生姜貯藏期病原菌分離鑒定及精油抑菌效果

劉 繼，顏 靜，何靖柳，董紅敏，郭 菲，熊亞波，黃 影，秦 文,*

（1.成都市農林科學院農產品研究所，四川 成都 611130；2.四川農業大學食品學院，四川 雅安 625014）

生姜貯藏期病原菌分離鑒定及精油抑菌效果

劉 繼1,2，顏 靜2，何靖柳2，董紅敏2，郭 菲2，熊亞波2，黃 影2，秦 文2,*

（1.成都市農林科學院農產品研究所，四川 成都 611130；2.四川農業大學食品學院，四川 雅安 625014）

分離、純化及鑒定生姜貯藏期病原菌，篩選出對抑制病原菌效果較好的精油并驗證該精油抑菌效果。通過分離、純化及致病性實驗得到了病原菌菌株ljr4及ljw2。以病原菌18S rDNA序列進行進化樹分析，結果表明該兩種病原菌分別屬于鐮刀菌屬及被孢霉屬。根據病原菌種屬選擇了6 種精油進行抑菌性實驗，結果發現肉桂精油及百里香精油在用量為2 000 μL/L時對病原菌生長抑制率均為100%。在藥敏實驗中發現肉桂精油比百里香精油抑菌活性更強。肉桂精油對ljr4、ljw2這2 種病原菌最低抑菌用量分別為64、32 μL/L，最低殺菌用量分別為125、500 μL/L。與未熏蒸生姜相比，在貯藏30 d后肉桂精油熏蒸處理分別使接種ljr 4及ljw2的生姜感病率下降了59.33%和47.33%。肉桂精油作為生姜貯藏前的熏蒸劑有較好的應用前景。

鐮刀菌；被孢霉；18S rDNA；肉桂精油；抑菌效果

生姜（Zingiber officinale Roscoe）含有多種烯萜類及酚類物質，獨特的風味使其成為亞洲地區的傳統調味品，并逐漸被全世界的消費者所接受。目前已知生姜具有降血脂、強心、抗氧化、抗腫瘤、防腐殺蟲和護膚美容等多方面的用途[1]。由于其較高的經濟價值，我國的生姜種植面積已自2008年的150萬畝攀升至2012年的450萬畝。姜的食用部分為根狀莖，其表面附著的源自土壤 的各種微生物可能導致貯藏期生姜感病，且傳統的窖藏、埋藏、井藏等方 法受天氣及土壤的影響較大，溫、濕度不易調控，為微生物大量生長及繁殖創造了條件。目前關于生姜貯藏期病害及天然殺菌劑的研究較少，缺乏對于針對性用藥的指導，這 也是“硫磺熏姜”類事件發生的根本 原因。由于生姜氣味濃郁，病害初期很難及時發現，如不能有效預防及控制病害不僅會造成巨大的經濟損失，甚至可能會導 致食品安全問題。

在目前關于生姜貯藏期病害的研究中，只有Stirling[2]明確提出尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum）會造成種姜貯藏過程中的腐敗，關于生姜貯藏過程的病原菌分離鑒定工作目前進行的較少。由于生姜表皮幼嫩并且在采收過程會引起無法避免的傷口，所以使用的抑菌劑必須是

無毒低殘留甚至是無殘留的。精油是植物特有的次生代謝產物，主要由萜類、芳 香族類、脂肪族類等化合物的混合物組成，具有抗菌、抗病毒、抗氧化等多種生物活性，是一種重要的天然防腐劑，并且由于其高揮發和低殘留特性，在果蔬保鮮事業中擁有廣闊的應用前景。

肉桂（Cinnamomum zeylanicum）[3]、百里香（Thymus v ulgaris）[4]、丁香（Syzygium aromaticum）[5]、茶樹（Melaleuca alternifolia）精油[6]、山蒼子（Litsea cubeba）[7]、羅勒（Ocimum basilicum）[8]都對鐮刀菌屬（Fusarium sp.）微生物有明顯的抑制作用。此外這些植物精油也對其他屬的多種微生物有顯著的抑菌作用，如肉桂精油對匍枝根霉（R. stolonifer）、黑曲霉（A. niger）、臘葉枝孢（C. herbarum）、灰霉菌（B. cinerea）、炭疽菌（C. coccodes）有良好的抑制作用[3]。

