不同膽紅素濃度對血漿凝血酶原時間與活化部分凝血活酶時間檢測的影響

王 健，郭漢畫（.廣州市中醫醫院檢驗科 5030；.廣東省中醫院ICU，廣州 500）

凝血酶原時間（PT）與活化部分凝血活酶時間（APTT）是臨床上常用的出、凝血功能檢驗項目，對因凝血因子而引起的出血性、血栓性疾病進行鑒別診斷，了解手術前患者的凝血狀態以及抗凝藥物的治療監控等方面具有重要意義。在日常檢驗中，膽紅素是干擾凝血檢測結果的常見因素之一。本文就不同膽紅素濃度對血漿PT和APTT檢測結果的影響作一探討。

1 資料與方法

1.1 標本來源 德國西門子德靈（Siemens Dade）公司生產的質控水平1（Ci－Trol 1）凝血質控品，批號52811722；中生北控生物科技股份有限公司膽紅素校準品，批號110161。

1.2 儀器與試劑 日本希森美康醫用電子公司生產的SYSMEX CA7000全自動凝血分析儀，日本日立公司生產的HITACHI 7600全自動生化分析儀。德國西門子（Siemens）的PT檢測試劑、APTT檢測試劑，北京中生北控公司膽紅素檢測試劑。

1.3 方法 按照國家臨床化學實驗室標準化委員會（CLSI）體外診斷試劑干擾評估指南EP7－A的要求，將蒸餾水1.0mL溶解凝血質控品作為對照血漿；另在5瓶凝血質控血漿加入不同濃度的膽紅素校準品，混勻后作為實驗血漿，在生化分析儀上測定對照血漿與實驗血漿的膽紅素2次，取平均值；并在凝血分析儀上以凝固法測定每個濃度血漿PT和APTT各5次，取平均值。

1.4 統計學處理 采用SPSS Statistics 17.0軟件對數據進行統計學處理，不同膽紅素濃度下血漿的PT和APTT結果的均數與對照血漿的結果比較采用配對t檢驗，膽紅素與血漿PT和APTT檢測的關系采用回歸方程二次項分析，檢驗水平α＝0.05，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 不同膽紅素濃度血漿的PT和APTT檢測結果 對照血漿的膽紅素濃度為8.02μmol／L，編號為QC，實驗組編號為A、B、C、D、E，其血漿膽紅素濃度分別為（20.10、41.38、65.12、83.56、102.24）μmol／L，比較不同濃度下血漿PT和APTT的檢測結果，見表1。

表1 不同膽紅素濃度的血漿PT和APTT檢測結果

續表1 不同膽紅素濃度的血漿PT和APTT檢測結果

2.2 不同濃度膽紅素與血漿PT、APTT的回歸分析結果 以不同膽紅素濃度為自變量，用X表示；以血漿PT和APTT對應的檢測均值作為因變量，PT用Y1表示，APTT用Y2表示，作相關回歸分析，見表2。

表2 不同濃度膽紅素與血漿PT和APTT的回歸分析結果

3 討 論

血漿PT和APTT的檢測一般運用凝固法，其原理為試劑或者反應杯預溫到37℃，試劑與血漿充分混勻，在混勻的瞬間，散射光強度很弱，此時設定散射光強度為0%，隨著標本中纖維蛋白逐漸凝固，反應杯中樣品的散射光強度逐漸增加，當樣品凝固完全時，散射光穩定在最高的強度上，將此時的散射光設置為100%，在0%～100%的散射光強度變化為一條曲線，可設定其中的一點對應的時間作為凝固時間。通過檢測樣品到達此散射光強度時，與對應的標準曲線比較后轉化為血漿PT和APTT檢測的結果[1]。當標本中含有膽紅素或其他干擾物時[2]，通過影響樣品混合時的散射光強度，可能會對血漿PT和APTT檢測的結果造成一定的影響。黏度（磁場）法凝血分析有抵抗黃疸干擾的優勢，但凝血因子活化仍不可控[3]。

健康人的血漿里含有1.71～17.1μmol／L的膽紅素，但如果紅細胞破壞過多、肝臟有病或者膽道有梗阻等病因時，會導致膽紅素水平超過正常值時，表明有黃疸存在，血中膽紅素水平越高，黃疸越重[4]。本研究通過加入不同濃度的膽紅素形成黃疸程度不同的血漿。檢測結果顯示，血漿PT和APTT檢測的結果隨著黃疸的嚴重程度而升高。含20μmol／L膽紅素血漿PT和APTT檢測的結果與對照血漿比較差異無統計學意義（P＞0.05），說明血漿PT和APTT檢測的結果不受輕度黃疸的影響，含41μmol／L膽紅素的血漿PT結果與對照血漿比較差異無統計學意義（P＝0.06），此濃度的PT結果仍不受影響，而APTT結果與對照血漿比較差異有統計學意義（P＝0.00），此時APTT受到膽紅素的影響；膽紅素濃度超過65μmol／L的血漿，PT、APTT與對照血漿的均值比較差異有統計學意義（P＜0.05），血漿PT和APTT檢測的結果受到高濃度膽紅素的影響。因此，當標本含高濃度膽紅素重度黃疸時，顏色變深的血漿散射光使基線上移，致使血漿PT和APTT檢測的時間延長[5]。

本研究以不同濃度膽紅素為自變量，與其對應血漿PT和APTT檢測的結果為因變量，作回歸曲線擬合估計，膽紅素濃度的增高與PT、APTT結果之間的二次項方程的相關系數比線性方程高，分別達到0.993與0.996，說明TBIL濃度與血漿PT、APTT檢測的相關性良好。選擇相關系數最高的曲線，得出血漿PT和APTT的檢測結果隨TBIL濃度變化的回歸方程。因此，在日常工作中，發現標本血漿PT和APTT的檢測結果非正常升高時，應當觀察標本有無黃疸，以排除黃疸給血漿PT和APTT檢測結果帶來的影響。此外，血漿PT和APTT檢測的結果除了受到黃疸標本的影響外，還會受到脂血、溶血、標本量、放置時間等因素的影響[6－7]。大劑量使用青霉素等藥物會導致血漿PT和APTT的檢測結果延長[8]。此外，肝功能不全、重度肝炎、肝硬化等肝臟疾病患者的凝血因子和抗凝血蛋白合成減少，也會導致血漿PT和APTT的檢測結果延長[9－14]。當標本排除這些因素，并且膽紅素濃度較高時，可以根據相關回歸方程得到的校正公式對黃疸標本血漿PT和APTT檢測的結果進行校正，以獲得準確的結果。

綜上所述，對重度黃疸的標本應加強與臨床溝通，如果標本顏色深黃是由于攝入含色素的藥物引起的，應建議停藥后適當時間重抽；如果是患者本身原因引起，可用回歸方程校正，為臨床提供更準確的凝血檢測結果。

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