紅龍鎮(zhèn)痛片提取工藝的改進(jìn)

姬濤　李懷平　王朔

[摘要] 目的 優(yōu)選紅龍鎮(zhèn)痛片的最佳提取工藝。 方法 采用正交實驗法L9（34）分別以獐牙菜苦苷提取率和干膏得率作為考察指標(biāo)，優(yōu)選紅龍鎮(zhèn)痛片制備過程中的提取工藝。 結(jié)果 最終確定最佳醇提取工藝為每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h。 結(jié)論 該制備工藝穩(wěn)定、合理、可行。

[關(guān)鍵詞] 紅龍鎮(zhèn)痛片；正交實驗法；醇提取

[中圖分類號] R94 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2014）01（a）-0009-03

紅龍鎮(zhèn)痛片為藏醫(yī)古驗方，由龍骨、印度獐牙菜、紅花等十五味藥組成，具有醒腦開竅、通絡(luò)止痛的功效，原方收載于云丹嘉措的《藏醫(yī)臨床札記》，一百多年的臨床應(yīng)用證明，其對偏頭痛、血管性頭痛效果良好。對該藥品原工藝中小部分藥材進(jìn)行提取，大部分藥材直接粉碎入藥，有效成分釋放緩慢，同時因為原藥材細(xì)粉入藥，也影響到衛(wèi)生學(xué)不合格的問題。本實驗根據(jù)配方中藥材所含化學(xué)成分的理化性質(zhì)，選用不同的溶劑進(jìn)行分開提取，保證藥材中的藥效成分能夠被充分的提取出來。本研究將紅龍鎮(zhèn)痛片制劑前工藝分為以下3個部分。①醇提部分：印度獐牙菜、紅花、金腰草、川西小黃菊、馬尿泡、波棱瓜子6味藥；②水提部分：鐵棒錘、唐古特烏頭、珍珠母、龍骨、泉華、石花、短穗兔耳草7味藥；③粉碎部分：安息香、熊膽粉2味藥。本研究著重對醇提兩部分進(jìn)行了工藝研究，采用正交試驗，優(yōu)選了最佳提取工藝。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

1.1.1 儀器 KQ5200B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；高效液相色譜儀：日立L-2100泵，日立L-2400檢測器；島津AUW220D電子天平；HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州榮冠試驗分析儀器廠）。

1.1.2 試藥 藥材由青海金珂藏藥股份有限公司提供；獐牙菜苦苷對照品（0785-200303）由中國食品藥品檢定研究院提供；水為純化水，甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。

1.2 方法

本品原標(biāo)準(zhǔn)中以獐牙菜苦苷含量為含量測定項，因此本試驗以獐牙菜苦苷提取率作為指標(biāo)之一，進(jìn)行了醇提工藝的考察。

1.2.1 色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.2%磷酸溶液（18∶82）為流動相；檢測波長235 nm；進(jìn)樣量5 μl；流速1 ml/min，柱溫室溫[1]。

1.2.2 對照品溶液的制備 取獐牙菜苦苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每毫升含50 μg的溶液，搖勻，即得。

1.2.3 藥材溶液的制備 取印度獐牙菜藥材細(xì)粉約0.5 g，精密稱定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超聲處理40 min，取出，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

1.2.4 供試品溶液的制備 取實驗制得樣品細(xì)粉約1.0 g，精密稱定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超聲處理40 min，取出，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

1.2.5 醇濃度篩選 取印度獐牙菜20.1 g、紅花20.1 g、金腰草4.2 g、川西小黃菊20.1 g、馬尿泡4.05 g、波棱瓜子4.05 g，6味藥材混合共計72.6 g，共取4份，分別加入8倍量35%、55%、75%、95%乙醇回流提取2次，每次2 h，濾過，濾液濃縮干燥，研細(xì)，按“1.2.4”項下制備供試品溶液，測定獐牙菜苦苷含量，計算提取率。

1.2.6 正交試驗 為進(jìn)一步優(yōu)選醇提最佳工藝，選定加醇量、提取時間和提取次數(shù)作為考察的三個因素，各取三個水平，以獐牙菜苦苷提取率及干膏得率為指標(biāo)綜合評分。正交試驗設(shè)計見表1。

