副豬嗜血桿菌病的診斷與防治

楊裕 楊志強 丁艷霞 李琳 任嚴新 孫召金 王福傳*

（1山西省農業科學院飼料科技研究中心，山西太原 030031；2吉林大學人獸共患病研究所/人獸共患病教育部重點實驗室，吉林長春 130062）

副豬嗜血桿菌病的診斷與防治

楊裕1楊志強2丁艷霞2李琳2任嚴新2孫召金2王福傳1*

（1山西省農業科學院飼料科技研究中心，山西太原 030031；2吉林大學人獸共患病研究所/人獸共患病教育部重點實驗室，吉林長春 130062）

副豬嗜血桿菌是健康豬呼吸道攜帶的一種病原，常于豬只受應激后誘發以多發性漿膜炎、纖維性滲出性炎癥、關節炎、腦膜炎、呼吸困難、高熱及高死亡率為特征的高度接觸性傳染病，本文綜述了HPS的病原特性、流行特點、發病機理、診斷、預防以及治療，并對該病防控的發展方向進行展望。

副豬嗜血桿菌；病原；流行；防控

副豬嗜血桿菌病（Glasser＇s disease）是由副豬嗜血桿菌（Haemophilus parasuis,HPS）引起的豬的一種呼吸道傳染病，常伴隨有特征明顯的腦膜炎、多發性漿膜炎、多發性關節炎以及細菌性肺炎。該病在豬群中零散發生，其中3周齡到4月齡的豬較為易感，經常于斷奶、環境改變、混群等應激后發生，或者與其他疾病混合感染，尤其是在豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）和豬圓環病毒病（PCV）等免疫抑制性疾病發生后更加易感。副豬嗜血桿菌病在主要的豬肉生產國都存在，甚至多年隔離的現代豬場也將其視為一種重大疾病[1]。隨著養豬業的發展，副豬嗜血桿菌病越來越受到重視[2]。

1 病原特性

HPS是一種非溶血性、無鞭毛、無芽孢、多形、短小的革蘭氏陰性桿菌，屬巴氏桿菌科嗜血桿菌屬，煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）依賴菌，可以生長在血瓊脂平板，菌落形狀類似于葡萄球菌菌落[3]。HPS可以從正常豬的鼻腔或扁桃體分離出來，也可以從處于病豬的肺尤其是發生肺炎的病豬的肺中分離出來。敗血癥副豬嗜血桿菌常入侵漿膜（腹膜、胸膜、心包膜、關節腔、腦膜）。

HPS的發現最早可追溯到1910年，是由格拉瑟（Glasser）發現的一種小革蘭氏陰性桿菌；直到1976年，經過準確的分類研究將其命名為副豬嗜血桿菌[4]。目前已經鑒定出至少21種血清型，其他亞型株同樣常見。發生該病的豬群經常伴隨攜帶幾種不同血清型的病原，血清型4、5、12和13在我國很常見，血清型4、5、13和14在北美很常見，在我國常見有一定的交叉免疫保護，相關研究表明，用血清型為4和5的菌株制造的疫苗可以保護免受4或5感染，并減輕血清型13、14感染引起的損傷。雖然毒力與莢膜抗原有關，但是不一定與免疫原性有關。

2 流行特點

副豬嗜血桿菌廣泛分布于豬群中，是一種高度接觸性傳染病。仔豬出生后暴露于該病中，該病原在豬體內很早就開始繁殖[5]。新生仔豬在受到母源抗體保護7～8周后，自身逐漸建立起來的免疫力足以抵抗該病。如果沒有主動或被動免疫的仔豬暴露于副豬嗜血桿菌，豬群即可暴發該病。豬群受到強烈應激時，該病會暴發，該病也常與一些疾病混合感染，如豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒病等[6]。

3 發病機理

目前，副豬嗜血桿菌病的發病機理不是很明確，可能是損傷與應激打開了病菌入侵的通道，也可能是因為豬繁殖與呼吸綜合征、豬流感、豬圓環病毒病等疾病導致免疫抑制，感染后HPS在多個部位定居，所以有一段菌血癥的時期[7]。

