色譜樣品的制備方法

摘要：本文根據(jù)色譜樣品制備技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)，通過對(duì)色譜樣品制備方法的簡(jiǎn)要介紹，提出了色譜樣品制備的注意事項(xiàng)，從而達(dá)到更好地完成色譜分析工作的目標(biāo)。

關(guān)鍵詞：色譜；樣品；制備方法

中圖分類號(hào)：O657.75 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A 文章編號(hào)： 1674-0432（2014）-02-22-1

環(huán)境污染物在食品成分中的存在，有自然背景和人類活動(dòng)影響兩方面的原因。其中，無(wú)機(jī)環(huán)境污染物在一定程度上受食品產(chǎn)地的地質(zhì)地理?xiàng)l件所左右，更為普遍的污染源主要是工業(yè)、采礦、能源、交通、城市排污及農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等帶來的，通過環(huán)境及食物鏈而危及人類飲食健康。這就需要一種或幾種特殊的樣品前處理方法把污染物質(zhì)從農(nóng)產(chǎn)品中提取出來。

1 色譜分析法概述

色譜分析方法作為一種分離技術(shù)與方法，目前廣泛地應(yīng)用于環(huán)境保護(hù)監(jiān)測(cè)、生物樣品分析、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)、食品分析、香料組成分析、農(nóng)藥與農(nóng)藥殘留分析等領(lǐng)域。色譜分析方法主要包括氣相色譜、液相色譜（包括離子色譜）、平面色譜及相關(guān)的聯(lián)用技術(shù)。如：氣相色譜—質(zhì)譜、液相色譜—質(zhì)譜、色譜—紅外光譜等的聯(lián)用分析技術(shù)。色譜分析方法具有分離效率高、成本低、易于與其他儀器裝置聯(lián)用等特點(diǎn)。

2 色譜樣品的制備方法

色譜樣品制備技術(shù)是隨著分離科學(xué)的發(fā)展而發(fā)展的，目前主要使用膜分離、固相萃取、吸附—熱解吸等新方法來分離預(yù)測(cè)定組分和干擾組分。

2.1 溶劑萃取方法

溶劑萃取法是利用有機(jī)溶劑將樣品中的有機(jī)毒物如農(nóng)藥、真菌毒素等提取出來加以純化、濃縮供檢測(cè)用的一種分離方法，通常也叫液—液萃取。常用于樣品中被測(cè)物質(zhì)與基質(zhì)分離，在兩種不相溶液體互相之間通過分配對(duì)樣品進(jìn)行分離而達(dá)到被測(cè)物質(zhì)純化和消除干擾物質(zhì)的目的。通常，分析化學(xué)家首先在有機(jī)溶劑中分離出感興趣的被測(cè)物質(zhì)，然后，由于常用的溶劑具有較高的蒸氣壓，可以通過蒸發(fā)的方法將溶劑除去，以便濃縮這些被測(cè)物質(zhì)的目的。

2.2 固相萃取方法

固相萃取方法廣泛被應(yīng)用于樣品處理中，主要用來對(duì)即將進(jìn)行分析的樣品進(jìn)行濃縮和純化處理。固相萃取方法的分離機(jī)制與液相色譜方法相同，分離方式主要分為離子交換、吸附、正相和反相。

固相萃取所用的吸附劑也與液相色譜常用的固定相相同，只是在粒度上有所區(qū)別。使用固相萃取法能避免液-液萃取所帶來的許多問題。比如，易于乳化，不完全的相分離，較低的定量分析回收率，昂貴易碎的玻璃器皿和大量的有機(jī)廢液。與液—液萃取相比，固相萃取更有效，容易達(dá)到定量萃取，快速和自動(dòng)化，一般說來固相萃取所需要時(shí)間為1/2，而費(fèi)用為液—液萃取的1/5。固相萃取通常是用于液體樣品的準(zhǔn)備和不易或不揮發(fā)樣品的萃取，但是也用于能預(yù)先提取到溶液里的固體樣品。其缺點(diǎn)是：目標(biāo)化合物的回收率和精密度要低于液—液萃取。

2.3 微波萃取技術(shù)

