血清CysC和U-mAlb/Cr及Hcy在狼瘡性微小腎損傷早期診斷中的價值

傅林金,金容香,袁海瓊

(景德鎮市第三人民醫院檢驗科,江西景德鎮333001)

血清CysC和U-mAlb/Cr及Hcy在狼瘡性微小腎損傷早期診斷中的價值

傅林金,金容香,袁海瓊

(景德鎮市第三人民醫院檢驗科,江西景德鎮333001)

目的探討血清胱抑素C(CysC)、尿微量白蛋白/肌酐比值(U-mAlb/Cr)以及同型半胱氨酸(Hcy)的檢測在系統性紅斑狼瘡微小腎損傷診斷中的價值.方法隨機選取我院健康體檢者100例作為對照組;狼瘡性腎炎患者70例,根據內生肌酐清除率(Ccr)所在范圍按試劑說明書將患者腎功能狀態的不同分為4個小組.A組(30例):Ccr>70ml/min;B組(20例):Ccr在51~70ml/min,腎功能輕度損傷;C組(12例):Ccr在31~50ml/min,腎功能中度損害;D組(8例):Ccr<30mL/min,腎功能重度損害.血清CysC的檢測采用顆粒增強透射免疫比濁法;Hcy檢測采用循環酶法,U-mAlb檢測采用免疫比濁法,尿素氮(BUN)的檢測采用酶偶聯速率法:血清(尿)肌酐的檢測采用堿性苦味酸法.結果A組CysC、U-mAlb/Cr比值和Hcy的異常率分別為33.3%、30.0%、26.7%,A組、B組、C組及D組4組依次三者異常率逐步升高,血清CysC+U-mAlb/Cr+Hcy聯合檢測在A組30例病人中,有15例升高,異常率為50%.CysC、U-mAlb/Cr比值和HcyROC曲線下面積分別為0.935、0.928、0.906;BUN和CrROC曲線下面積分別為0.695和0.679,前三者和后兩者檢測分別比較,P<0.05,差異均有統計學意義.結論CysC、U-mAlb/Cr比值和Hcy的檢測,結合其他檢查和臨床表現,能檢出早期狼瘡腎炎微小腎損傷的病例,是反應早期狼瘡腎炎腎功能微小腎損害的敏感性指標,在狼瘡腎炎早期診斷中具有一定的應用價值.

血清胱抑素C;尿微量白蛋白/肌酐比值;同型半胱氨酸;狼瘡性腎炎

1 材料與方法

1.1 一般資料2012年1月年-2013年8月我院門診及住院狼瘡性腎炎系統性紅斑狼瘡(SLE)患者70例,男32例,女38例,年齡23~66歲,平均年齡38歲.100例對照組為我院健康體檢者,男35例,女65例,年齡21~69歲,平均年齡41歲.所有入選人員均排除高血壓、糖尿病及其他自身免疫性疾病.根據內生肌酐清除率(Ccr)所在范圍按試劑說明書將患者腎功能狀態的不同分為4個小組.A組(30例):Ccr>70ml/min;B組(20例):Ccr在51~70ml/ min,腎功能輕度損傷;C組(12例):Ccr在31~50ml/ min,腎功能中度損害;D組(8例):Ccr<30mL/min,腎功能重度損害.血清(尿)肌酐的測定采用堿性苦味酸法.通過測定血和尿肌酐含量計算每分鐘或24h有多少毫升或升血漿中的肌酐通過腎被清除,此值為內生肌酐清除率(Ccr)測定.Ccr與個體的大小有關,可用體表面積來矯正.Ccr(L/24h)=尿中肌酐÷血中肌酐X24h尿量(L),Ccr(ml/min)=Ccr(L/24h)X 1000÷1440,矯正后Ccr(ml/min)=矯正前CcrX1.73÷體表面積(m2).

1.2 方法血清CysC的測定采用顆粒增強透射免疫比濁法;同型半胱氨酸檢測采用循環酶法,尿素氮的測定采用酶偶聯速率法,血清(尿)肌酐的測定采用堿性苦味酸法,通過美國貝克曼DxC600全自動生化分析儀檢測.尿微量白蛋白采用免疫比濁法,通過美國貝克曼IMMAGE800全自動免疫分析儀自動檢出.所有原裝美國進口試劑均由江西江東公司提供.

1.3 診斷敏感性和準確性分析以各指標的正常參考值上限即血清CysC為1.5mg/L、U-mAlb/Cr為20mg/g、Hcy為15μmol/L、BUN為7.14mmol/L和Cr為133μmol/L為診斷閾值,高于此值為異常.采用ROC曲線分析對各指標用于SLE腎功能損害診斷的準確性進行評估.

