輪狀病毒腸炎患兒異型淋巴細胞和免疫球蛋白水平的變化分析

陸作潔，農少云，黃翠波（廣西壯族自治區民族醫院檢驗科，南寧 530001）

輪狀病毒（RV）感染是嬰幼兒急性胃腸炎最常見的病原體，給患兒、家庭及社會帶來很大的影響[1]。為了解RV腸炎患兒治療前后異型淋巴細胞數量及免疫球蛋白水平的變化特點，本研究對本院50例RV腸炎患兒及30例健康體檢的小兒的異型淋巴細胞和免疫球蛋白IgA、IgG、IgM進行治療前后檢測及分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年1月至2012年8月本院兒科收治的RV腸炎患兒50例，其中男28例，女22例；年齡2個月至3歲，平均1.8歲。糞便RV抗體采用膠體金標法檢測為陽性，診斷均符合標準[2]。健康對照組為同期在本院保健科常規健康體檢的30例小兒，其中男17例，女13例；年齡3個月至4歲，平均2.0歲。兩組資料在年齡、性別構成上差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 對選取的患兒治療前及治療后第7天抽取2mL靜脈血置EDTA抗凝管中，用日本SYSMEX XE－2100全自動血細胞分析儀進行檢測后涂血片2張，進行瑞氏染色，雙目光學顯微鏡油鏡下白細胞分類計數，計數出異型淋巴細胞的百分比。在顯微鏡下判斷異型淋巴細胞根據形態特征一般分為3種形態：Ⅰ型（空泡型）又稱漿細胞型，Ⅱ型（不規則型）又稱單核細胞型，Ⅲ型（幼稚型）又稱未成熟細胞型。同時抽取2mL靜脈血置血清管中，離心分離出血清后用德國西門子公司生產的BN prospec型全自動蛋白分析儀檢測。試劑為德靈公司產品。

1.3 統計學處理 數據采用SPSS15.0軟件進行統計學分析，計量資料用x±s表示，組間比較采用t檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 50例RV腸炎患兒治療前外周血檢出異型淋巴細胞47例（94.0%），異型淋巴細胞在白細胞手工分類中的比例為4%～22%；治療后檢出異型淋巴細胞30例（60.0%），20例（40.0%）患兒未檢出異型淋巴細胞。健康對照組中偶見異型淋巴細胞有3例（6.0%）。

2.2 RV腸炎患兒組治療前后異型淋巴細胞數比較 RV腸炎患兒治療前后異型淋巴細胞數都明顯高于健康對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）；治療后異型淋巴細胞數低于治療前，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 各組異型淋巴細胞數及免疫球蛋白水平比較（x±s）

2.3 治療前后血清免疫球蛋白IgA、IgM和IgG水平比較RV腸炎患兒治療前血清免疫球蛋白IgA、IgM和IgG水平下降，與治療后及健康對照組比較，差異有統計學意義（P＜0.05）；治療后與健康對照組比較差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

3 討 論

RV腸炎是導致全球嬰幼兒嚴重急性胃腸炎最主要的病因[3]。RV感染潛伏期一般為1～2d，常伴有呼吸道感染癥狀，自然病程為3～8d，平均為5d，一般預后良好，患者、隱性感染者及病毒攜帶者為傳染源，傳播途徑主要為糞－口途徑和呼吸道傳播[4]。RV在小腸絨毛頂端的柱狀上皮細胞上復制，使細胞發生變性和壞死而脫落，被立方上皮細胞替代，致使小腸吸收面積減小；立方上皮細胞分泌的二糖酶尤其是乳糖酶的數量少、活性低，使食物中的二糖不能完全分解，以短鏈有機酸的形式存在，造成腸液的滲透壓增高而產生腹瀉[5]，它能夠感染腸黏膜細胞產生腸毒素引起胃腸炎，導致腹瀉，嚴重時會因為脫水而致死亡。