在傳統(tǒng)的萃取過程中，能量首先無(wú)規(guī)則地傳遞給萃取劑，然后萃取劑擴(kuò)散進(jìn)入基體物質(zhì)，再?gòu)幕w溶解或夾帶多種成分?jǐn)U散出來，即遵循加熱—滲透基體—溶解或夾帶滲透出來的模式。微波萃取是利用微波能來提高萃取效率的一種新技術(shù)。微波溶出法主要適合于固體或半固體樣品，樣品制備的整個(gè)過程需要經(jīng)粉碎、與溶劑混合、微波輻射、分離萃取等步驟。

2.4 微波萃取的特點(diǎn)

傳統(tǒng)的萃取過程中能量積累和滲透過程以無(wú)規(guī)則的方式發(fā)生，萃取的選擇性很差，有限的選擇性只能通過改變?nèi)軇┑男再|(zhì)或延長(zhǎng)溶劑萃取時(shí)間來獲得，前者由于同時(shí)受溶解能力和擴(kuò)散系數(shù)的限制，選擇面很窄；后者則大大降低了萃取效率和速度。微波萃取由于能對(duì)萃取體系中的不同組分進(jìn)行選擇性加熱，因而成為至今唯一能使目標(biāo)組分直接從基體分離的萃取過程，具有較好的選擇性，同時(shí)提高了萃取效率。

2.5 衍生化技術(shù)

衍生化技術(shù)對(duì)提高檢測(cè)的靈敏度與懸著性、改善色譜分離、提高理化穩(wěn)定性、分離結(jié)構(gòu)近似的組分和輔助定性有重要作用。衍生化反應(yīng)過程中要注意在使用一些對(duì)水“敏感”的衍生化試劑時(shí)一定要對(duì)樣品和使用的溶劑進(jìn)行脫水，并在反應(yīng)過程中避免水汽干擾。用反應(yīng)容器特別是密封墊片的材料應(yīng)絕對(duì)不含目標(biāo)化合物，衍生化試劑和所用溶劑也要進(jìn)行純化，不能含目標(biāo)化合物。當(dāng)生成衍生物產(chǎn)物是易揮發(fā)化合物時(shí)應(yīng)用密封的衍生化容器或低溫冷凍處理防止目標(biāo)化合物的流失。衍生化反應(yīng)完成后應(yīng)及時(shí)驚醒色譜縫隙，如不能及時(shí)分析，要將衍生化產(chǎn)物妥善存放，并盡快進(jìn)行分析。

3 色譜樣品制備注意事項(xiàng)

物理方法制備色譜樣品時(shí)要注意防止欲測(cè)組分的丟失；化學(xué)方法制備色譜樣品時(shí)，除了要注意防止欲測(cè)組分丟失，還要注意化學(xué)反應(yīng)的回收率和有無(wú)副反應(yīng)。為此，在色譜樣品制備時(shí)，要作回收率的實(shí)驗(yàn)，以校正最后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

在色譜樣品制備時(shí)還要注意所有使用的裝置、容器、化學(xué)試機(jī)、水等樣品所能接觸的物品，是否會(huì)給制備的色譜樣品帶來污染，所以在制備色譜樣品的同時(shí)要作空白對(duì)照，以檢驗(yàn)色譜樣品制備的過程是否引入對(duì)欲測(cè)定組分測(cè)定有干擾物質(zhì)。在色譜樣品制備時(shí)，最好是將采集到的一個(gè)樣品分成兩份，同時(shí)植被兩個(gè)色譜分析用樣品，以檢測(cè)色譜樣品的可靠性。也可將采集到的一個(gè)樣品分成兩份后，在其中的一份中加入已知量的欲測(cè)組分，然后同時(shí)制備這兩個(gè)色譜分析用樣品，以計(jì)算色譜樣品制備的回收率。

總之，好的制備技術(shù)不但能最大限度的發(fā)揮現(xiàn)在色譜一起的分析測(cè)定功能，而且利用這些技術(shù)同樣也提高了用色譜儀器測(cè)定各種樣品的綜合術(shù)，以便在處理具體的樣品時(shí)可以準(zhǔn)確、可靠和有效地完成色譜分析樣品的制備技術(shù)，完成好色譜分析測(cè)定任務(wù)。

作者簡(jiǎn)介：趙珊珊，錦州市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)檢測(cè)中心，助理農(nóng)藝師，研究方向：農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測(cè)。