部分血小板參數缺失時小紅細胞/裂紅細胞對XS1000i血細胞分析儀血小板計數的影響

鐘青,許業棟,吳永國,劉文毅,肖靜,胡國剛

(松崗人民醫院檢驗科,廣東深圳518105)

部分血小板參數缺失時小紅細胞/裂紅細胞對XS1000i血細胞分析儀血小板計數的影響

鐘青,許業棟,吳永國,劉文毅,肖靜,胡國剛

(松崗人民醫院檢驗科,廣東深圳518105)

目的探討XS1000i血細胞分析儀部分血小板參數缺失時小紅細胞/裂紅細胞對血小板計數的影響.方法對XS1000i血細胞分析儀分析后MCV<80fl且部分血小板參數缺失的標本再使用PENTRA120Retic血細胞分析儀計數血小板、顯微鏡計數血小板及瑞氏染色鏡檢.結果PLT>100X109/L時,XS1000i與PENTRA120Retic、顯微鏡計數血小板的差異有統計學意義(P<0.01),PLT<100X109/L時,XS1000i與PENTRA120Retic、顯微鏡計數血小板的結果差異無統計學意義(P>0.01);當MCV分別為70~80fl,60~70fl,<60fl時,XS1000i均高于顯微鏡計數血小板的結果,差異有統計學意義(P<0.01).顯微鏡檢查結果發現:101例標本均檢出小紅細胞或(和)裂紅細胞,其中60例伴有大血小板或(和)巨血小板,4例伴有大血小板和血小板聚集.結論對于電阻抗血細胞分析儀,當MCV<80fl且部分血小板參數缺失時的標本應用顯微鏡或ICSH推薦的參考方法計數血小板,同時染色鏡檢異常血細胞的形態、數量及分布.

血液分析儀;血小板計數;小紅細胞;裂紅細胞;血小板參數

XS-1000i血細胞分析儀是Sysmex公司開發的一款體積最小的機型,可檢測WBC,RBC,HGB, HCT,MCV,MCH,MCHC,PLT,NEUT%,LYMPH%, MONO%,EO%,BASO%,NEUT#,LYMPH#,MONO#, EO#,BASO#,RDW-SD,RDW-CV,PDW,MPV,PCT,PLCR24個參數,還提供IG%,IG#2個研究參數,以及紅細胞直方圖、血小板直方圖、白細胞分類散點圖,極大地滿足了各種規模的醫院對臨床標本檢測的需求.在實際運用過程中,經常遇到某些血液疾病如地中海貧血、缺鐵性貧血及某些慢性病貧血等標本中的部分血小板參數如PDW(血小板體積分布寬度)、MPV(平均血小板體積)、PCT(血小板比容)、P-LCR(大型血小板比率)的檢測結果為"----",且血小板直方圖異常(如圖1,2),這給臨床疾病的診療和檢驗報告的規范帶來諸多不利[1].筆者使用多種方法對該類標本的血小板進行檢測,包括XS1000i、PENTRA120Retic、顯微鏡計數法、瑞氏染色鏡檢等,現將檢測結果報告如下.

圖1 血小板直方圖

圖2 血小板直方圖

1 材料與方法

1.1 儀器XS-1000i全自動血液分析儀,由sysmex公司生產;PENTRA120Retic全自動血液分析儀,由HORIBA公司生產;Olympus-CX31顯微鏡,由Olympus公司生產;血球計數板,上海市求精生化試劑儀器有限公司生產.

1.2 試劑XS-1000i血細胞分析儀原裝配套試劑及質控品,PENTRA120Retic血細胞分析儀原裝配套試劑及質控品,EDTA-K2抗凝管由廣州陽普醫療科技股份有限公司提供,瑞氏染液由珠海BASO公司提供,血小板計數稀釋液(1%草酸銨稀釋液)按照《中華醫學檢驗全書》[2]進行配制.

1.3 標本來源來自于2011年4月18日至2011年5月12日就診的門診及住院病人的靜脈血(n= 101),嚴格按照儀器原始操作手冊和《全國臨床檢驗操作規程》[3]進行真空采血管采集,標本采集后顛倒混勻10次,肉眼可見標本適量、無凝固、無凝塊、無溶血.