實驗室中的提取時間是由提取次數(shù)確定，提取時間由前往后依次進(jìn)行。

稱取印度獐牙菜等6味藥材混合共計72.6 g，共取9份，按正交表順序進(jìn)行工藝試驗，按“1.2.4”項下制備供試品溶液，測定獐牙菜苦苷含量，計算提取率。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比較

不同濃度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比較具體結(jié)果見表2。結(jié)果表明，醇濃度越高，獐牙菜苦苷提取率越高，而75% 乙醇和95% 乙醇的提取效果差異較小，為保證藥物中有效成分能最大限度的提取出來，同時也能夠節(jié)約生產(chǎn)成本，確定采用濃度為75%乙醇進(jìn)行提取。

印度獐牙菜藥材中獐牙菜苦苷含量為0.70%

2.2 醇提正交試驗

醇提正交試驗直觀分析具體見表3，醇提正交試驗方差分析具體見表4。由方差分析結(jié)果看，三個因素對提取效果影響的作用次序為C>A>B，其中C因素對結(jié)果有顯著性影響，即提取次數(shù)影響最大，加醇量次之，提取時間影響最小，再結(jié)合直觀分析結(jié)果，確定醇提的最佳工藝參數(shù)為A2B1C3，即每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h。

2.3 驗證試驗

按配方配比稱取醇提藥材共計363 g，共取3份，采用正交試驗優(yōu)選得到的條件進(jìn)行醇提，測定獐牙菜苦苷提取率及干膏率，結(jié)果與正交試驗基本一致，說明提取工藝條件穩(wěn)定可行（表5）。

印度獐牙菜藥材中獐牙菜苦苷含量為0.70%

3 討論

方中金腰草、川西小黃菊中含黃酮類等有效成分[2-3]，馬尿泡中含有生物堿類等成分[4]，波棱瓜子中含有木質(zhì)素及油脂類成分等[5]，這些成分在醇中都有很好的溶解度，同時也有報道，印度獐牙菜[6]、紅花[7]醇提效果也較好，因此本文將上述六味藥合并進(jìn)行醇提取，優(yōu)選最佳提取方案。

本實驗參考原標(biāo)準(zhǔn)以獐牙菜苦苷含量為主要指標(biāo)，同時以干膏得率為次要指標(biāo)，兩者結(jié)合，綜合評價，可以比較客觀地反映各個因素及因素水平對提取工藝的影響。

本實驗以最大程度提取藥材中有效成分為原則，通過系統(tǒng)的研究得到最佳工藝為藥材每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h，驗證結(jié)果表明此工藝穩(wěn)定可行，適用于工業(yè)生產(chǎn)。

對本方原工藝中小部分藥材進(jìn)行提取，大部分藥材直接粉碎入藥，而傳統(tǒng)藏藥中很多成藥都以藥材粉末直接入藥，存在生產(chǎn)方式粗放、質(zhì)量較難控制等缺點[8]，因此，怎樣將現(xiàn)代技術(shù)引入藏藥的二次開發(fā)中，成為目前制約藏藥發(fā)展的一個因素。通過本實驗的研究，希望能為其他藏藥品種的研發(fā)提供借鑒。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 國家藥品監(jiān)督管理局.國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編經(jīng)絡(luò)肢體腦系分冊[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：71.

[2] 王玉平，楊云裳，楊林西，等.藏藥金腰草中黃酮誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡及其分子機制研究[J].實用癌癥雜志，2005， 20（4）：374-376.

[3] 楊愛梅，魯潤滑，師彥平.藏藥川西小黃菊化學(xué)成分的研究[J].中藥材，2007，30（5）：546-548

[4] 朱華勇，吳娟，黃帥，等.馬尿泡化學(xué)成分的研究[J].華西藥學(xué)雜志，2011，26（4）：305-307

[5] 徐冰.藏藥波棱瓜子化學(xué)成分研究[D].重慶：西南大學(xué)，2012.

[6] 黃一平，畢麗麗，陳超，等.藏藥印度獐牙菜提取工藝研究[J].中成藥，2008，30（2）：190-192.

[7] 李璘，陸茵，馬騁，等.紅花醇提物對心肌缺血犬的血流動力的作用[J].中藥藥理與臨床，2002，（6）：24-26.

[8] 曹越，孟憲紀(jì). 藏藥及其研究現(xiàn)狀[J].甘肅中醫(yī)，2004，17（10）：32-33.