1.4 統計學處理全部數據來源于本科室生化免疫報告分析系統,采用SPSS16.0統計分析軟件進行數據分析,計量數據以均數±標準差表示,組內各指標檢測結果經正態性檢驗和方差齊性檢驗, P<0.05,差異有統計學意義.文中異常率采用卡方檢驗比較,P<0.05,差異有統計學意義.組間兩兩比較采用單因素方差分析,P<0.05,差異有統計學意義;不同指標間相關性分析采用Pearson相關分析,P<0.01,相關系數有高度顯著性,即兩變量存在相關關系.

2 結果

2.1 各組血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy、BUN及Cr的測定比較結果見表1.

表1 各組間血清CysC、U-mAlb/Cr)、Hcy、BUN及Cr水平比較

表1 各組間血清CysC、U-mAlb/Cr)、Hcy、BUN及Cr水平比較

注:A:P<0.05,與對照組比較;B:P<0.05,與A組比較;C:P<0.05,與B組比較;D:P<0.05,與C組比較.

組別例數血清CysC(mg/L)U-mAlb/Cr(mg/g)Hcy(μmol/L)BUN(mmol/L)Cr(μmol/L)對照組A組B組C組D組100 30 20 12 8 0.82±0.33 1.49±0.35A1.72±0.83B2.56±1.25C4.98±1.82D12.67±6.23 26.39±11.82 43.57±26.64B136.98±31.76C223.26±55.06D11.16±2.83 14.25±4.96 19.33±8.66B23.69±11.63C30.38±13.36D5.69±0.95 5.69±0.96 7.53±1.26B12.82±8.35C18.62±13.98D72.59±10.16 71.36±10.23 119.67±35.93B142.96±72.35C493.83±112.52D

2.2 血清CysC+U-mAlb/Cr+Hcy聯合檢測在A組30例病人中,有15例升高,異常率為50%,與血清CysC、U-mAlb/Cr和Hcy分別在A中組中異常率為33.3%、30%和26.7%比較,P<0.05.其他各組各指標異常率見表2.

表2 血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy、BUN及Cr異常率%[n(%)]

2.3 ROC曲線分析血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy ROC曲線下面積分別為0.935、0.928、0.906;BUN和Cr的ROC曲線下面積分別為0.695和0.679,前三者和后兩者檢測分別比較,P<0.05,差異均有統計學意義.ROC曲線見圖1,其中系列1為血清CysC,系列2為U-mAlb/Cr,系列3為HCY,系列4為BUN,系列5為Cr.

圖1 Roc曲線

2.4 各組間相關性分析血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy與BUN的檢測結果(相關系數r分別為0.82、0.86、0.79,P<0.01)均呈正相關;血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy與Cr的檢測結果(相關系數r分別為0.91、0.95、0.88,P<0.01)均呈正相關.Ccr分別與血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy、BUN、Cr的檢測結果(相關系數r分別為-0.83、-0.85、-0.79、-0.71、-0.75, P<0.01)均呈負相關.

3 討論

系統性紅斑狼瘡(SLE)患者約有35%~90%累及腎臟,狼瘡性腎炎(LN)是繼發性腎臟疾病中最常見的疾病,特別是在女性繼發性腎小球疾病中占較重要地位.LN表現為高發病率和高病死率,其5年生存率比較低[1].早期發現SLE的腎臟微小改變并使用大劑量激素治療,可逆轉腎臟的病理進程并延長患者的生存率.因此,對LN的早期檢測和診斷尤為重要[1].目前,臨床常用的反映腎小球功能的指標是血清尿素氮(BUN)和血清肌酐(Cr).BUN首先被作為腎功能的評價指標,但它不符合內源性腎小球濾過率(GFR)標志物的要求,當GFR減少到正常值的40%以前,BUN水平升高緩慢,并且與外源性(來源于蛋白質攝入)及內源性(來源于感染、腎上腺皮質激素的應用、胃腸出血等)的尿素負荷大小有關,更重要的是腎小管對BUN有明顯的被動重吸收作用.肌酐基本符合內源性GFR標志物的要求,目前國內外用血清肌酐(Cr)作為臨床常規評估腎小球濾過功能受損的指標.但只有當GFR下降1/3~1/2時,Cr才有明顯變化,而且受性別、飲食、肌肉量等因素的影響,所以BUN和肌酐只能反映中、重度的腎功能損害.

血清胱抑素C(CysC)來反映GFR,較Cr能更早期、特異地反映腎功能的改變[2].血清胱抑素c (CysC)是一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑,也被稱為γ-微量蛋白或γ-后球蛋白,廣泛存在于各種組織的有核細胞和體液中,是一種相對分子質量低,堿性非糖基化蛋白質,相對分子質量為13.3X103,由122個氨基酸殘基組成,可由機體所有有核細胞產生,產生率恒定.其等電點高(pI=9.3),在血液環境中帶正電荷,故不受腎小球濾過膜的孔徑屏障和電荷屏障的影響,可自由通過腎小球濾過膜而被清除,是一種反映GFR變化的內源性標志物,并在近曲小管重吸收,但重吸收后被完全代謝分解,不返回血液.因此,其在血液中的水平由腎小球濾過決定,而不依賴任何外來因素,如性別、年齡、飲食的影響,是一種反映GFR變化的理想同源性標志物[1].