HPS可入侵血腦屏障，“喜歡”寄居在軟腦膜和腦髓，經常集中在這些地方并刺激發生炎癥反應。另外，在一些漿膜表面也常常能分離到病原，經常導致炎癥和纖維蛋白滲出[7]。可用顯微鏡明顯觀察到該菌對脈管系統的損傷，脈管系統的損傷可能引起黏膜免疫抑制并促使炎性滲出的形成和關節滑液的增多，進而促進HPS損傷的發生。副豬嗜血桿菌的全身性分布對肺炎或支氣管肺炎的壞死擴展有促進作用。

4 診斷

4.1 臨床癥狀

副豬嗜血桿菌病經常突發，長勢最好的豬首先發病。暴發性疫病可引起極高的死亡率。癥狀由病原集中的地方決定。大多數情況存在起始體溫顯著升高并伴隨厭食、精神沉郁、被毛粗亂、跛行、嚴重呼吸困難等癥狀。HPS在大腦、腦膜以及脊髓內聚集，常引起中樞神經系統紊亂，包括顫抖、共濟失調、后肢麻痹或側躺[8]。腿關節腫脹影響豬行走。任何年齡段的病豬都可能突然死亡。有時出現敗血癥和肌肉炎。在轉為慢性的情況下，出現鼻炎、呼吸困難、結膜變紅、四肢末端發紺以及面部和耳朵水腫等癥狀。

4.2 剖解病變

副豬嗜血桿菌病以纖維素性胸膜肺炎、纖維素性多發性漿膜炎、關節炎和腦膜炎為特征，胸腔內有大量淡紅色液體、纖維素性滲出物及凝塊，心包緊張，存有大量心包液，有的心包膜上有奶酪樣壞死，心包膜與心臟粘連。肺臟表面覆有大量纖維素性滲出物并與胸壁粘連；肺炎區累及兩側肺葉的尖葉、心葉、膈葉的前下部及副葉。肉眼可見的損傷主要是在單個或多個漿膜面，可見漿液性和化膿性纖維蛋白滲出物，這些漿膜包括腹膜、心包膜和胸膜，這些損傷也可能波及腦膜和關節表面，尤其是腕關節和跗關節。在顯微鏡下觀察滲出物，可見纖維蛋白中性粒細胞和較少量的巨噬細胞[9]。副豬嗜血桿菌經常引起急性敗血癥，并且其內毒素可引起彌漫性血管內凝血，導致多個器官內形成微血栓，非常類似于由豬鏈球菌引起的血栓、細菌性肺炎，但副豬嗜血桿菌病常引起“絨毛心”，而豬鏈球菌病則引起“鎧甲心”。

有時沒有肉眼可見的病變，但是如果把大腦摘除，即可能在大腦腹側面見到纖維素性及膿性滲出。隨著病程的進展，滲出可能會出現在小腦或大腦。一個或多個腿關節腫脹，或許伴隨其他部位的損傷。寰枕關節經常受到影響。關節分泌液含有纖維素，顏色從灰色到綠色。

4.3 病原分離鑒定

由于副豬嗜血桿菌廣泛存在，HPS可以從健康豬的鼻腔、氣管和肺臟中分離。嚴格無菌操作，從豬的胸膜、心包、肝臟、脾臟、關節和腦膜取出病料，接種到含有煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）的胰酪胨大豆瓊脂培養基（TSA）平板上，24～48小時后挑取灰白或透明、光滑呈露珠樣的菌落，于含NAD的TSA平板上單菌落劃線純培養，并于48小時后細菌涂片，革蘭氏染色鏡檢[10]。若鏡檢結果為革蘭氏陰性細小桿菌，有莢膜，無芽胞，具多形性，從短桿狀到細絲狀，以短桿狀為主，則繼續進行一次純化培養，同時接種于鮮血瓊脂平板、普通瓊脂平板和巧克力瓊脂平板。如果細菌在巧克力瓊脂平板上生長良好，而在鮮血瓊脂平板、普通瓊脂平板上沒有菌落生成，則將菌株保存待進一步鑒定，再將HPS涂在不含NAD的鮮血瓊脂平板上，再挑去金黃色葡萄球菌菌落劃線，24～48小時后觀察金黃色葡萄球菌劃線周圍有無HPS菌落生長，或進行生化鑒定，有條件的豬場可進行聚合酶鏈式反應（PCR）檢測來確診[11-13]。