（收稿日期：2013-10-15 本文編輯：林利利）

[摘要] 目的 優(yōu)選紅龍鎮(zhèn)痛片的最佳提取工藝。 方法 采用正交實驗法L9（34）分別以獐牙菜苦苷提取率和干膏得率作為考察指標(biāo)，優(yōu)選紅龍鎮(zhèn)痛片制備過程中的提取工藝。 結(jié)果 最終確定最佳醇提取工藝為每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h。 結(jié)論 該制備工藝穩(wěn)定、合理、可行。

[關(guān)鍵詞] 紅龍鎮(zhèn)痛片；正交實驗法；醇提取

[中圖分類號] R94 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2014）01（a）-0009-03

紅龍鎮(zhèn)痛片為藏醫(yī)古驗方，由龍骨、印度獐牙菜、紅花等十五味藥組成，具有醒腦開竅、通絡(luò)止痛的功效，原方收載于云丹嘉措的《藏醫(yī)臨床札記》，一百多年的臨床應(yīng)用證明，其對偏頭痛、血管性頭痛效果良好。對該藥品原工藝中小部分藥材進(jìn)行提取，大部分藥材直接粉碎入藥，有效成分釋放緩慢，同時因為原藥材細(xì)粉入藥，也影響到衛(wèi)生學(xué)不合格的問題。本實驗根據(jù)配方中藥材所含化學(xué)成分的理化性質(zhì)，選用不同的溶劑進(jìn)行分開提取，保證藥材中的藥效成分能夠被充分的提取出來。本研究將紅龍鎮(zhèn)痛片制劑前工藝分為以下3個部分。①醇提部分：印度獐牙菜、紅花、金腰草、川西小黃菊、馬尿泡、波棱瓜子6味藥；②水提部分：鐵棒錘、唐古特烏頭、珍珠母、龍骨、泉華、石花、短穗兔耳草7味藥；③粉碎部分：安息香、熊膽粉2味藥。本研究著重對醇提兩部分進(jìn)行了工藝研究，采用正交試驗，優(yōu)選了最佳提取工藝。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

1.1.1 儀器 KQ5200B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；高效液相色譜儀：日立L-2100泵，日立L-2400檢測器；島津AUW220D電子天平；HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州榮冠試驗分析儀器廠）。

1.1.2 試藥 藥材由青海金珂藏藥股份有限公司提供；獐牙菜苦苷對照品（0785-200303）由中國食品藥品檢定研究院提供；水為純化水，甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。

1.2 方法

本品原標(biāo)準(zhǔn)中以獐牙菜苦苷含量為含量測定項，因此本試驗以獐牙菜苦苷提取率作為指標(biāo)之一，進(jìn)行了醇提工藝的考察。

1.2.1 色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.2%磷酸溶液（18∶82）為流動相；檢測波長235 nm；進(jìn)樣量5 μl；流速1 ml/min，柱溫室溫[1]。

1.2.2 對照品溶液的制備 取獐牙菜苦苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每毫升含50 μg的溶液，搖勻，即得。

1.2.3 藥材溶液的制備 取印度獐牙菜藥材細(xì)粉約0.5 g，精密稱定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超聲處理40 min，取出，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

1.2.4 供試品溶液的制備 取實驗制得樣品細(xì)粉約1.0 g，精密稱定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超聲處理40 min，取出，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

1.2.5 醇濃度篩選 取印度獐牙菜20.1 g、紅花20.1 g、金腰草4.2 g、川西小黃菊20.1 g、馬尿泡4.05 g、波棱瓜子4.05 g，6味藥材混合共計72.6 g，共取4份，分別加入8倍量35%、55%、75%、95%乙醇回流提取2次，每次2 h，濾過，濾液濃縮干燥，研細(xì)，按“1.2.4”項下制備供試品溶液，測定獐牙菜苦苷含量，計算提取率。

1.2.6 正交試驗 為進(jìn)一步優(yōu)選醇提最佳工藝，選定加醇量、提取時間和提取次數(shù)作為考察的三個因素，各取三個水平，以獐牙菜苦苷提取率及干膏得率為指標(biāo)綜合評分。正交試驗設(shè)計見表1。

實驗室中的提取時間是由提取次數(shù)確定，提取時間由前往后依次進(jìn)行。

稱取印度獐牙菜等6味藥材混合共計72.6 g，共取9份，按正交表順序進(jìn)行工藝試驗，按“1.2.4”項下制備供試品溶液，測定獐牙菜苦苷含量，計算提取率。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比較

