木耳屬4個野生菌株的培養特性研究*

王 敬，姚方杰，王小娥，方 明，陳 影

(吉林農業大學園藝學院，食藥用菌教育部工程研究中心，吉林 長春 130118)

〈育種與馴化〉

木耳屬4個野生菌株的培養特性研究*

王 敬，姚方杰，王小娥，方 明，陳 影

(吉林農業大學園藝學院，食藥用菌教育部工程研究中心，吉林 長春 130118)

通過研究不同營養和環境條件對木耳屬4個主要種類的野生菌株生長速率和生長勢等培養特性的影響，明確了黑木耳、毛木耳、皺木耳、紫木耳菌絲生長的最適溫度范圍以及最佳碳源和氮源。

木耳屬；培養特性；碳源；氮源；最適溫度

木耳屬AuriculariaBull.ex Mérat，屬于真菌門、擔子菌亞門、層菌綱、有隔擔子亞綱、木耳目、木耳科。婁隆后、朱慧真等提出我國木耳屬共14個種類，其中以黑木耳和毛木耳是栽培地區最為廣泛、產量最高的種類[1-3]。近年來研究發現，皺木耳和紫木耳的食用價值和可栽培性也具有很大潛力，市場反應較好[4-6]。但是，關于木耳屬4個主要種類培養特性的比較研究尚未見報道。本文研究了木耳屬4個主要種類野生菌株培養的適宜營養源和溫度條件，旨在為木耳屬的進一步馴化栽培和遺傳育種研究提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試菌株

由云南省農業科學院提供，保存于吉林農業大學園藝學院國家食用菌產業技術體系黑木耳育種崗位研究室，研究室已經通過出耳試驗證明了供試菌株種類的準確性。供試菌株情況見表1。

1.1.2 碳源利用培養基

碳源分別為葡萄糖、蔗糖、乳糖、糊精和甘露醇，詳見文獻[7，8]。

1.1.3 氮源利用培養基

氮源分別為蛋白胨、酵母浸粉、牛肉膏和硝酸銨，詳見文獻[7-9]。

1.2 試驗方法

1.2.1 溫度參數

用直徑7 mm的打孔器將活化好的菌種接種于直徑9 cm的PDA平板培養基中，共設15℃、20℃、25℃、30℃、35℃等5個溫度處理，每個處理設5次重復。接種后待菌種開始萌發后測量，待菌絲將要長滿平板時結束測量。

1.2.2 碳源參數

以碳源利用培養基為基礎培養基，將所使用的碳源設5個處理，每個處理5次重復。置于25℃恒溫培養箱中培養，接種后待菌種開始萌發后測量，待菌絲將要長滿平板時結束測量。

1.2.3 氮源參數

以氮源利用培養基為基礎培養基，將所使用的碳源設4個處理，每個處理5次重復。置于25℃恒溫培養箱中培養，接種后待菌種開始萌發后測量，待菌絲將要長滿平板時結束測量。

2 結果與分析

2.1 木耳屬不同菌株的適宜溫度

不同溫度對木耳屬野生菌株菌絲生長的影響見圖1。

2.2 木耳屬不同菌株的適宜碳源

木耳屬4個主要種類野生菌株的生長速率和生長勢因碳源不同而呈現較大差異，結果見表2、圖2。

注：+++為菌絲粗壯、濃密，菌落潔白；++為菌絲較粗壯、較濃密，菌落潔白；+為菌絲稀疏、纖細，菌落灰白色。

結合生長速率和生長勢來看，皺木耳最適宜碳源為蔗糖，葡萄糖次之，糊精效果最差；黑木耳最適宜碳源為蔗糖，葡萄糖次之，乳糖效果最差；毛木耳以蔗糖培養基上的生長速率最快，但以葡萄糖培養基上的生長勢最佳；紫木耳最適宜碳源為乳糖，葡萄糖次之。

