T18936-2003）的要求，用血凝抑制（HI）試驗檢測。

2.2 判斷

依據高致病性禽流感防制技術規范中附件記載的血凝和血凝抑制試驗介紹的方法進行檢測和判斷，即以完全抑制4個血凝單位（HAU）抗原的血清最高稀釋倍數作為血凝抑制（HI）滴度，以抗體滴度不小于1∶16為合格。

3 檢測結果

3.1 A1組檢測結果

A1組每羽皮下注射0.6ml疫苗后，在免疫后10d采樣的100份血清中，有39份產生抗體，但未合格，有61份未產生抗體，合格率0%；免疫后20d采樣的100份血清全部產生抗體，其中44份抗體合格，合格率44%；免疫后30d采樣的100份血清全部產生抗體，其中78份抗體合格，合格率78%。由此可見，融水香鴨皮下注射疫苗30d后產生的抗體可起到保護作用。

3.2 A2組檢測結果

A2組每羽皮下注射0.6ml疫苗后，在免疫后10d采樣的100份血清中，有38份產生抗體，但未合格，有62份未產生抗體，合格率0%；免疫后20d采樣的100份血清全部產生抗體，其中36份抗體合格，合格率36%；免疫后30d采樣的100份血清全部產生抗體，其中80份抗體合格，合格率80%。由此可見，融水香鴨肌注疫苗30d后產生的抗體可起到保護作用。

3.3 B1組檢測結果

B1組每羽皮下注射0.6ml疫苗后，在免疫后10d采樣的100份血清中，有23份產生抗體，但未合格，有77份未產生抗體，合格率0%；免疫后20d采樣的100份血清全部產生抗體，其中39份抗體合格，合格率39%；在免疫后30d采樣的100份血清全部產生抗體，其中81份抗體合格，合格率81%。由此可見，櫻桃谷鴨皮下注射疫苗30d后產生的抗體可起到保護作用。

3.4 B2組檢測結果

B2組每羽肌注0.6ml疫苗后，在免疫后10d采樣的100份血清中，有33份產生抗體，但未合格，有67份未產生抗體，合格率0%；免疫后20d采樣的100份血清全部產生抗體，其中35份抗體合格，合格率35%；免疫后30d采樣的100份血清全部產生抗體，其中72份抗體合格，合格率72%。由此可見，櫻桃谷鴨肌注疫苗30d后產生的抗體能起到保護作用。

4 分析與建議

（1）A、B兩組于免疫接種當日各場采血5份檢測母源抗體，結果無相應抗體，因此本次試驗可排除母源抗體干擾。

（2）這次疫苗免疫試驗被全程追蹤觀察，A組免疫后10min內副反應死亡3羽；B組免疫后10min內副反應死亡5羽，之后3d內不再有死亡，這說明禽流感免疫對鴨產生副反應率雖不高但還是有的，因此，免疫前要采取相應措施，如疫苗取出冰箱后放置常溫，讓疫苗溫度與氣溫相差不大；免疫前要喂些電解質、維生素和減少趕鴨的應激等。

（3）A、B兩組免疫后10d采樣，抗體合格率均為0%；免疫后20d采樣，A1組抗體合格率為44%，A2組抗體合格率為36%，B1組抗體合格率為39%，B2組抗體合格率為35%；一免疫后30d采樣，A1組抗體合格率為78%，A2組抗體合格率80%，B1組抗體合格率為81%，B2組抗體合格率為72%。從以上情況看，禽流感疫苗一免疫后10d抗體產生很低，未起到保護作用；免疫后20d抗體合格率在35%～44%之間，同樣未起到保護作用；免疫后30d抗體合格率在72%～81%之間，能起到保護作用。

（4）櫻桃谷鴨飼養周期較短，42d左右即出欄。免疫后30d抗體達到高峰期，持續約15d后開始下降（另做抗體消長試驗所得結果），因此建議不進行二免。

（5）融水香鴨飼養周期較長，一般為90d。免疫后30d抗體達到高峰期，持續約20d后開始下降（另做抗體消長試驗所得結果），因此建議適時進行二免。

（6）從本次不同品種的肉鴨采取不同注射方式的試驗結果來看，不論是皮下注射還是肌注，都達到了免疫效果，但從免疫到抗體達到高峰期之間仍存在風險，因此，平時采取其他防范措施還是必要的，如杜絕傳染源入侵、消毒、提高肉鴨機體抗病能力等。

作者簡介：

趙小紅 廣西柳州市融水縣動物疫病預防控制中心 主任，畜牧師蔣才淼 廣西柳州市融水縣動物疫病預防控制中心 技術干部，助理獸醫師