1.4 方法

1.4.1 嚴格按照血細胞分析儀的要求定期對XS-1000i血液分析儀、PENTRA120Retic血液分析儀進行校準,每天儀器開機后進行質控檢測,在各校準參數和質控參數均符合相關標準后,再對各標本進行自動檢測.

1.4.2 采集的靜脈血先用XS1000i血細胞分析儀進行自動檢測,根據檢測結果,對MCV<80fl且無MPV、PCT、PDW、P-LCR參數的標本先用PENTRA120Retic血液分析儀進行自動檢測,然后用顯微鏡計數法計數血小板,同時進行血涂片制備和染色,標本采集后在4小時內完成以上檢測.

1.4.3 經嚴格培訓且有理論、實踐經驗的檢驗人員進行細胞形態學檢查選擇理想的區域進行鏡檢(理想紅細胞分布區域是紅細胞之間相近排列而不重疊),用油鏡觀察血膜體尾交界處的細胞形態[4].小紅細胞/裂紅細胞>2%有診斷價值[5](注:小紅細胞:直徑小于6μm,大血小板:直徑5~7.5μm,巨血小板:直徑大于7.5μm[6].)

1.5 分組

1.5.1 按XS1000i血細胞分析儀血小板的檢測結果分為高、低2組,高值組(n=98):PLT>100X109/L,低值組(n=3):PLT<100X109/L;

1.5.2 按XS1000i血細胞分析儀MCV的檢測結果分為3組:(a)MCV:70~80fl,n=21,(b)MCV:60~70fl, n=59,(c)MCV:<60fl,n=21

1.6 統計:使用SPSS Statistics 17.0統計軟件進行統計,進行配對樣本t檢驗,數據以均值±標準差()表示,P<0.01表示差異有統計學意義.

2 結果

2.1 XS1000i與顯微鏡計數法對血小板計數結果的比較,XS1000i與PENTRA120Retic對血小板計數結果的比較分別見表1和表2.從表1可以看到,高值組XS1000i比顯微鏡計數法的結果要偏高,相關系數為0.749,P=0.000,差異有統計學意義,而低值組XS1000i與顯微鏡計數法檢測的PLT結果接近,相關系數為0.988,P=0.099,差異無統計學意義,可能與標本量(n=3)過少有關.

表1 XS1000i與顯微鏡計數法血小板計數結果的比較

表2 XS1000i與PENTRA120Retic血小板計數結果的比較

從表2可以看到,高值組XS1000i比PENTRA120Retic的結果偏高,相關系數為0.858,P= 0.000,差異有統計學意義,而低值組XS1000i與PENTRA120Retic檢測的PLT結果相近,相關系數為0.962,P=0.176,差異無統計學意義,也可能與標本量(n=3)過少有關.

2.2 XS1000i與顯微鏡計數法對MCV不同標本的血小板計數結果比較見表3.從表3可以看到,各組的血小板檢測結果均是XS1000i比顯微鏡計數法高,P值均<0.01,差異有統計學意義.

表3 XS1000i與顯微鏡計數法對MCV不同標本的血小板計數結果比較

2.3 顯微鏡檢查結果101例標本均檢出小紅細胞或(和)裂紅細胞,其中60例伴有大血小板或(和)巨大血小板(如圖3),4例伴有大血小板和血小板聚集,其余37例標本未見血小板異常.

圖3 外周血裂紅細胞、大血小板和巨血小板形態(X1000)

3 討論

XS1000i血細胞分析儀是利用流體聚焦法分析紅細胞和血小板計數,使用3個界標(2~6fl,12fl, 12~30fl)檢測血小板的顆粒大小分布,改善了血細胞計數的精確度和重現性,防止產生假性血小板脈沖.但出現小于30fl的小紅細胞或細胞碎片時,這些小紅細胞和碎片會當成血小板計數,導致血小板假性偏高.