2.3 木耳屬不同菌株的適宜氮源

不同氮源對木耳屬野生菌株菌絲生長勢的影響見表3、圖3。

注：+++為菌絲粗壯、濃密，菌落潔白；++為菌絲較粗壯、較濃密，菌落潔白；+為菌絲稀疏、纖細，菌落灰白色。

由表3和圖3可以看出，木耳屬4個主要種類的野生菌株生長速率和生長勢因氮源不同而存在較大差異。綜合生長速率與生長勢來分析，皺木耳最佳氮源為牛肉膏，但在蛋白胨培養基上生長速率最快；黑木耳最佳氮源為酵母浸粉，蛋白胨次之；毛木耳的最佳氮源是牛肉膏，酵母浸粉次之；紫木耳的最佳氮源為蛋白胨。硝酸銨為氮源時，所有菌株的生長速率和生長勢均最差。

3 討論

3.1 木耳屬適宜生長溫度

本試驗結果表明，木耳屬4個主要種類的野生菌株對溫度、碳源、氮源的要求不同。在溫度試驗中發現，4個種的野生菌株菌絲生長的最適溫度除黑木耳為30℃外，其它均為25℃，而且35℃條件下仍能緩慢生長。溫亞麗[10]研究認為，黑木耳在生長溫度15℃～32℃均可生長，最適生長溫度為25℃～28℃，差異的產生，可能是供試菌株不同造成的。

葉叢永、葉錦蕊等[11]報道毛木耳菌絲生長溫度范圍8℃～32℃，其中以22℃～25℃為最適，溫亞麗也認為毛木耳菌絲生長最適溫度為25℃～32℃，這些與本研究結果基本一致。張志光、張曉云等[12]認為紫木耳菌絲在溫度20℃～32℃可以極為正常的生長，在26℃～27℃達到最大值，這與本研究結果基本相符。

另外，本研究中黑木耳、皺木耳和紫木耳在15℃時菌絲不生長，可能是因為野生菌株的菌絲活力差或菌絲生長極其緩慢不容易被觀察到造成的。要確定黑木耳種類的適宜生長溫度條件還需采用更多的野生、栽培菌株開展研究。

3.2 木耳屬最佳碳源

本試驗研究表明，皺木耳和黑木耳菌絲生長的最佳利用碳源是蔗糖，葡萄糖次之，但李玉梅、姜云天等[13]認為黑木耳菌種液體培養的最佳碳源為葡萄糖；毛木耳在葡萄糖培養基上生長勢好，在蔗糖培養基上速率是最快，王謙、尹紅芳等[14]的研究結果也認為葡萄糖是毛木耳菌絲生長的最佳碳源。紫木耳菌絲生長的最佳利用碳源是乳糖。關于紫木耳和皺木耳在碳源利用方面的研究還未見報道。

3.3 木耳屬最佳氮源

在氮源試驗中發現，皺木耳和毛木耳的最佳利用氮源是牛肉膏，黑木耳的最佳利用氮源則是酵母浸粉，紫木耳的最佳利用氮源是蛋白胨，4個種利用最差的氮源是硝酸銨。矯天育[15]認為在黑木耳搖瓶培養營養篩選中，以酵母膏促進菌絲生長方面最佳；暴增海、何瀅等[16]的研究成果也認為牛肉膏在毛木耳菌絲體的生長方面促進作用最大，其次是酵母膏、蛋白胨，效果最差的是硝酸銨，這與本研究結果相符。關于紫木耳和皺木耳在氮源利用方面的研究還未見報道。

4 結論

本文明確了木耳屬4個種野生菌株對溫度、碳源、氮源的不同要求。在15℃～35℃的溫度條件下，菌絲生長速率差異較大，皺木耳在15℃生長極其緩慢，其它3個種甚至停止生長，35℃條件下仍能緩慢生長；最適溫度除黑木耳為30℃外，其它均為25℃。