不同濃度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比較具體結(jié)果見表2。結(jié)果表明，醇濃度越高，獐牙菜苦苷提取率越高，而75% 乙醇和95% 乙醇的提取效果差異較小，為保證藥物中有效成分能最大限度的提取出來，同時也能夠節(jié)約生產(chǎn)成本，確定采用濃度為75%乙醇進(jìn)行提取。

印度獐牙菜藥材中獐牙菜苦苷含量為0.70%

2.2 醇提正交試驗

醇提正交試驗直觀分析具體見表3，醇提正交試驗方差分析具體見表4。由方差分析結(jié)果看，三個因素對提取效果影響的作用次序為C>A>B，其中C因素對結(jié)果有顯著性影響，即提取次數(shù)影響最大，加醇量次之，提取時間影響最小，再結(jié)合直觀分析結(jié)果，確定醇提的最佳工藝參數(shù)為A2B1C3，即每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h。

2.3 驗證試驗

按配方配比稱取醇提藥材共計363 g，共取3份，采用正交試驗優(yōu)選得到的條件進(jìn)行醇提，測定獐牙菜苦苷提取率及干膏率，結(jié)果與正交試驗基本一致，說明提取工藝條件穩(wěn)定可行（表5）。

印度獐牙菜藥材中獐牙菜苦苷含量為0.70%

3 討論

方中金腰草、川西小黃菊中含黃酮類等有效成分[2-3]，馬尿泡中含有生物堿類等成分[4]，波棱瓜子中含有木質(zhì)素及油脂類成分等[5]，這些成分在醇中都有很好的溶解度，同時也有報道，印度獐牙菜[6]、紅花[7]醇提效果也較好，因此本文將上述六味藥合并進(jìn)行醇提取，優(yōu)選最佳提取方案。

本實驗參考原標(biāo)準(zhǔn)以獐牙菜苦苷含量為主要指標(biāo)，同時以干膏得率為次要指標(biāo)，兩者結(jié)合，綜合評價，可以比較客觀地反映各個因素及因素水平對提取工藝的影響。

本實驗以最大程度提取藥材中有效成分為原則，通過系統(tǒng)的研究得到最佳工藝為藥材每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h，驗證結(jié)果表明此工藝穩(wěn)定可行，適用于工業(yè)生產(chǎn)。

對本方原工藝中小部分藥材進(jìn)行提取，大部分藥材直接粉碎入藥，而傳統(tǒng)藏藥中很多成藥都以藥材粉末直接入藥，存在生產(chǎn)方式粗放、質(zhì)量較難控制等缺點[8]，因此，怎樣將現(xiàn)代技術(shù)引入藏藥的二次開發(fā)中，成為目前制約藏藥發(fā)展的一個因素。通過本實驗的研究，希望能為其他藏藥品種的研發(fā)提供借鑒。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 國家藥品監(jiān)督管理局.國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編經(jīng)絡(luò)肢體腦系分冊[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：71.

[2] 王玉平，楊云裳，楊林西，等.藏藥金腰草中黃酮誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡及其分子機制研究[J].實用癌癥雜志，2005， 20（4）：374-376.

[3] 楊愛梅，魯潤滑，師彥平.藏藥川西小黃菊化學(xué)成分的研究[J].中藥材，2007，30（5）：546-548

[4] 朱華勇，吳娟，黃帥，等.馬尿泡化學(xué)成分的研究[J].華西藥學(xué)雜志，2011，26（4）：305-307

[5] 徐冰.藏藥波棱瓜子化學(xué)成分研究[D].重慶：西南大學(xué)，2012.

[6] 黃一平，畢麗麗，陳超，等.藏藥印度獐牙菜提取工藝研究[J].中成藥，2008，30（2）：190-192.

[7] 李璘，陸茵，馬騁，等.紅花醇提物對心肌缺血犬的血流動力的作用[J].中藥藥理與臨床，2002，（6）：24-26.

[8] 曹越，孟憲紀(jì). 藏藥及其研究現(xiàn)狀[J].甘肅中醫(yī)，2004，17（10）：32-33.

