TRFIA法定量檢測HBsAb的臨床價值分析

黃樂升 陳惠玲 李 莉 李煥庭 李結秋

（廣州市第一人民醫院，廣東 廣州 510180）

TRFIA法定量檢測HBsAb的臨床價值分析

黃樂升 陳惠玲 李 莉 李煥庭 李結秋

（廣州市第一人民醫院，廣東 廣州 510180）

目的探討分析時間分辨熒光免疫技術（TRFIA）法定量檢測HBsAb的臨床價值。方法選取我院2007年3月至2009年3月99例乙肝兩對半的臨床標本，分為觀察組（TRFIA法）和對照組（ELASA法），對比兩組檢測結果，進行統計學分析。結果兩組檢測結果對比無明顯差異（P＞0.05），無統計學意義；兩組檢測結果的模式對比，少見及罕見的模式一致相符率明顯低于其他常見模式（P＜0.05），具有統計學意義。結論時間分辨熒光免疫技術（TRFIA）法定量檢測HBsAb的敏感性比酶聯免疫吸附實驗（ELASA）法要高，能進行HBV血清標志的特異性檢測，準確率高，具有重要的臨床診斷價值。

TRFIA；定量檢測；HBsAb

乙型肝炎的病毒血清學標志物（HBV-M）是檢測并測定乙型肝炎傳染性、病毒感染及治療效果的診斷指標。由于聚合酶鏈式反應（PCR）技術目前仍未廣泛應用于臨床上檢測乙型肝炎病毒中的脫氧核糖核酸（HBV-DNA），因此，通常臨床上采取半自動免疫分析儀對血清HBV-M進行檢測，發現時間分辨免疫分析法（TRFlA）用于HBV-M的半定量分析[其中乙型肝炎表面抗體（抗-HBs）進行定量檢測分析[1]，可取代傳統酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測的缺點，抗-HBs的含量測定更為精確，更好地輔助臨床診療，本文通過探討分析時間分辨熒光免疫技術（TRFIA）法定量檢測HBsAb的臨床價值，總結如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2007年3月至2009年3月99例乙肝兩對半的臨床標本，男59例，女40例，年齡1～77歲，平均年齡45.5歲，分為觀察組和對照組，觀察組使用TRFIA法對HBsAb進行定量檢測，對照組使用酶聯免疫吸附實驗（ELASA）對HBsAb進行定量檢測，觀察對比兩組檢測結果，記錄相關數據進行統計學分析。

1.2 檢測方法

1.2.1 觀察組

所有患者空腹進行靜脈血采集，一般為3 mL，使用ANYTEST2000時間分辨儀、Egate2310洗板機、2510變頻震蕩器、上海新波生物技術公司的試劑，進行時間分辨熒光免疫技術（TRFIA）法定量檢測HBsAb。

1.2.2 對照組

所有患者空腹進行靜脈血采集，一般為3 mL，使用MK3酶標分析儀、MK2洗板機、北京萬泰生物技術有限公司的試劑，進行酶聯免疫吸附實驗（ELASA）檢測HBsAb。

1.3 統計學方法

本組數據經卡方檢驗，以P＜0.05為有統計學意義。

2 結 果

兩組檢測結果（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）的一致相符率分別為90.6、81.0、84.6、90.7、89.0，兩組數據對比無明顯差異（χ2=0.13～1.62，P＞0.05），無統計學意義；兩組檢測結果的模式對比，少見及罕見的模式一致相符率明顯低于其他常見模式（χ2=6.73，P＜0.05），具有統計學意義，見表1、表2。

3 討 論

3.1 酶聯免疫吸附實驗（ELASA）法檢測HBsAb的臨床分析

傳統的HBsAb檢測多采用酶聯免疫吸附實驗（ELASA）法，操作簡便，適用于大批量的檢測及成本低廉，但敏感性與特異性相對較差，并且有文獻報道[2]，ELASA法檢測結果中約9.09%的人群有漏檢率出現，即HbsAg陽性的人群卻被檢測為陰性反應，這跟ELASA法檢測的敏感度較低有密切的關系，因為ELASA法檢測為定性的檢測，僅能提供陰性、陽性反應的結果，而無法進行定量的檢測，其精確率有一定的局限性，尤其對于接種疫苗或治療后的患者的追蹤觀察比較困難。另外，乙型肝炎的病毒在人體內是以非靜息的狀態存在的，并且不同廠家生產的試劑之間存在一定的差異，因此，使用ELASA法檢測乙型肝炎的標志物時，HBV的模式會相應地產生變化，以HBcAb和HBeAb的變化最為顯著，往往容易發生漏檢或誤檢。龔君順研究中[3]表明，標本中為10～100 IU/L時的HBsAb水平，對HBV的免疫能力最差，HBsAb水平＞100 IU/L才具備抵御HBV侵襲的能力，使用ELASA法檢測10～100 IU/L時的HBsAb多數呈現為陰性反應，無法準確評估其免疫的能力。

3.2 時間分辨熒光免疫技術（TRFIA）法檢測HBsAb的臨床分析

時間分辨熒光免疫技術（TRFIA）法是采用3價的稀土離子，或其結合物作為標志物，用作同位素、熒光物質、化學發光物質及酶的取代，對抗體、抗原等指標進行標記[4]。本文中采用TRFIA檢測出的HBsAg呈現陽性反應的共64例，ELASA法檢測出55例，兩種方法的靈敏度明顯存在差異。有文獻報道[5]TRFIA法能有效克服“溝狀效應”，標本中為10～100 IU/L時的HBsAb水平也能定量檢測出陽性反應，即便是對于HBsAg陽性的標本，經4倍稀釋，并且cut-off值在2.0以下的標本也能準確檢測其呈陽性反應，而ELASA法卻往往檢測為陰性。TRFIA法的定量檢測能夠為檢測者提供科學的試驗數據，進行長期的預防及治療的跟蹤線索，能準確地評估受檢者的免疫能力及指導高危人群中的免疫預防，具有重要的臨床使用價值。TRFIA法最大的缺陷是檢測時間較長，一般需要耗時3.5 h，若日后能縮短其檢測時間，就能更好地節約成本，廣泛應用于臨床。

Clinical Value Analysis of Quantitative Detection of HBsAb TRFIA

HUNAG Le-sheng, CHEN Hui-ling, LI Li, LI Huan-ting, LI Jie-qiu
(The First People's Hospital of Guangzhou, Guangzhou 510180, China)

ObjectiveTo investigate the analysis of TRFIA Quantitative detection of HBsAb clinical value.MethodsSelect the hospital from March 2007 to March 2009 99 cases, it divided into two groups(TRFIA method)and the control group (ELASA method), compared two groups of test results, statistical analysis.ResultsTest results comparing the two groups no significant difference(P＞0.05), not statistically significant; two sets of test results of model comparison, the same pattern of rare and unusual line was significantly lower than other common mode(P＜0.05), statistically significance.ConclusionTRFIA Quantitative detection of HBsAb sensitive than ELASA method must be high, capable of specific detection of HBV serum markers, with high accuracy, has important diagnostic value.

TRFIA; Quantitative detection; HBsAb

R446.6

B

1671-8194（2014）17-0024-02