皺木耳和黑木耳菌絲生長的最佳利用碳源是蔗糖，葡萄糖次之；紫木耳菌絲生長的最佳利用碳源是乳糖；毛木耳在葡萄糖培養基上生長勢好，但是在蔗糖培養基上生長速率最快。

皺木耳和毛木耳的最佳利用氮源是牛肉膏，黑木耳的最佳利用氮源則是酵母浸粉，紫木耳的最佳利用氮源是蛋白胨，4個種利用最差的氮源是硝酸銨。

其中，關于紫木耳和皺木耳的碳源和氮源利用方面的培養條件還未見報道。今后將對這4個供試菌株開展進一步的液體培養、馴化栽培及遺傳育種研究。

[1]呂作舟. 食用菌栽培學[M].北京：高等教育出版社，2006.

[2]婁隆后. 木耳屬種類的初步研究[J].中國食用菌，1992，11(4)：30-32.

[3]姚方杰，張友民，陳影，等. 我國黑木耳兩種主栽模式淺析[J].食藥用菌，2011，19(3)：38-39.

[4]鄭武. 木耳屬種質資源評價的研究[D].吉林農業大學，2012.

[5]方明，姚方杰，王曉娥，等. 木耳新品種選育研究[J].菌物研究，2012，10(4)：263-265.

[6]孫露. 木耳屬遺傳多樣性及原生質體育種的研究[D].吉林農業大學，2012.

[7]宋吉玲，姚方杰. 北朝鮮美味冬菇野生菌株培養特性的研究[J].北方園藝，2011(11)：162-163.

[8]羅升輝. 亞側耳優良菌株選育及其優良高產參數的研究[D].吉林農業大學，2007.

[9]班立桐，王文治，周宗寰. 碳源和氮源對網脈木耳菌絲生長影響的研究[J].天津農林科技，2006(2)：10-11.

[10]溫亞麗. 木耳屬種質資源的遺傳鑒定與遺傳多樣性評價[D].南京農業大學，2004.

[11]葉從永，葉錦蕊，鄭繼發. 毛木耳的發展前景與高效栽培[J].食藥用菌，2012，20(1)：41-43.

[12]張志光，張曉云，劉培田，等. 紫木耳的生物學特性[J].食用菌，1988(3)：7.

[13]李玉梅，姜云天，陳艷秋.黑木耳液體培養條件的研究及栽培試驗[J].湖北農業科學，2007，46(5)：768-770.

[14]王謙，尹紅芳，蔡喜存，等. 毛木耳菌絲體的營養生長條件[J].河北大學學報：自然科學版，2007(5)：522-524.

[15]矯天育. 黑木耳液體搖瓶培養基營養篩選[J].食用菌，2010(4)：30-31.

[16]暴增海，何瀅，孔德平，等. 黃背木耳液體發酵培養基的優化研究[J].食用菌，2009(1)：4-5.

Study on Cultivation Characteristics of Four Wild Species ofAuriculariaBull.ex Mérat

WANG Jing， YAO Fang-jie， WANG Xiao-e， FANG Ming， CHEN Ying

(College of Horticulture, Engineer Research Center of Edible and Medical Mushroom of Education Ministry, Jilin Agricultural University, ChangchunJilin130118)

By studying the influence of different nutrition and environmental conditions on the cultural characteristics including growth rate and growth potential of four main wild species ofAuriculariaBull.ex Mérat, the optimum temperature, the best carbon resource and nitrogen resource on the mycelium growth ofAuriculariaauricular,A.polytricha,Auriculariasp. andA.delicatewere obtained.

AuriculariaBull.ex Mérat; Cultivation characteristic; Carbon resource; Nitrogen resource; Optimum temperature

*項目來源：國家現代產業技術體系(CARS-24)。

王敬(1986-)，女，在讀碩士研究生，現主要從事食用菌形態結構的研究工作。

**通信作者： 姚方杰，女，教授，現主要從事設施園藝調控及食用菌工程學研究。E-mail: yaofj@yahoo.com.cn

2014-01-26

S646.6

A

1003-8310(2014)02-0000-00