異型淋巴細胞是外周血中出現的一種形態變異的非典型淋巴細胞，健康人血片中一般不超過2%[6]。異型淋巴細胞增高是EB病毒感染所致的經典標志，但是隨著新的病原學檢測方法的建立和敏感度的增高，近年來發現異淋增高可與多種病毒的感染有關[7]。多種病毒如EB病毒（EBV）、巨細胞病毒（CMV）、柯薩奇病毒（CVB）、腺病毒（AdV）、肺炎支原體（MP）以及某些炎癥，弓形體病，藥物過敏，自身免疫性疾病，貧血等侵犯淋巴細胞引起細胞免疫應答，導致血液中出現大量反應性變異T淋巴細胞和少量B淋巴細胞，形成異型淋巴細胞[8]。因此出現異型淋巴細胞并非是傳染性單核細胞增多癥所特有，同時它的出現可以提示機體存在免疫功能紊亂。當異型淋巴細胞數量超過5%有臨床意義，＞10%～20%更有臨床診斷價值。本研究中RV腸炎患兒組治療前異型淋巴細胞數量明顯高于健康對照組，差異有統計學意義（P＜0.01），這表明RV腸炎患兒感染RV后異型淋巴細胞增多，有助于早期診斷患兒病毒感染。治療7d后外周血涂片鏡檢檢出異型淋巴細胞30例（60.0%），20例（40.0%）患兒未檢出異型淋巴細胞。這說明有部分患兒隨臨床癥狀減輕或消失則一部分患兒在外周血的異型淋巴細胞消失，但有部分患兒外周血仍能檢測到異型淋巴細胞，檢出異型淋巴細胞的數量較治療前減少，不是所有患兒經治療后異型淋巴細胞馬上消失，而只是隨時間延長，異型淋巴細胞的數量呈遞減的趨勢，其仍在外周血中持續存在一段時間。最終多長時間在外周血異淋完全消失，因部分患者沒有繼續治療沒辦法追蹤，但已能表明治療后復查血常規進行異型淋巴細胞檢測，如果異型淋巴細胞數量減少或消失能證明治療的有效性。

病毒感染可引起腸道及全身免疫狀態紊亂，使患兒出現獲得性免疫功能缺陷[9]。許多研究提到細胞調節的免疫反應可以保護機體免受輪狀病毒感染，但是體液免疫的作用同樣不容忽視[6]。介導體液免疫的重要效應分子是免疫球蛋白，患兒感染RV后，血漿中出現針對RV的特異性IgM、IgA、IgG抗體，患兒體液免疫與非特異性免疫功能都受到影響[10]。目前血清免疫球蛋白IgA、IgM和IgG的檢測是了解體液免疫功能常用的方法。分泌型IgA（SIgA）在腸道局部免疫中有重要作用，它與病毒感染后發病的嚴重程度及疾病的恢復密切相關[11]。當腸道的SIgA分泌減少時，腸道局部黏膜的抵御能力降低。IgG在抗感染中也主要起到中和細菌、病毒、毒素等病原體的作用，因而會消耗IgG水平。血清IgM在人工免疫或病原體感染后最早出現。在IgA缺乏時，IgM可代償性增高，因IgM也含有分泌片，具有SIgA的功能，故血清IgM起升高性保護性反應[12]。小兒免疫系統發育不健全，免疫功能不完善，成為病原體進攻機體的一個重要突破口。因此血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM水平可以反映機體免疫系統的免疫應答狀態。對于輪狀病毒腸炎患兒，高水平的血清IgA、IgM、IgG具有一定的保護作用[13]。本研究中RV腸炎患兒組治療前血清免疫球蛋白IgA、IgM和IgG水平均低于健康對照組，提示該病發生時機體體液免疫功能存在缺陷，與李建軍等[14]報道一致。RV腸炎患兒組治療后血清免疫球蛋白IgA、IgM和IgG水平上升甚至接近正常水平，與治療前比較差異有統計學意義（P＜0.05），與健康對照組比較差異無統計學意義（P＞0.05）。說明RV腸炎患兒體液免疫功能紊亂只是暫時性。符合一般情況下病毒誘導的免疫反應是暫時、自限性的規律[15]。當治療有效時免疫功能能得到有效的提高，減輕臨床癥狀，縮短病程。

目前對RV腸炎尚無特異性有效的治療方法，因此對腸炎患兒治療前后進行異型淋巴細胞計數及免疫球蛋白檢測掌握變化特點有助于對病毒感染的判斷及了解患兒的機體免疫功能狀態，可作為判斷疾病治療有效性和預后的指標，對RV腸炎患兒的治療有指導意義。

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