麩炒對盤龍七中巖白菜素含量的影響

馮永輝 譚汗青

（西安醫學院藥學院，西安，710021）

麩炒對盤龍七中巖白菜素含量的影響

馮永輝 譚汗青

（西安醫學院藥學院，西安，710021）

目的：考察盤龍七麩炒前后巖白菜素的含量變化。方法：采用HPLC法測定盤龍七麩炒前后巖白菜素的含量，色譜柱：UltisilTMXB-C18柱（150mm×10mm，5μm）；流動相為甲醇∶水（32∶68）；流速1.0mL/min；柱溫為室溫；檢測波長275 nm。進樣量：20μL。結果：盤龍七麩炒前所測巖白菜素平均含量為16.82 mg/g；盤龍七麩炒后所測巖白菜素的平均含量為22.15 mg/g。結論：麩炒后盤龍七中巖白菜素的含量高于麩炒前的盤龍七，麩炒盤龍七可以提高其治療效果。

麩炒；盤龍七；巖白菜素

盤龍七為虎耳草科植物秦嶺巖白菜（Bergenia scopulosa T.P.Wang）的干燥根莖［1］，為陜西地區民間用藥，主要分布于秦嶺太白山、柞水、長安太平峪等地方，廣泛用于脾胃病。其味甘、微澀。性平。歸肺、脾、肝、膀胱經。功能補脾益胃，收澀固腸，除濕利水，活血，用于脘腹脹痛，水腫，崩漏，白帶，淋癥，痢疾，黃水瘡，禿瘡，疥癬［2-4］。盤龍七主要有效成分為巖白菜素，巖白菜素具止咳作用，已有藥品“巖白菜素”出售［5-6］。巖白菜素口服無毒，對咳嗽中樞有選擇性抑制，具有鎮痛抗炎，提高免疫，抗氧化性的作用［7-8］。筆者研究了不同采收期盤龍七中巖白菜素的含量變化［9］，確定出盤龍七最佳采收期，建立盤龍七中多糖的含量測定方法［10］，同時制定了盤龍七的質量標準，研究中筆者發現盤龍七傳統炮制中采用麩炒法，但關于其麩炒機制尚不明確。查文獻知，迄今為止，尚未有報道麩炒對盤龍七中有效成分巖白菜含量的相關報道，我們采用HPLC法分別測定麩炒盤龍七前后巖白菜素的含量［11-13］，來分析比較麩炒是否對巖白菜素的含量有影響，旨在考察盤龍七麩炒前后巖白菜素的含量變化，進一步闡明麩炒盤龍七的機制。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 安捷倫高1220效液相色譜儀，UV—170紫外檢測器；超聲波儀器清洗儀（型號：KQ5200DE）；十萬分之一電子天平（Q/SYDLKOO5-2012）；純水制備儀（型號：Scienetool R300）。

1.2 試藥 巖白菜素對照品（批號：MUST-12030102生產廠家：北京恒元啟天技術研究院和京世紀奧科生物技術有限公司聯合研制）；盤龍七藥材采自秦嶺太白山，經陜西省食品藥品檢驗所郭耀武主任藥師鑒定為Bergenia scopulosaT.P.Wang的干燥根莖。甲醇（天津市科密歐化學試劑有限公司生產）為色譜純，水為超純水，提取盤龍七所用甲醇為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱：UltisilTMXB-C18柱（150 mm ×10 mm，5μm）；流動相為甲醇：水（32∶68）；流量1.0 m L/min；柱溫為室溫；檢測波長275 nm。樣品及對照品進樣量20μL，理論塔板數不低于4 500。在上述色譜條件下，對照品有較好的峰型；樣品中巖白菜素和其他雜質有較好的分離。見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.2 溶液制備

2.2.1 對照品溶液制備 精密稱取巖白菜素對照品9.00 mg，置50 m L容量瓶中，加甲醇溶解并稀至刻度，搖勻，制成0.18 mg/mL的溶液，作為巖白菜素的對照溶液。

2.2.2 供試品溶液制備

2.2.2.1 生品盤龍七供試品溶液制備 稱取7 g盤龍七，粉碎，過20目篩。精密稱定粉末0.203 2 g，以4倍的甲醇超聲提取30 min，離心（3 000 r/min），取上清液，容至50 m L容量瓶中，作為供試品1。

2.2.2.2 麩炒盤龍七供試品溶液制備 稱取7 g盤龍七，將鐵鍋預熱，均勻撒入麥麩，待起煙，將稱量好的藥材加入其中，不斷攪拌，文火炒10 min，至藥物表面呈黃色至深黃色，出鍋，篩去麥麩，放涼［14］。粉碎，過20目篩。精密稱定麩炒藥材粉末0.205 2 g，以4倍的甲醇超聲提取30 min［15］，離心（3 000 r/min），取上清液，容至50 mL容量瓶中，作為供試品2。

2.3 方法學考察

2.3.1 線性關系 精密量取對照品溶液1，2，3，4，5 m L至10 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，即得。取上述對照品溶液20μL過0.45μm濾膜，按上述色譜條件，分別進樣測定。以濃度為橫坐標（x），峰面積為縱坐標（y）繪制標準曲線，得巖白菜素回歸方程（圖2），表明線性關系良好。

圖2 線性關系圖

2.3.2 精密度試驗 精密量取巖白菜素對照品溶液20μL，重復進樣5次，測得巖白菜素對照品峰面積的RSD為1.6%，表明精密度良好。

2.3.3 穩定性試驗 精密量取麩炒秦嶺巖白菜和生品秦嶺巖白菜供試品溶液，分別在0，2，4，8，12，24 h各進樣20μL，分別測定2組供試品在不同時間段的峰面積的RSD，麩炒品的RSD為0.17%，生品的RSD為0.13%，結果表明，樣品在24 h內穩定性較好。

