口蹄疫滅活抗原在不同保存條件下146S降解情況的研究

蒼楓 郝鵬 張立華 曹玉梅 張慧芳 李敏 董俊余 張永峰 熊德晶 劉國英 范秀麗/金宇保靈生物藥品有限公司

口蹄疫滅活疫苗中完整病毒146 S粒子的含量是影響疫苗免疫效果的關鍵因素，生產過程中采用合理的保存溫度和濃度，有助于延長病毒的保存期和維持較高的抗原水平，對生產過程中科學地指導的抗原的保存有重要意義。本文針對不同保存溫度和濃度對口蹄疫滅活抗原146 S含量的降解率進行了測定。

（一）材料

1.口蹄疫病毒抗原。O型O/GX/09-7株滅活抗原，由金宇保靈公司生產部提供。

2.乳化佐劑。206佐劑，購自賽比克公司。

3.儀器設備。超速冷凍離心機，紫外分光光度計，生物安全柜，玻璃容器，移液器等。

（二）方法

1.樣品抽取。隨機抽取本公司生產部O型/GX/09-7株滅活抗原液及其相應批號的10倍濃縮純化液，分別取樣進行初始樣品146 S含量的測定。

2.樣品分裝。將原液樣和10倍濃縮后樣分別分裝，20 ml/瓶。每組樣品不少于20個。

表1 不同溫度和濃度對滅活抗原完整病毒146 S影響的檢測結果

表2 原液樣品和10倍濃縮后樣1～7個月內146 S變化曲線

3.樣品保存。每種樣品分2組，分別在-20℃和4℃冰箱中保存7個月。

4.定期檢測。每月定期各取出1個樣品分別進行146 S的測定。

5.146 S測定。按照我公司內部使用的蔗糖密度梯度紫外光定量法，檢測146S抗原的含量。

（三）結果（見表1、2）

（四）討論

口蹄疫O/GX/09-7株滅活病毒在4℃和-20℃保存的7個月中，完整病毒146 S粒子的含量均有所下降。4℃保存條件下，原液樣和濃后樣完整病毒146 S粒子的降解率分別為27.5%、12.3 %；-20℃保存條件下，其降解率分別為87.5%、92.4%。本實驗數據顯示：4℃比-20℃保存條件更有利于抗原的保存；濃度對其影響不顯著。建議在FMD生產過程中，滅活抗原在6個月的保存期內采用4℃條件存放。

當然，口蹄疫完整病毒146 S粒子的穩定性受很多因素的影響，如溶液的PH值、滲透壓、凍融次數等，最佳保存條件將綜合考慮各種因素對其的影響，進一步科學的結論有待于更多實驗的驗證和數據的積累。

（略）