兩臺國產生化儀器在常規試驗室的精密度性能評價

成景松，朱小莉（陜西省安康市白河縣人民醫院檢驗科 725800）

生化儀器廠家在出廠時提供了檢測系統的分析性能的資料，數據和結論說明檢測系統的分析性能符合臨床要求，才允許出廠。但是，投入到具體的常規實驗室，由于檢測條件的改變，比如溫度、電壓波動、試劑的改變，必須在實驗室的具體條件下，用實驗去證實檢測系統的基本分析性能[1－2]。基于此目的，現將投入運行的兩臺國產生化儀器在常規條件下對其方法性能進行評價，從而評判這些常規項目的服務質量。

1 材料與方法

1.1 檢測儀器 梅州康立AFT－500E電解質分析儀（以下簡稱儀器1）和深圳邁瑞BS－800全自動生化分析儀（以下簡稱儀器2）。

1.1.1 AFT－500E分析項目及使用試劑 分析鉀（K）、鈉（Na）、氯（Cl）、鈣（Ca）4個項目，校準液和質控液為康立公司原裝配套，方法為直接離子選擇性電極法。

1.1.2 BS－800分析項目及使用試劑 檢測總膽紅素（TBIL，采用重氮法）、總蛋白（TP，采用雙縮脲法）、清蛋白（ALB，采用溴甲酚綠法）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT，采用連續監測法）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST，采用連續監測法）、堿性磷酸酶（ALP，采用連續監測法）、γ－谷氨酰基轉移酶（γ－GT，采用γ－谷氨酰4硝基苯胺連續監測法）、尿素（Ure，采用脲酶紫外速率法）、肌酐（Cr，采用苦味酸法）、尿酸（UA，采用尿酸酶紫外法）、糖（GLU，采用氧化酶法）、總膽固醇（TC，采用氧化酶法）、三酰甘油（TG，采用GPO－PAP酶法）、高密度脂蛋白膽固醇（HDLC，直接一步法）、淀粉酶（AMY，采用麥芽七糖苷底物酶法）、肌酸激酶（CK，采用N－乙酰半胱氨酸連續監測法）、乳酸脫氫酶（LDH，采用LDH－L連續監測法）、磷（P，采用磷鉬酸紫外法）18個項目。除AMY、CK試劑分別為浙江伊利康生物技術有限公司和上海科華生物工程股份有限公司提供外，剩下16個項目試劑均為邁瑞公司配套試劑。18個項目用邁瑞復合校準品進行校準。質控品為英國RANDOX人基質定值質控血清。

1.2 方法 所有分析項目按照儀器和試劑原廠家配套說明書設置和操作，用Westgard多規則控制方法進行常規室內質控[3]，并且根據室內質控規則進行重新定值[4]。根據美國臨床和實驗室標準協會（CLSI）發布的EP5－A2（臨床化學設備操作精密度評價標準指南）文件進行實驗操作，每天對穩定的試驗樣品（凍干人血清）測定2次（2次測定時間間隔大于2h），每次測定2遍，共測定20d，取得80個數據，結果剔除離群值[5]，計算批內、批間不精密度標準差（s）。以實驗獲得的批內不精密度分別與廠家聲明的批內不精密度和1／4CLIA′88（美國臨床實驗室改進修正法規室間評估指標）指標比較，以實驗獲得的批間不精密度分別與廠家聲明的批間不精密度和1／3CLIA′88指標比較，并且作χ2檢驗，判斷可接受性。

2 結 果

22個常規生化項目中，（1）批內精密度：P不能接受廠家聲明的批內精密度性能和CLIA′88固定限指標的1／4，5個項目即Na、TC、GLU、Ure、ALB不能接受CLIA′88固定限指標的1／4。（2）批間精密度：ALT不能接受廠家聲明的批間精密度性能，3個項目即Cl、Na、Ure不能接受CLIA′88固定限指標的1／3。結果見表1。

表1 不精密度試驗結果及廠家聲明不精密度和CLIA′88指標

續表1 不精密度試驗結果及廠家聲明不精密度和CLIA′88指標

3 討 論

3.1 按照CLSI出版的EP5－A2文件評價實驗室現用方法的精密度，可準確、客觀的得出各項目批內、批間、天間和總不精密度，為了簡單起見，按文獻介紹，可按EP5－A2文件進行實驗，然后直接對所有數據作均值和標準差的統計，求出批間的變異（即總不精密度）[6]。著名的Westgard和Ceroblewski等提出高效檢驗對精密度要求的觀點，從中引出批內不精密度CV應是CLIA指標的1／4，批間不精密度CV應是CLIA指標的1／3，做法簡單、明確。所以從20世紀90年代起，國際上推薦使用總不精密度，并且為了更好地檢出不穩定的誤差，已明確提出檢測系統的批內標準差s應為美國的臨床實驗室室間質量評估允許誤差（TE，允許總誤差）即CLIA′88的1／4，批間標準差s應為該允許誤差的1／3。1／4允許誤差范圍為批內不精密度判斷限，1／3允許誤差范圍為批間不精密度判斷限，小于或等于判斷限的，檢測系統的不精密度屬可接受；大于判斷限的表示不精密度不符合要求。達到這樣要求的檢測系統，可認為它的隨機誤差屬于可接受的低水平[7－8]。