2.3.4 重復性試驗 精密量取麩炒秦嶺巖白菜和生品秦嶺巖白菜按供試品溶液的制備方法制的溶液，平行操作5次，測得峰面積RSD，麩炒品的RSD為0.18%，生品的RSD為0.12%，結果表明，具有良好的重復性。

2.3.5 加樣回收率試驗 精密量取以測的含量的上述以配好的麩炒秦嶺巖白菜和生品秦嶺巖白菜樣品各3份，分別加入對照品，進行回收率試驗。結果見表1、表2，表明加樣回收率良好。

2.4 結果 樣品含量測定：以色譜峰面積（y）對標準品溶液巖白菜素濃度（x）繪制標準曲線，得回歸方程為：y＝11 503x+88.17，r＝0.998 8，巖白菜素在0.02～0.10 mg/mL之間與吸光度值呈良好的線性關系。精密量取麩炒盤龍七和生品盤龍七供試品溶液，各分3組，分別進樣20μL，經計算得，麩炒盤龍七中巖白菜素的平均含量為22.15 mg/g，生品盤龍七中巖白菜素的平均含量為16.82 mg/g。結果表明，麩炒后盤龍七中巖白菜素的含量高于麩炒前的盤龍七。

表1 麩炒盤龍七加樣回收率試驗（n＝3）

表2 生品盤龍七加樣回收率試驗（n＝3）

3 討論

3.1 檢測波長的選擇 查閱文獻，巖白菜素的檢測波長在275 nm處有最大吸收峰［16］，經對巖白素在UV200～400 nm掃描，發現巖白菜素在275 nm處有最大吸收峰，故選擇275 nm作為檢測波長。

3.2 超聲提取時間的選擇 本實驗分別考察了在超聲20、30、40、60 min的提取率，結果在20 min提取率不完全，在30、40、60 min提取率所測值基本一致。故選擇超聲提取30 min。

3.3 麩炒盤龍七后巖白菜素含量提高的原因分析巖白菜素，沸點236～238℃，從理論上講麩炒不會影響巖白菜素的提取率，但實驗結果表明麩炒盤龍七后巖白菜素含量提高，其原因可能是：1）麩炒后盤龍七藥材水分含量降低，可能導致巖白菜素含量偏高；2）麩炒后可能破壞盤龍七細胞壁，從而影響其多糖成分、揮發油等化學成分發生變化，從而可能改變巖白菜素的提取率，導致麩炒后所測盤龍七中巖白菜素含量偏高［17］。關于傳統炮制方法采用麩炒法炮制盤龍七的機制還有待于進一步深入研究。

4 結論

麩炒后盤龍七中巖白菜素的含量高于麩炒前的盤龍七，麩炒盤龍七可以提高其治療效果。本文通過HPLC法對盤龍七麩炒前后巖白菜素的含量進行對比測定，結果發現麩炒后盤龍七中巖白菜素的含量相對較高，因而麩炒盤龍七后可以提高其治療效果。

盤龍七功能補脾益胃，收澀固腸，民間廣泛使用于脾胃病。傳統認為，麩炒能夠緩和藥性，能夠增強藥物健脾和中的功能［18］。酚羥基化合物可以清除自由基，其主要機制是酚羥基與自由基反應形成穩定半酮式自由基結構終止自由基鏈式反應［19］。盤龍七主要有效成分巖白菜素是多酚類化合物，含有較多的酚羥基化合物，因而具有獨特的藥理活性。麩炒盤龍七后提高了巖白菜素的含量即提高了多酚類化合物，因而提高了盤龍七清除自由基的效果，從而提高其治療效果。

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（2014-07-10收稿 責任編輯：洪志強）

Effects of Stir Fried Bran on Bergenin Content in Rhizom a Bergeniae Scopulosae

Feng Yonghui，Tan Hanqing
（School of Pharmaceutical Sciences，Xi'an Medical University，Xi'an 710021，China）

Objective：To study the content changesofbergenin in Rhizoma Bergeniae Scopulosae before and after stir-bakingwith bran.Methods：Bergenin content in Rhizoma Bergeniae Scopulosae was determined by HPLC.Chromatographic column：UltisilTM XB-C18column（150 mm×10 mm，5μm）；moving phase：takingmoving phase as carbinol to nater（32∶68）；flow velocity：taking flow velocity as 1.0ml/min；column temperature：taking colum temperature as room tomperature；determinewavelength was 275nm；sample sizewas20 μl.Results：Bergenin content in Rhizoma Bergeniae Scopulosae before stir-baking with bran was 16.82 mg/g，and after bran fried was 22.15 mg/g.Conclusion：Bergenin content in Rhizoma Bergeniae Scopulosae after stir-baking with bran is higher than before.So we can see that stir-baking with bran can increase therapeutic effect of Rhizoma Bergeniae Scopulosae.

Bran Fried；Rhizoma Bergeniae Scopulosae；Bergenin

R284

A

10.3969/j.issn.1673-7202.2014.10.031

陜西省自然科學基金資助項目（編號：2010JM3014）；陜西省食品藥品監督管理局資助項目（陜西省中藥材標準2010-86）

馮永輝，男，陜西韓城人，西安醫學院副教授，從事天然藥物學研究，Tel：（029）86177539，E-mail：f20048858＠126.com