本實驗擬對從感病生姜表皮分離到的微生物進行純化，將純化后的微生物接種于健康生姜進行致病性實驗。對確定為病原菌菌株的18S rDNA保守序列測序，通過該保守序列的進化樹分析確定病原菌種屬。以病原菌種屬為依據，選用百里香、肉桂、丁香、羅勒、茶樹葉精油作為殺菌劑進行抑菌性實驗、藥敏性實驗及活體抑菌實驗。本研究旨在為生姜貯藏期殺菌劑選擇提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

萊蕪大姜分別購自四川國際農產品交易中心及高水蔬菜批發市場，病原菌分離材料為貯藏期感病生姜，致病性實驗及活體抑菌實驗材料為健康生姜。

供試精油分別提取自百里香（Thymus vulgaris）葉、丁香（Syzygium aromaticum）葉、肉桂（Cinnamomum zeylanicum）皮、山蒼子（Litsea cubeba）果實、茶樹（Melaleuca alternifolia）葉、羅勒（Ocimum basilicum）葉江西吉安盛大香料油公司；不透氣封口膜 美國Omega公司；UNIQ-10柱式真菌基因組抽提試劑盒、UNIQ柱式DNA膠回收試劑盒 上海生工生物工程有限公司。

沙堡弱培養基（sabourand’s agar，SDA）配方（每1 000 mL）：葡萄糖40 g、蛋白胨10 g、瓊脂12 g，pH （6.5±0.2）。營養肉湯培養基（nutrition agar，NA）配方（每1 000 mL）：蛋白胨10 g、牛肉粉3 g、氯化鈉5 g，pH（7.2±0.2）。

1.2 儀器與設備

DNP-9272型生化培養箱 上海精宏實驗設備有限公司；YXQ.SG41.280手提式壓力蒸汽滅菌器 上海華線醫用核子儀器有限公司；SW-CJ-1F潔凈工作臺蘇凈集團安泰公司；PHS-3C型數顯酸度計 中國雷磁分析儀器廠；BR4i型高速冷凍離心機 美國Thermo Electron公司；3730測序列分析儀 美國Applied Bio Systems公司；DYY-8型穩壓穩流電泳儀 上海琪特分析儀器有限公司；Gene Genius Bio Image凝膠成像系統英國Syngene公司；PCR反應擴增儀、移液器（范圍100～1 000、20～200、0.5～10 μL） 加拿大Bio Basic公司；U-3010紫外-可見分光光度計 日本Hitachi公司。

1.3 方法

1.3.1 病原菌分離

選擇被微生物侵染、帶有明顯腐爛痕跡的生姜莖塊，使用體積分數70%乙醇溶液進行表面消毒后，以清水沖洗，將患病組織切割成面積為5 mm×5 mm×3 mm（長×寬×厚度）的小塊，放置于研缽，加入1 mL無菌蒸餾水搗碎后分別劃線接種于SDA培養基及NA培養基，繼續以SDA和NA培養基純化各菌株，至連續3 次純化過程無其他菌落出現。

1.3.2 致病性測試

參照Vero等[9]的方法將純化后的微生物接種于生姜上，微生物接種量為2×105CFU/mL。將接種不同微生物的莖塊分別裝入不同的PE袋中并密封，共3 個重復組，每組16 塊莖塊分別裝于4 個PE袋，所接種生姜于28 ℃，相對濕度90%條件下存放10 d。以上述方法分離發病部位微生物，并與該組接種的微生物對比，如果形態學鑒定一致則確定為病原菌。

1.3.3 病原菌18S rDNA序列分析

測定已確定病原菌的18S rDNA序列，通過進化樹分析確定病原菌種屬，并以此為精油種類的選擇提供依據。測序所用菌絲于28 ℃條件下預先培養5 d，DNA的提取參照Bargues等[10]的方法，18S rDNA序列PCR擴增引物如下：

NS1（5’-GTAGTCATATGCTTGTCTC-3’）

NS6（5’-GCATCACAGACCTGTTATTGCCTC-3’）

PCR反應參照Zhao等[11]的方法，18S rDNA片段測序由ABI PRISM 3730 DNA測序儀完成。所獲得序列提交GenBank并使用BLAST（basic local alignment search tool）在GenBank進行比對。收集相關菌種的18S rDNA序列，以MEGA5.2構建進化樹，大致確定病原所屬種屬，為有針對性的選擇抑菌劑提供依據。

1.3.4 精油抑菌效果實驗

根據病原菌鑒定結果，確定了以百里香、丁香、肉桂、山蒼子、羅勒、茶樹等植物中提取的精油作為供試抑菌劑，所選取供試精油已被報道對分離鑒定的病原菌同屬微生物中一種或幾種有抑制作用。精油抗菌活性實