尿微量白蛋白(U-mAlb)分子量為60KD,正常情況下不能通過腎小球濾過率膜,尿中很少,當腎小球損傷時,腎小球對蛋白質濾過屏障分子篩作用被破壞,腎小球濾過膜上負電荷減少,腎小球電荷屏障、機械屏障受損,使尿微量白蛋白濾出,提示U-mAlb是腎小球早期損傷敏感的指標[3].由于肌酐經腎小球濾過后不被腎小管重吸收,在正常情況下或腎臟疾病初期肌酐排出量基本保持恒定,U-mAlb和尿Cr排出量影響因素相同,在人體中U-mAlb/Cr比值保持相對恒定,U-mAlb/Cr比值能更準確發現早期腎損害[4].早期腎損傷,腎小球微血管發生病變,由于mAlb非常敏感,升高明顯,而Cr的敏感性較差,升高不明顯,U-mAlb/Cr比值會升高,隨著腎臟損害程度加重,mAlb升高更加明顯,U-mAlb/Cr比值會進一步加大.

Hcy是蛋氨酸生成半胱氨酸過程中的中間代謝產物,損傷內皮細胞是其重要機制,Hcy能損傷血管內皮細胞并引起結構類似于血管平滑肌的系膜細胞的增生,促進腎小球電荷屏障、機械屏障受損以及囊內壓升高,使白蛋白漏出增加,血液Hcy濃度升高可作為腎損害的標志物[5].腎臟在Hcy的代謝中起重要作用,人體每日產生Hcy15~20μmol/ L,僅有1.5μmol/L或更少的Hcy釋放入血,經腎臟可清除血漿中2/3的Hcy,腎臟損害時,Hcy排泄、代謝障礙,導致高Hcy血癥[6].

本文研究結果顯示,A組血清CysC、U-mAlb/ Cr、Hcy異常率分別為33.3%、30.0%、26.7%,BUN和Cr異常率都是0.0%,即當BUN和Cr還在正常值范圍時,血清CysC U-mAlb/Cr、Hcy分別有33.3%、30.0%、26.7%的患者發生了變化(超過正常范圍),說明在沒有采用血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy測定腎功能之前,分別會有約33.3%、30.0%、26.7%的患者發生漏診.錯過患者治療的最佳時機,是造成LN病情惡化的主要原因.血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy聯合檢測的臨床應用在很大程度上可以解決這個問題.U-mAlb/Cr、Hcy檢測的ROC曲線下面積分別為0.935、0.928、0.906;BUN和Cr檢測的ROC曲線下面積分別為0.695和0.679,前三者和后兩者檢測分別比較,P<0.05,差異均有統計學意義.顯示CysC、U-mAlb/Cr、Hcy對狼瘡性腎炎(LN)早期診斷有很高的敏感性和特異性.血清CysC+U-mAlb/Cr+Hcy聯合檢測在A組30例病人中,有15例升高,異常率為50%,血清CysC、U-mAlb/Cr和Hcy在A中組異常率分別為33.3%、30%和26.7%,P<0.05,差異均有統計學意義.顯示三者聯合檢測比各自單獨檢測診斷早期LN更敏感.并且隨著Ccr逐漸降低,血清CysC、U-mAlb/Cr、Hcy逐漸升高,因此,這三者的聯合檢測可以作為診斷早期LN及LN病情進展和治療效果動態監測的重要指標.

總之,血清CysC、U-mAlb/Cr和Hcy的聯合檢測有助于準確、快速地發現早期狼瘡性腎炎患者腎功能微小損傷,血清CysC、U-mAlb/Cr和Hcy的聯合檢測在臨床普及應用,對狼瘡性腎炎患者早期診斷具有重要價值.

[1]宋志偉,王丹,袁景芳,等.血清胱抑素C檢測在狼瘡性微小腎損傷早期診斷中的價值[J].國際檢驗醫學雜志,2013,34(15):1339-1340.

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[3]郝建軍.胱抑素C、尿微量白蛋白、脂蛋白(a)在糖尿病早期腎損害診斷中的應用價值評估[J].實驗與檢驗醫學,2011,29(2):172

[4]楊忠臣.聯合檢測血清胱抑素C、糖化血紅蛋白和尿微量白蛋白/肌酐在2型糖尿病早期腎損傷診斷價值[J].實驗與檢驗醫學, 2013,31(3):262.

[5]盧敏,胡志堅,江永青,等.2型糖尿病HbA1c、Hcy、CysC與腎臟微血管病變的關系[J].實驗與檢驗醫學,2010,28(1):52,62.

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R446.11+2,R593.24+2

A

1674-1129(2014)03-0312-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.03.030

2013-11-19;

2014-02-25)