SQA-V精子質(zhì)量分析儀與計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)在土家族男性精液檢測(cè)中的應(yīng)用

張明忠 秦 麗 趙 敏

湖北恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院，湖北恩施 445000

隨著社會(huì)的發(fā)展進(jìn)步，男性生育障礙越來(lái)越受到重視[1]。 而精液檢驗(yàn)已成為診斷男性不育癥及評(píng)估男性不育癥治療效果的重要檢查手段。目前臨床用于精液檢驗(yàn)的主要有傳統(tǒng)手工分析方法、計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)及SQA-V 精子質(zhì)量分析系統(tǒng)三種， 但是傳統(tǒng)手工分析方法常受檢驗(yàn)者操作水平的影響，常導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果差異較大，重復(fù)性差，缺少客觀性，無(wú)法滿足臨床需要[2]。 而計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)及SQA-V 精子質(zhì)量分析系統(tǒng)有著操作方便、 檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確的特點(diǎn)，目前臨床應(yīng)用較廣。 本研究通過(guò)應(yīng)用計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)及SQA-V 精子質(zhì)量分析系統(tǒng)對(duì)湖北恩施土家族苗族自治州中心醫(yī)院（以下簡(jiǎn)稱“我院”）收集的土家族男性精液進(jìn)行分析，以對(duì)比兩種檢驗(yàn)系統(tǒng)的準(zhǔn)確性及相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2009 年5 月～2013 年4 月于我院就診行精液檢查的土家族男性3000 例，年齡25～41 歲，平均（33.41±11.36）歲。 正常組2236 例，不育癥組764 例。 不育癥診斷標(biāo)準(zhǔn)為：婚后性生活正常，未采取任何避孕措施1 年以上配偶未懷孕者，且配偶生育能力正常者[3]。

1.2 標(biāo)本采集

精液采集前受檢者禁止性生活3～5 d， 在此期間應(yīng)避免自慰或夢(mèng)遺等情況， 保持正常飲食及作息，勞逸結(jié)合不可勞累過(guò)度，另外應(yīng)戒除煙酒，忌服對(duì)生精功能有影響的藥物等。 精液采集前排凈尿液，應(yīng)用手淫法采集精液，將一次性射精精液用清潔玻璃小瓶收集（禁用避孕套），標(biāo)本保持于30～40℃之間，并于采集1 h 內(nèi)送檢。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)

正常精液判斷標(biāo)準(zhǔn)[4-5]：①精液量2～5 mL；②精子密度≥20×106/mL； ③精子活力具有前向運(yùn)動(dòng)的精子（a 級(jí)+b 級(jí)） 百分比＞50%或a 級(jí)精子百分比＞25%；④pH 值7.2～8.0；⑤精子活率a 級(jí)（%）+b 級(jí)（%）+c 級(jí)（%）≥60%；⑥液化時(shí)間＜60 min；⑦正常形態(tài)精子＞70%或精子畸形率＜30%。 當(dāng)精液檢測(cè)結(jié)果均符合上述標(biāo)準(zhǔn)時(shí)判斷為正常，否則為異常精液。

1.4 檢查方法

1.4.1 SQA-V 精子質(zhì)量分析 于精液充分液化30 min后進(jìn)行檢測(cè)， 應(yīng)用檢測(cè)儀器選用以色列MES 公司的SQA-V 精子質(zhì)量分析儀，操作方法嚴(yán)格按照《SQA-V型精子質(zhì)量分析儀用戶手冊(cè)》進(jìn)行操作[6]：將液化后的精液充分混勻， 使用SQA-V GOLD 專用一次性采樣管吸取0.5 mL 標(biāo)本加入自動(dòng)檢測(cè)孔進(jìn)行分析。1.4.2 計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng) 用SQA-V 精子質(zhì)量分析的同時(shí)，同時(shí)將標(biāo)本于計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)中進(jìn)行檢測(cè)，儀器選用WLY29000 型數(shù)碼彩色精子質(zhì)量檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)，操作嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行檢測(cè)[7]：一次性吸管吸取10 μL 混合均勻精液樣本至macro 計(jì)數(shù)板，蓋上蓋板后計(jì)數(shù)，計(jì)數(shù)視野≥5個(gè)。

1.5 觀察方法

1.5.1 DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)分析 對(duì)正常組和不育癥組兩組患者分別應(yīng)用SQA-V 精子質(zhì)量分析及計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)所得的DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)[精子密度（SD）、精子活率（SM）、前向運(yùn)動(dòng)精子率（PR）、前向運(yùn)動(dòng)精子數(shù)（PRC）、有效精子密度（FSC）和精子活力指數(shù)（SMI）]進(jìn)行對(duì)比分析。

1.5.2 相關(guān)性分析 對(duì)所有患者應(yīng)用SQA-V 精子質(zhì)量分析及計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)所得的DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件應(yīng)用SPSS 19.0 軟件， 所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）形式表示，并應(yīng)用獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)； 相關(guān)性分析使用Bivariate 模型，r ≥0.70 為高度相關(guān)，0.40≤r ＜0.70 為中度相關(guān)性，r ＜0.40 為低度相關(guān)性，以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)分析