5 預防與治療

5.1 預防

設定嚴格的管理制度，搞好環境衛生，加強飼養，控制主要疾病例如豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環病毒病、豬流感等疾病的發生，預防性地注射抗生素和疫苗才可以綜合預防該病。因為副豬嗜血桿菌的寄居與豬的早期生活有關（小于10日齡），隔離飼養尚未能成功防治該病，必須注重綜合防治[13]。減少應激和接種疫苗對于種畜疾病預防來說具有重要的意義，從斷奶到保育階段是HPS預防的重中之重，采用副豬嗜血桿菌多價滅活菌苗（含血清型4、5、12、13）的免疫效果明顯，保護能力強，安全可靠。除做好常規免疫外，需經常監測母源抗體，分娩前4周免疫1次，2頭份/頭。一旦豬場發病，仔豬在15～60日齡時要實施緊急接種，每頭1 mL，半個月后加強免疫1次；待疫情穩定后全場2～3周齡的仔豬進行常規免疫副豬嗜血桿菌疫苗[13]。

若已從豬體內分離出HPS，可以使用福爾馬林滅活的自家苗進行有效預防。但是于副豬嗜血桿菌的交叉保護有限，對一種血清型的預防并不能確保避免其他血清型的感染。

5.2 治療

副豬嗜血桿菌病的病程通常很短，且如果不經過治療，病畜會死亡。所以，病畜需及時給予口服藥物治療以及非腸道給藥治療。臨床藥敏試驗表明，本菌對氟喹諾酮類、頭孢類、增效磺胺類、氨基糖苷類等藥物敏感。但是由于HPS血清型較多，從不同豬場分離的HPS菌株敏感度不同。因此，治療前須做藥敏試驗[14]。同時，根據本病菌易產生耐藥性的特點，采取盡早、交替、聯合對癥下藥原則。臨床癥狀出現初期，立即使用泰拉菌素、頭孢菌素、氨芐青霉素、阿莫西林、土霉素、四環素、卡那霉素和慶大霉素等敏感藥物，進行大劑量注射治療，其中較為常見的藥物為頭孢菌素、阿莫西林、土霉素、氟苯尼考和氟喹諾酮類等[15,16]，臨床上也可將阿莫西林、四環素、慶大霉素、達諾沙星或恩諾沙星等任何兩種無配伍禁忌的藥物進行組合，同時混合或分別深部肌肉注射，并配合地塞米松以增強效果，或采用清開靈注射液與頭孢噻呋鈉以進行中西藥結合治療，每天1次，連用7天。在治療期間，適量輔喂氟苯尼考、替米考星、電解多維、維生素（維生素C、維生素E、維生素A）、黃芪多糖，按說明拌料或飲水添加，有顯著增強抵抗力的作用，有助于患豬迅速恢復食欲，縮短治愈期[17]。

6 小結

豬場防控該病要遵循“養重于防，防重于治”的方針，獸醫要制定嚴格的防疫制度，要提高飼料質量，注意環境衛生，各階段豬群全進全出，豬舍消毒后要有空置期，分級飼養，減少豬群流動，定期對圈舍進行消毒，減少應激，定期采血鑒定血清型，有針對性地加強疫苗免疫，并做藥敏試驗，預防性給藥，嚴格控制豬繁殖與呼吸綜合征、豬瘟、豬圓環病毒病、豬細小病毒病以及豬鏈球菌病等疾病的發生[18,19]。副豬嗜血桿菌病發病很快，確診和治療都有困難，要求豬場技術員能盡早發現病豬,并對整個豬群采取控制措施。副豬嗜血桿菌存在眾多血清型，提示研制更有效的多價苗迫在眉睫；混合感染多發，也提示研制副豬嗜血桿菌病與其他豬病的多聯苗有望成為防治該病的重要手段，所以運用基因工程的手段研制具有交叉保護的疫苗是預防和控制副豬嗜血桿菌病的必然趨勢，研究識別母源抗體與自身抗體的快速檢測方法亦有助于準確確定疫苗注射的時機，進而加強免疫效果。