（收稿日期：2013-10-15 本文編輯：林利利）

[摘要] 目的 優(yōu)選紅龍鎮(zhèn)痛片的最佳提取工藝。 方法 采用正交實驗法L9（34）分別以獐牙菜苦苷提取率和干膏得率作為考察指標(biāo)，優(yōu)選紅龍鎮(zhèn)痛片制備過程中的提取工藝。 結(jié)果 最終確定最佳醇提取工藝為每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h。 結(jié)論 該制備工藝穩(wěn)定、合理、可行。

[關(guān)鍵詞] 紅龍鎮(zhèn)痛片；正交實驗法；醇提取

[中圖分類號] R94 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2014）01（a）-0009-03

紅龍鎮(zhèn)痛片為藏醫(yī)古驗方，由龍骨、印度獐牙菜、紅花等十五味藥組成，具有醒腦開竅、通絡(luò)止痛的功效，原方收載于云丹嘉措的《藏醫(yī)臨床札記》，一百多年的臨床應(yīng)用證明，其對偏頭痛、血管性頭痛效果良好。對該藥品原工藝中小部分藥材進(jìn)行提取，大部分藥材直接粉碎入藥，有效成分釋放緩慢，同時因為原藥材細(xì)粉入藥，也影響到衛(wèi)生學(xué)不合格的問題。本實驗根據(jù)配方中藥材所含化學(xué)成分的理化性質(zhì)，選用不同的溶劑進(jìn)行分開提取，保證藥材中的藥效成分能夠被充分的提取出來。本研究將紅龍鎮(zhèn)痛片制劑前工藝分為以下3個部分。①醇提部分：印度獐牙菜、紅花、金腰草、川西小黃菊、馬尿泡、波棱瓜子6味藥；②水提部分：鐵棒錘、唐古特烏頭、珍珠母、龍骨、泉華、石花、短穗兔耳草7味藥；③粉碎部分：安息香、熊膽粉2味藥。本研究著重對醇提兩部分進(jìn)行了工藝研究，采用正交試驗，優(yōu)選了最佳提取工藝。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥

1.1.1 儀器 KQ5200B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；高效液相色譜儀：日立L-2100泵，日立L-2400檢測器；島津AUW220D電子天平；HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋（常州榮冠試驗分析儀器廠）。

1.1.2 試藥 藥材由青海金珂藏藥股份有限公司提供；獐牙菜苦苷對照品（0785-200303）由中國食品藥品檢定研究院提供；水為純化水，甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。

1.2 方法

本品原標(biāo)準(zhǔn)中以獐牙菜苦苷含量為含量測定項，因此本試驗以獐牙菜苦苷提取率作為指標(biāo)之一，進(jìn)行了醇提工藝的考察。

1.2.1 色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-0.2%磷酸溶液（18∶82）為流動相；檢測波長235 nm；進(jìn)樣量5 μl；流速1 ml/min，柱溫室溫[1]。

1.2.2 對照品溶液的制備 取獐牙菜苦苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每毫升含50 μg的溶液，搖勻，即得。

1.2.3 藥材溶液的制備 取印度獐牙菜藥材細(xì)粉約0.5 g，精密稱定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超聲處理40 min，取出，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

1.2.4 供試品溶液的制備 取實驗制得樣品細(xì)粉約1.0 g，精密稱定，置25 ml量瓶中，加甲醇20 ml，超聲處理40 min，取出，放冷至室溫，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

1.2.5 醇濃度篩選 取印度獐牙菜20.1 g、紅花20.1 g、金腰草4.2 g、川西小黃菊20.1 g、馬尿泡4.05 g、波棱瓜子4.05 g，6味藥材混合共計72.6 g，共取4份，分別加入8倍量35%、55%、75%、95%乙醇回流提取2次，每次2 h，濾過，濾液濃縮干燥，研細(xì)，按“1.2.4”項下制備供試品溶液，測定獐牙菜苦苷含量，計算提取率。

1.2.6 正交試驗 為進(jìn)一步優(yōu)選醇提最佳工藝，選定加醇量、提取時間和提取次數(shù)作為考察的三個因素，各取三個水平，以獐牙菜苦苷提取率及干膏得率為指標(biāo)綜合評分。正交試驗設(shè)計見表1。