正常組及不育癥組SD、SM、PR、PRC、FSC 及SMI等DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＞0.05）。 見表1、2。

2.2 相關(guān)性分析

經(jīng)相關(guān)性分析顯示，應(yīng)用SQA-V 精子質(zhì)量分析及計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)檢測(cè)所得DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)間均存在顯著的正向直線相關(guān)關(guān)系（P = 0.000）。見表3。

表1 正常組DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)分析（±s）

表1 正常組DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)分析（±s）

注：SD：精子密度；SM：精子活率；PR：前向運(yùn)動(dòng)精子率；PRC：前向運(yùn)動(dòng)精子數(shù)；FSC：有效精子密度；SMI：精子活力指數(shù)

?

表2 不育癥組DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)分析（±s）

表2 不育癥組DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)分析（±s）

注：SD：精子密度；SM：精子活率；PR：前向運(yùn)動(dòng)精子率；PRC：前向運(yùn)動(dòng)精子數(shù)；FSC：有效精子密度；SMI：精子活力指數(shù)

項(xiàng)目 SD（×106/mL） SM（%） PR（%） PRC（×106/mL） FSC（×106/mL） SMI SQA-V 精子質(zhì)量分析計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)t 值P 值35.35±1.81 35.27±1.91 0.250 0.803 41.24±5.48 41.30±1.99 0.083 0.934 37.92±1.92 38.23±1.96 0.984 0.327 15.15±1.13 15.33±1.21 0.950 0.344 4.43±0.86 4.69±0.83 1.893 0.060 41.66±4.37 42.70±4.36 1.455 0.148

表3 相關(guān)性分析（±s）

表3 相關(guān)性分析（±s）

注：SD：精子密度；SM：精子活率；PR：前向運(yùn)動(dòng)精子率；PRC：前向運(yùn)動(dòng)精子數(shù)；FSC：有效精子密度；SMI：精子活力指數(shù)

項(xiàng)目 SD（×106/mL） SM（%） PR（%） PRC（×106/mL） FSC（×106/mL） SMI SQA-V 精子質(zhì)量分析計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)r 值P 值58.68±23.50 58.99±24.05 0.984 0.000 54.12±13.64 54.11±13.09 0.930 0.000 49.23±11.54 49.57±11.54 0.971 0.000 32.48±17.43 32.66±17.44 0.995 0.000 6.28±1.97 6.45±1.88 0.902 0.000 82.82±41.46 83.46±41.07 0.990 0.000

3 討論

精液檢查的準(zhǔn)確性是臨床診斷及治療的基礎(chǔ)，因此其在臨床工作中意義重大。 計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)相對(duì)于傳統(tǒng)的手工分析方法在檢查中增加了嚴(yán)格的量化指標(biāo)， 顯著降低了手工檢測(cè)的主觀性[8]，其是在顯微鏡檢查的基礎(chǔ)上， 利用計(jì)算機(jī)輔助圖形分析技術(shù)對(duì)各項(xiàng)精液指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)[9]，大大提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性， 但是也存在著對(duì)精子形態(tài)和活力的辨別能力較低的缺點(diǎn)[10]。 而SQA-V 精子質(zhì)量分析是運(yùn)用精子運(yùn)動(dòng)所引起的光密度來(lái)進(jìn)行測(cè)定， 同樣有著較好的準(zhǔn)確性， 且可彌補(bǔ)計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)對(duì)精子形態(tài)和活力的辨別能力較低的缺點(diǎn)[11-13]。 本研究通過(guò)應(yīng)用計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)及SQA-V 精子質(zhì)量分析兩種檢測(cè)方法對(duì)土家族無(wú)不育癥男性及不育癥男性精子進(jìn)行檢測(cè)， 以比較兩種檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性， 結(jié)果顯示： 正常組及不育癥組應(yīng)用SQA-V精子質(zhì)量分析及計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)檢測(cè)所得的DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)比較均未見顯著差異。 同時(shí)，應(yīng)用SQA-V 精子質(zhì)量分析及計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)檢測(cè)所得DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)間均存在顯著的正向直線相關(guān)關(guān)系， 可見兩種檢測(cè)方法均可應(yīng)用于土家族男子的精液檢測(cè)。