小紅細胞(MCV<80fl)一般出現在缺鐵性貧血、鐵粒幼細胞貧血、血紅蛋白病(如:珠蛋白合成障礙性貧血)、遺傳性球形細胞增高癥及慢性疾病所引起的貧血中,而這些增生性貧血易出現紅細胞碎片,因此極易干擾PLT的檢測[7].一般裂紅細胞增多見于微血管病性溶血性貧血、血栓性血小板減少性紫癜、溶血尿毒癥綜合征、惡性高血壓、創傷性心血管性溶血性貧血等[8].

從表1和表2可以看出,當血小板減少時,兩臺血細胞分析儀之間以及血細胞分析儀與顯微鏡計數法計數血小板的差異無統計學意義(P>0.01),相關系數分別是0.962、0.988,顯示了良好的相關性,小紅細胞/裂紅細胞對血小板計數無明顯影響,可能與本次檢測標本量過少有關.Trabuio等使用多種方法對原發性血小板減少性紫癜的血小板計數(PLT<20X109/L)進行比較顯示了良好的相關性[9],與本文結果一致.當血小板>100X109/L時,兩臺血細胞分析儀之間以及血細胞分析儀與顯微鏡計數法計數血小板的相關系數分別是0.858、0.749,P值均為0.000(P<0.01),差異有統計學意義,小紅細胞、裂紅細胞等對血小板計數有明顯的影響.

從表3可以看到,各組的血小板檢測結果均是XS1000i比顯微鏡計數法高,P<0.01,,差異有統計學意義,與梁瑞蓮[10]季明德[11]、張霞等[12]的研究結果一致.所有101例標本經顯微鏡涂片檢查均檢出小紅細胞或(和)裂紅細胞,部分標本還伴有大血小板/巨血小板/血小板聚集現象等等.因此在使用阻抗法檢測血小板/紅細胞的血細胞分析儀如XS1000i、PENTRA120Retic時,若部分血小板參數缺失,應注意紅細胞碎片、有核細胞的細胞質碎片、冷球蛋白、細菌、真菌、油脂等[13]的脈沖信號可能視為血小板信號而干擾實驗結果,造成實驗誤差,導致血小板的假性升高[14,15],這時要進行顯微鏡計數法計數血小板或使用ICSH推薦的參考方法計數血小板,同時進行血涂片檢查并在檢驗報告單上注明異常細胞的形態、數量和分布等等.

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Effect of microcytes/schistocytes on platelet count when deficiency of portion platelet parameters measured by XS1000i Hematology analyzer

ZHONG Qing,XU Yedong,WU Yongguo,et al.Department of Laboratory Medicine,Songgang People's Hospital,Shenzhen Guangdong 518105,China

ObjectiveTo investigate the effect of microcytes/schistocytes on platelet count when deficiency of portion platelet parameters measured by XS1000i hematology analyzer.MethodsAfter analyzed by XS1000i hematology analyzer,the samples which have MCV<80fl and loss partial platelet parameters were re-measured with the PENTRA120Retic hematology analyzer,microscopic platelet count and,Wright staining for platelets.ResultsWhen PLT>100X109/L,there were statistically significant differences in the platelet counts among XS1000i,PENTRA120Retic and microscopic counting(P<0.01);when PLT<100X109/L,there were no statistically significant differences in the platelet counts among XS1000i PENTRA120Retic and microscopic counting(P> 0.01).When MCV was 70~80fl,60~70fl and<60fl,respectively,the platelet counts of XS1000i were higher than those of microscopic counting,the difference was statistically significant(P<0.01).The results of microscope examination were as follows:all 101 specimens were detected and had microcytes or(and)schistocytes,of which 60 cases were accompanied with large platelets and/or giant platelets,and 4 cases were accompanied with large platelets and platelet aggregation.ConclusionsThe samples with MCV< 80fl and missing partial platelet parameters when analyzed by impedance hematology analyzer should be re-measured with the reference method recommended by ICSH or microscopic platelet counting,meanwhile,detect the morphology,number and distribution of abnormal blood cells by staining and microscopic examination.

Hematology analyzer;Platelet count;Microcyte;Schistocyte;Platelet parameters

R446.11+1

A

1674-1129(2014)03-0264-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.03.011

2013-10-29;

2014-2-25)

鐘青,女,1970年出生,主管技師,主要研究方向為臨床血液學.

許業棟,男,1967年出生,副主任技師.