3.2 與廠家聲明的精密度性能指標比較，在常規條件下，只有P不能接受廠家聲明的批內精密度性能，ALT不能接受廠家聲明的批間精密度性能，說明儀器1和儀器2聲明的精密度性能大部分是符合常規條件下的，P和ALT不能接受可能廠家是在最佳條件下做出的性能指標或者廠家當時標本的決定性水平和本實驗室不同。

根據相關要求，在實際工作中，給定的分析方法的允許總誤差必須小于分析物CLIA固定界限，批內不精密度應是CLIA固定限的1／4，并且將批間不精密度降低到1／3的CLIA固定限目標[6－7]。根據以上實驗結果，其中儀器1的Na項目批內、批間不精密度都超過了CLIA′88固定限的相應指標，Cl項目的批間不精密度超過了CLIA′88固定限的1／3；儀器2的Ure項目批內、批間不精密度都超過了CLIA′88固定限的相應指標，另外有4個項目（P、TC、GLU、ALB）批內不精密度超過了CLIA′88固定限的1／4。

3.3 廠家聲明的精密度性能與CLIA固定限的相應指標相比，除P和ALT以外，其余項目全部能接受，說明部分國產儀器和試劑雖然聲明的精密度性能指標比較真實，但個別指標不夠嚴格，除廠家要嚴格按六西格馬質量管理和要求生產[9]，進一步改善儀器性能外，也建議主管部門制定出更嚴格的標準審批企業的生產。在臨床實驗室常規條件下，除嚴格按廠家說明書維護好儀器外，對于儀器1類型的儀器，因為電氣性能要求高，要改善室內條件，嚴格穩定室內電壓，定期更換電極。而對于儀器2類型的儀器，每天要對試劑針、樣品針、攪拌系統、清洗系統進行擦拭，并且設置好項目測試順序，防止攜帶污染和交叉污染。另外要制訂更高的質量目標，嚴格控制全過程質量，最好優選方法，找到性能更佳的替代方法，如更換試劑廠家等。改進后，要重新評價其方法性能，提高方法可接受性，以保證常規檢驗工作中的質量。

3.4 國家最新發布了行業標準WS－T403－2012（臨床生物化學檢驗常規項目分析質量指標）文件，從2013年8月1日實施。該文件對總誤差、不精密度和偏倚作出了具體規定，明確指出總誤差、不精密度和偏倚指標分別主要用于室間質量評價、室內質量控制管理和正確度驗證。這些指標的制訂是根據檢驗項目的個體內生物學變異和個體間生物學變異同時考慮目前可實現的分析質量水平，所以本次國家發布的質量指標是很科學的。但單純從指標上與CLIA比較，WS－T 403－2012標準更嚴格，例如ALT的WS－T 403－2012總誤差為16%，不精密度CV為6%，而CLIA總誤差為20%，1／3CLIA為6.7%；TP的WS－T 403－2012總誤差為5%，不精密度CV為2%，而CLIA總誤差為10%，1／3CLIA為3.3%。作者從2013年5月起按照WS－T 403－2012標準設定質量目標，進行改進，重新評估這22項常規指標后，所有項目批內、批間精密度已能達到廠家聲明標準和批間不精密度低于CLIA1／3指標，只有個別項目如Ure、Na、Cl批內不精密度尚未低于CLIA1／4指標，只有在以后的工作中更換進口試劑和（或）更換進口儀器后再重新評估。

[1]Centers for Disease Control and Prevention（CDC），Centers for Medicare ＆Medicaid Services（CMS），HHS.Medicare，Medicaid，and CLIA programs；laboratory requirements relating to quality systems and certain personnel qualifications.Final rule[J].Fed Regist，2003，68（16）：3639－3714.

[2]Medicare，Medicaid and CLIA program：Regulations implementing the clinical laboratory improvement amendments of 1988（CLIA）.Final Rule[J].Fed Regist，1992，57（40）：7002－7186.

[3]Westgard JO，Groth T，Aronsson T，et al.Performance characteristics of rules for internal quality control：probabilities for false rejection and error detection[J].Clin Chem，1977，23（10）：1857－1867.

[4]馮仁豐.臨床檢驗質量管理技術基礎[M].2版.上海：上海科學技術文獻出版社，2007：81－98.

[5]CLSI.Evaluation of precision performance of quantitative measurement methods；approved guideline second edition Document EP－5A2[S].Wayne，PA：CLSI，2004.

[6]王治國.臨床檢驗質量控制技術[M].2版.北京：人民衛生出版社，2008：93－114.

[7]葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京：東南大學出版社，2006：66－67.

[8]冼江，孫朝暉，方旭成，等.方法學驗證－常見生化項目參考區間的確認[J].現代檢驗醫學雜志，2011，26（2）：38.

[9]Westgard JO.Six Sigma quality design ＆control[M].Medison WI：Westgard Quality Corporation，2001.