本研究在比較兩種檢測(cè)方法中選取了DMPPFI六項(xiàng)參數(shù)作為檢測(cè)指標(biāo)，DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)主要包括SD、SM、PR、PRC、FSC 和SMI 六項(xiàng)。 其中SD 是精子數(shù)量的客觀體現(xiàn)，雖然足夠的精子數(shù)量對(duì)于受孕有著重要的作用，但是單純應(yīng)用精子密度尚不能作為評(píng)估男性的生育能力唯一指標(biāo)。 SM 將精子分前向運(yùn)動(dòng)和非前向運(yùn)動(dòng)的不動(dòng)精子兩大類， 其中因非前向運(yùn)動(dòng)的不動(dòng)精子，可導(dǎo)致無(wú)法受孕，而前向運(yùn)動(dòng)的精子為受孕的有效精子， 故本指標(biāo)同樣也是評(píng)價(jià)男性生育能力的重要指標(biāo)。PR 和PRC 均是評(píng)價(jià)前向運(yùn)動(dòng)精子的主要指標(biāo)， 也是評(píng)價(jià)男性生育功能的主要指標(biāo)之一，當(dāng)前向運(yùn)動(dòng)精子數(shù)量及功能正常時(shí)，精子可有效地穿過(guò)女性宮頸、子宮等部位，完成受孕，因此也是評(píng)價(jià)男性不育癥的一個(gè)最好的指標(biāo)之一。 而FSC 及SMI 均是綜合SD、SM、PR、PRC 四項(xiàng)指標(biāo)而得出的評(píng)價(jià)男性生育能力的重要指標(biāo)，F(xiàn)SC 及SMI 降低，則可表示存在生育功能障礙。 臨床研究顯示受精的失敗與精液質(zhì)量或精子功能低下有關(guān)[14-15]，綜合以上六項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)，可有效體現(xiàn)男性的生育能力。 因此本研究選取DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)作為檢測(cè)指標(biāo)。雖然本研究所得出的結(jié)果未對(duì)比出SQA-V 精子質(zhì)量分析與計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)在DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)分析中的差異， 但是已有研究顯示相對(duì)于計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)，SQA-V 精子質(zhì)量分析在進(jìn)行精液檢測(cè)中有著高精密度和高效率的特點(diǎn)， 且其所能檢驗(yàn)出的精子參數(shù)較計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)更豐富， 除本研究所觀察的DMPPFI 六項(xiàng)參數(shù)外，其還可對(duì)精子質(zhì)量進(jìn)行更全面的檢測(cè)， 對(duì)臨床診斷及評(píng)估治療效果意義更為重大。

綜上所述，在臨床工作中，對(duì)于土家族男性精子的檢測(cè)中，SQA-V 精子質(zhì)量分析及計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)比較未見明顯差異，同時(shí)兩種檢測(cè)方式存在直線相關(guān)性，臨床工作中均可應(yīng)用。

[1] 余文輝.無(wú)精子癥男性激素水平變化及睪丸病理分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2009，30（3）：264-265.

[2] Komiya A，Watanabe A，Kawauchi Y，et al. Analysis of inter-examination differences in sperm nuclear vacuoles among male patients with infertility[J].Syst Biol Reprod Med，2014，60（1）：35-42.

[3] 世界衛(wèi)生組織.世界衛(wèi)生組織人類精液及精子-宮頸黏液相互作用實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)手冊(cè)[M].4 版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2001：4-20.

[4] 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：319.

[5] Degl'Innocenti S，F(xiàn)ilimberti E，Magini A，et al. Semen cryopreservation for men banking for oligospermia，cancers，and other pathologies：prediction of post-thaw outcome using basal semen quality [J]. Fertil Steril，2013，100（6）：1555-1563.

[6] 戈一峰，汪春暉，邵永，等.兩種精子分析系統(tǒng)的比較研究[J].中華男科學(xué)雜志，2008，14（10）：923-926.

[7] 安茂偉，韓秀娟，王世禮，等.計(jì)算機(jī)輔助精子質(zhì)量分析與常規(guī)精液分析的對(duì)比性研究[J].現(xiàn)代診斷與治療，2008，19（1）：7-9.

[8] Kathiravan P，Kalatharan J，Karthikeya G，et al.Objectivesperm motion analysis to assess dairy bull fertility using computer-aided system-a review [J]. Reprod Domest Anim，2011，46（1）：165-172.

[9] 郭海彬，殷寶莉，張翠蓮，等.精子質(zhì)量與短時(shí)間受精后受精結(jié)局關(guān)系的研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，35（2）：150-155.

[10] 黃開權(quán)，張淑芳，沈熔.ZKPACS 多功能顯微圖像分析系統(tǒng)在精液分析中應(yīng)用與評(píng)價(jià)[J].安徽醫(yī)學(xué)，2010，31（3）：270-272.

[11] Ge YF，Wang CH，Shao Y，et al. Comparison of the parameters obtained by sperm quality analyzer V and computer-aided spermanalysis system [J]. Zhonghua Nan Ke Xue，2008，14（10）：923-926.

[12] Maree L，van der Horst G. Quantification and identification of sperm subpopulations using computer-aided sperm analysis and species-specific cut-off values for swimming speed [J]. Biotech Histochem，2013，88（3-4）：181-193.

[13] 劉安娜，張玲，王厚照.SQA-V 全自動(dòng)精子質(zhì)量分析儀與計(jì)算機(jī)輔助精液分析系統(tǒng)結(jié)果比較[J].職業(yè)與健康，2009，25（20）：2161-2162.

[14] 阮杰，黃華振，劉新光.蛋白激酶CK2 活性與人精子質(zhì)量相關(guān)性的初步探討[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2007，28（4）：289-291.

[15] Hoogewijs M，De Vliegher S，De Schauwer C，et al.Validation and usefulness of the Sperm Quality Analyzer V equine for equine semen analysis[J].Theriogenology，2011，75（1）：189-194.