[1] 薛國聰,任濤.副豬嗜血桿菌病流行病學及致病因子的研究進展[J].中國畜牧獸醫,2009,36（5）：168-171.

[2] 李軍星.副豬嗜血桿菌分子流行病學調查及其HSp70對pRRsv結構蛋白GP3/GPS的免疫協同作用研究[D].南京：南京農業大學,2009.

[3] Oliveira S.Haemophilus parasuis diagnostics[J].Journal of Swine Health and Production.2007,15(2):99-103.

[4] Oliveira S,Pijoan C.Haemophilus parasuis:new trends on diagnosis,epidemiology and control[J].Veterinary Microbiology, 2004,99(1):1-12.

[5] 郭泉.豬副嗜血桿菌病的診斷與防治[J].畜牧與飼料科學, 2009,30（3）：136.

[6] 曹廣芝,趙鴻璋.豬瘟及豬圓環病毒病和副豬嗜血桿菌病混合感染的診斷與防控[J].中國豬業,2013,8（2）：40-41.

[7] Nedbalcova K,Satran P,Jaglic Z,et al.Haemophilus parasuis and Glasser’s disease in pigs:a review[J].VeterinarniMedicina,2006,51(5):168-179.

[8] 李成琳.副豬嗜血桿菌的分離鑒定及間接ELISA檢測抗體方法的優化[D].成都：四川農業大學,2012.

[9] 高豐,羅毅,成軍,等.豬副嗜血桿菌感染的診斷與防治[J].動物醫學進展,2002,23（6）：101-103.

[10] 陳勇,高艷,張定全,等.副豬嗜血桿菌的分離鑒定與培養基篩選[J].動物醫學進展,2013,34（10）：67-71.

[11] 蔡旭旺,劉正飛,陳煥春,等.副豬嗜血桿菌的分離培養和血清型鑒定[J].華中農業大學學報,2005,24（1）：55-58.

[12] Isabel B,Ana C,Gary E,et al.Differences in susceptibility to Haemophilus parasuis infection in pigs[J].The Canadian Journal of Veterinary Research,2008,72:228-235.

[13] 苗立中.副豬嗜血桿菌熒光定量PCR方法建立及其分離株高密度發酵研究[D].長春：吉林大學,2012.

[14] 何麗麗.廣東地區副豬嗜血桿菌的分離鑒定及動物感染試驗研究[D].南京：南京農業大學,2011.

[15] 楊永貴,沈國權,周興旺.豬副嗜血桿菌病研究進展[J].中國豬業,2008,3（6）：44-46.

[16] 李明波,張抗抗,宋忠旭,等.副豬嗜血桿菌病的防治技術研究[J].湖北農業科學,2012,51（24）：5730-5733.

[17] 吳玉臣,郭爽,唐光武,等.豬肺炎支原體和副豬嗜血桿菌混合感染的診治[J].黑龍江畜牧獸醫,2014（6）：64-65.

[18] 王紅英,劉禎.副豬嗜血桿菌病的診治[J].畜牧獸醫雜志, 2012,31（2）：120-123.

[19] 洪厚成,鄧號來,沈厥祥.豬副嗜血桿菌病的綜合防控[J].現代農業科技,2013（18）：340-342.

S858.28

B

1673-4645（2014）07-0026-04

2014-06-18

山西省農業科學院科研項目（2012ygg22）；山西省科技攻關計劃項目（20140311020-3）

楊裕（1976-），男，助理研究員

*通訊作者：王福傳（1959-），男，研究員