實驗室中的提取時間是由提取次數(shù)確定，提取時間由前往后依次進(jìn)行。

稱取印度獐牙菜等6味藥材混合共計72.6 g，共取9份，按正交表順序進(jìn)行工藝試驗，按“1.2.4”項下制備供試品溶液，測定獐牙菜苦苷含量，計算提取率。

2 結(jié)果

2.1 不同濃度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比較

不同濃度乙醇獐牙菜苦苷提取率的比較具體結(jié)果見表2。結(jié)果表明，醇濃度越高，獐牙菜苦苷提取率越高，而75% 乙醇和95% 乙醇的提取效果差異較小，為保證藥物中有效成分能最大限度的提取出來，同時也能夠節(jié)約生產(chǎn)成本，確定采用濃度為75%乙醇進(jìn)行提取。

印度獐牙菜藥材中獐牙菜苦苷含量為0.70%

2.2 醇提正交試驗

醇提正交試驗直觀分析具體見表3，醇提正交試驗方差分析具體見表4。由方差分析結(jié)果看，三個因素對提取效果影響的作用次序為C>A>B，其中C因素對結(jié)果有顯著性影響，即提取次數(shù)影響最大，加醇量次之，提取時間影響最小，再結(jié)合直觀分析結(jié)果，確定醇提的最佳工藝參數(shù)為A2B1C3，即每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h。

2.3 驗證試驗

按配方配比稱取醇提藥材共計363 g，共取3份，采用正交試驗優(yōu)選得到的條件進(jìn)行醇提，測定獐牙菜苦苷提取率及干膏率，結(jié)果與正交試驗基本一致，說明提取工藝條件穩(wěn)定可行（表5）。

印度獐牙菜藥材中獐牙菜苦苷含量為0.70%

3 討論

方中金腰草、川西小黃菊中含黃酮類等有效成分[2-3]，馬尿泡中含有生物堿類等成分[4]，波棱瓜子中含有木質(zhì)素及油脂類成分等[5]，這些成分在醇中都有很好的溶解度，同時也有報道，印度獐牙菜[6]、紅花[7]醇提效果也較好，因此本文將上述六味藥合并進(jìn)行醇提取，優(yōu)選最佳提取方案。

本實驗參考原標(biāo)準(zhǔn)以獐牙菜苦苷含量為主要指標(biāo)，同時以干膏得率為次要指標(biāo)，兩者結(jié)合，綜合評價，可以比較客觀地反映各個因素及因素水平對提取工藝的影響。

本實驗以最大程度提取藥材中有效成分為原則，通過系統(tǒng)的研究得到最佳工藝為藥材每次加8倍量75%乙醇回流提取3次，第一次提取2 h，第二、三次各提取1 h，驗證結(jié)果表明此工藝穩(wěn)定可行，適用于工業(yè)生產(chǎn)。

對本方原工藝中小部分藥材進(jìn)行提取，大部分藥材直接粉碎入藥，而傳統(tǒng)藏藥中很多成藥都以藥材粉末直接入藥，存在生產(chǎn)方式粗放、質(zhì)量較難控制等缺點[8]，因此，怎樣將現(xiàn)代技術(shù)引入藏藥的二次開發(fā)中，成為目前制約藏藥發(fā)展的一個因素。通過本實驗的研究，希望能為其他藏藥品種的研發(fā)提供借鑒。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 國家藥品監(jiān)督管理局.國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編經(jīng)絡(luò)肢體腦系分冊[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：71.

[2] 王玉平，楊云裳，楊林西，等.藏藥金腰草中黃酮誘導(dǎo)K562細(xì)胞凋亡及其分子機制研究[J].實用癌癥雜志，2005， 20（4）：374-376.

[3] 楊愛梅，魯潤滑，師彥平.藏藥川西小黃菊化學(xué)成分的研究[J].中藥材，2007，30（5）：546-548

[4] 朱華勇，吳娟，黃帥，等.馬尿泡化學(xué)成分的研究[J].華西藥學(xué)雜志，2011，26（4）：305-307

[5] 徐冰.藏藥波棱瓜子化學(xué)成分研究[D].重慶：西南大學(xué)，2012.

[6] 黃一平，畢麗麗，陳超，等.藏藥印度獐牙菜提取工藝研究[J].中成藥，2008，30（2）：190-192.

[7] 李璘，陸茵，馬騁，等.紅花醇提物對心肌缺血犬的血流動力的作用[J].中藥藥理與臨床，2002，（6）：24-26.

[8] 曹越，孟憲紀(jì). 藏藥及其研究現(xiàn)狀[J].甘肅中醫(yī)，2004，17（10）：32-33.

（收稿日期：2013-10-15 本文編輯：林利利）