杜 麗
哈爾濱市阿城區人民醫院,黑龍江 哈爾濱 150300
臨床檢驗
血小板黏附的檢測方法及臨床應用
杜 麗
哈爾濱市阿城區人民醫院,黑龍江 哈爾濱 150300
對血小板檢測中血小板黏附試驗的方法及檢測方法及臨床資料進行分析。黏附率增高見于高凝狀態和血栓性疾病,黏附率降低見于vWD、巨大血小板(BBS)綜合征、血小板無力癥、尿毒癥、肝硬化及服用阿司匹林、雙嘧達莫(潘生?。?、保泰松等藥物以后,做好血小板黏附質量控制,對異常結果應結合臨床資料進行分析。
血小板黏附;檢測方法;臨床應用
血小板黏附功能是指血小板可粘附于血管內皮下或其他異物(如玻璃)表面的特性。血小板黏附試驗(PAdT)就是根據這種特性,在一定量的血液與一定表面積異物接觸一定時間后,使一定量血小板粘附于異物表面,分別計接觸前后血小板數,通過其差值從而計算出血小板黏附率[1]。血小板黏附除了與體內血液流變學因素有關外,黏附在此特指血小板黏附于血管內皮下成分,血管內皮下成分有膠原、彈性蛋白等。
血小板黏附功能是指血小板可粘附于血管內皮下或其他異物(如玻璃)表面的特性。血小板黏附試驗(PAdT)就是根據這種特性,在一定量的血液與一定表面積異物接觸一定時間后,使一定量血小板粘附于異物表面,分別計接觸前后血小板數,通過其差值從而計算出血小板黏附率。
1.1 玻璃瓶黏附法
1.1.1 試驗原理 將枸櫞酸鈉抗凝血置于經過硅化及標準化的球形玻璃瓶中,將球形玻璃瓶固定在由電動裝置控制的圓盤上,以3 r/min的速度轉動一定時間,一部分血小板粘附于玻璃瓶壁上,通過記數轉動前后血小板差值,計算出血小板黏附率。
1.1.2 試驗器材 球形玻璃瓶,容量12 ml;轉動盤,轉速3 r/min;血細胞分析儀。
1.1.3 試驗方法 靜脈采血1.8 L,置于含0.109 mol/L枸櫞酸鈉溶液0.2 ml的試管中(或用真空采血管采血),輕輕混勻。立即取抗凝血1.5 ml置于球形玻璃瓶中,將球形玻璃瓶固定于轉盤上,以3 r/min的速度轉動15 min。利用血細胞分析儀分別計數轉動前后血小板數。
1.1.4 參考范圍 男性為(34.9±6.0)%,女性為(39.4±5.2)%。
1.2 玻璃珠柱法
1.2.1 試驗原理 血液流經玻柱時,血小板粘附在玻柱和塑料管上,同時血小板形成的聚集體也被滯留在玻柱內,因此通過玻璃珠柱后血小板數降低,此為血小板粘附及聚集所致,也稱為滯留試驗。
1.2.2 試驗器材 取內徑3 mm、長9.4 cm的塑料管,內裝直徑0.3~0.5 mm的玻珠1.5 g,塑料管兩端封以孔徑
0.05 mm的尼龍布,含玻珠段的塑料管上有3條標線,將此段分為4等分。經硅化的l ml注射器[2]。
1.2.3 試驗步驟 將玻璃珠柱的一端連接針頭,另一端連接注射器,然后用針頭行肘靜脈穿刺,在玻璃珠柱另一端通過抽吸注射器使血液達到玻珠時,開始計時,控制血液通過玻柱的速度,使血液通過每等分玻珠柱的時間為5 s,四等分共20 s。以同樣的速度再抽取6~7次,然后拔出針頭。采集玻珠柱前后塑料管中的血液,分別計血小板數。
1.2.4 試驗正常參考值 (62.5±8.6)%。
1.3玻璃濾器法
原理同玻珠柱法。
1.3.1 試驗器材 濾板(平均孔徑為80~120 μm,板厚約2 mm,容量為10 ml)。
1.3.2 操作方法 肘靜脈采血1.5 ml,立即將血液滴入玻璃濾器中,將濾過的最初4滴血滴入含EDTA-Na20.5 mg的試管中,混勻后計血小板數,為濾過后血小板數。從血液滴入濾器到收集完4滴血的時間控制在20 s左右,從注射器中滴出4滴血于EDTA-Na20.5 mg的試管中,混勻后計血小板數。
1.3.3 正常參考值 (31.9±10.9)%。
血小板黏附率測定的臨床意義表現為:血小板黏附率增高見于血液高凝狀態和血栓性疾病,如手術或創傷后、動脈粥樣硬化、心肌梗死、心絞痛、糖尿病、深靜脈血栓形成、腎臟疾病、妊娠高血壓綜合征、口服避孕藥以及腫瘤轉移等。血小板黏附率降低見于血小板無力癥、巨大血小板綜合征、血管性血友?。╲WD)、骨髓增生異常綜合征以及尿毒癥、肝硬化、纖維蛋白原血癥、服用抗血小板藥物等。
血小板的黏附特性不僅當機體局部血管損傷暴露內皮下成分時可觀察到,而且在體外試驗中,與玻璃表面或膠原纖維等因素接觸時也可觀察到。血小板黏附除了與體內血液流變學因素有關外,起主要作用的成分有:血小板膜糖蛋白,vWF和內皮下組分(膠原或微纖維)。黏附在此特指血小板黏附于血管內皮下成分,血管內皮下成分有膠原、彈性蛋白等。血小板可直接黏附于膠原,亦可通過vWF及纖維結合蛋白等黏附蛋白介導而發生黏附。在血流切變率較高的條件下,vWF對血小板的黏附是至關重要的[3]。vWF可與膠原等結合而發生構形改變,暴露出與血小板GP I b-Ⅸ,GP I b-Ⅸ與vWF結合導致血小板黏附發生。在臨床上,vWF的缺乏(血管性血友?。┗蜓“錑P I b-Ⅸ的缺乏(Betnard-Soulier綜合征)都可導致血小板黏附功能不良而引起出血癥狀。在體外試驗中,用單克隆抗體阻斷vWF或GP I b的結合位點時,均可導致在血流切變率較大的條件下血小板黏附功能降低。但GP I b-Ⅸ并不是血小板上唯一的vWF受體,血小板活化后,GPⅡb-Ⅲa通過識別vWF上的RGD序列亦能與其結合。
[1] 王鳳計.現代血液細胞診斷學[M].1版.天津:天津科技翻譯出版社,2004:142.
[2] 王鴻利.實驗診斷學[M].2版.北京:人民衛生出版社,2005:159-161.
[3] 季萍,木合布力?艾沙,向陽,等.四種伴血小板減少疾病血小板參數變化及意義[J].新疆醫科大學學報,2001,24(2):178-178.
The Testing Method and Its Clinical Application of Platelet Adhesion
DU Li People’s hospital in Acheng,Harbin Heilongjiang 150300,China
The testing method and its clinical application of platelet adhesion to be investigated. Adhesion rate increasing is to be seen in hypercroagulable state and thrombotic diseases,while,reduced adhesion rate is to be seen in vWD,and Soulier(BBS) syndrome,Glanzmann’s disease,uremia,liver cirrhosis and after-taking aspirin,dipyridamole (dipyridamole),phenylbutazone. It is suggested to keep platelet quality in good and analyze the abnormal results combined with analyzing clinical treatment data.
Platelet adhesion,Testing methods,Clinical application
541.4
B
1674-9316(2014)23-0073-02
10.3969/J.ISSN.1674-9316.2014.23.043