驗方法參照Singh等[12]報道的污染食物技術，所有精油用量均為2 000 μL/L，全部處理均重復3 次。接種3 d后使用游標卡尺測量菌落直徑，以在未加入精油的培養基上生長的同種菌正常菌落為對照，計算抑菌率。計算公式如下：

式中：dc為對照組菌落直徑平均值/mm ；dt為處理組菌落直徑平均值/mm。

1.3.5 藥敏性實驗

為了進一步測試對病原菌抑菌效果較好的幾種精油的最低抑菌用量，將各種病原菌菌懸液50 μL（2×105CFU/mL）加入平板中，于30 ℃條件下培養6 h。待水分蒸發后將140～1 μL（熏蒸用量2 000～16 μL/L）的精油均勻涂抹至培養皿。關閉培養皿并以不透氣膜封口，標記為X-2 000至X-16。其中X為精油簡寫，每個用量設置為上一用量1/2，于30 ℃條件下培養4 d后觀察菌落生長情況。以無菌落生長的最低用量作為該精油對該種病原菌的最低抑菌用量（minimal inhibitory concentration，MIC）。

確定MIC以后，取出大于MIC處理的所有平板，以1 mL滅菌水沖洗其培養基表面，將洗液轉移至無精油的培養皿中，標記為R-2 000至R-A。R表示該測試主要以病原菌能否恢復生長來衡量病原菌是否死亡，A為該精油對該菌MIC。從以上R-2 000至R-A每組取任意一只培養皿，再次加入50 μL（2×106CFU/mL）對應菌懸液作為對照組，于30 ℃條件下培養4 d后觀察菌落生長情況，以對照組正常生長，處理組菌落數小于5的處理用量為最低殺菌用量（minimal fungicidal concentration，MFC）。

1.3.6 活體抑菌實驗

以藥敏實驗中對病原菌MIC及MFC較小的精油進行活體抑菌實驗。熏蒸處理前2 d，將每種病原菌分別接種于健康的生姜，參照Vero等[9]的方法，接種微生物數量為2×105CFU/mL。在溫度25 ℃、相對濕度90%培養箱中培養。熏蒸處理用量為所使用精油的最低殺菌用量，熏蒸在12 ℃、相對濕度90%恒溫恒濕培養箱中進行，精油使用放置于培養箱中的電熱板進行加熱，處理時間為3 d。熏蒸完成后，將生姜放置于避光的空氣流通處使殘余精油揮發，分別以接種不同病原菌后未進行熏蒸處理的生姜為對照。接種ljr4的莖塊以切開接種部位后能夠觀察到接種組織附近有紅色病斑為衡量發病的標準；接種ljw2的莖塊以接種部位及周圍能夠觀察到白色菌絲為衡量發病的標準，于處理完成后10、20、30 d統計發病率。

2 結果與分析

2.1 病原菌分離及鑒定

本實驗從貯藏期腐敗、霉變的生姜中分離出了4 種真菌及3 種細菌。在病原菌測試中，從生姜的發病部位分離得到的微生物中有2 種與原接種微生物一致。在接種的其他處理中也分離得到該2 種微生物分別標記為ljr4及ljw2，30 ℃培養4 d后其菌落形態如圖1所示。

圖1 生姜貯藏期病原菌分離、菌落形態及發病癥狀Fig.1 Pathogen isolation, colony morphology, and pathogenicity test

ljr4菌落近圓形，單菌落能擴展至直徑9 cm，邊緣不規則，菌落正面白色至4 d后為粉紅色，菌落反面培養初為淡黃色4 d后為粉紅色，菌絲為樹枝狀無隔長菌絲，被感染生姜初期莖塊外層組織能觀察到粉紅色斑點，較不明顯，后期表皮呈深紅色至褐色可觀察到少量菌絲，菌絲長而稀疏。

ljw2菌落近圓形，蓮花狀，單菌落能擴展至直徑7 cm，邊緣缺刻，菌落正面為白色，背面為淡黃色，菌絲為鹿角狀有隔菌絲，被感染生姜莖塊上明顯可見白色菌絲，菌絲短而致密。

18S rDNA序列分析結果表明，2 種病原菌與鐮刀菌屬及被孢霉屬微生物保守序列相似度最高。該2 種病原菌的18S rDNA序列NCBI登錄號分別為：KC833484.1及KC833483.1。

圖2 Mortierella sp. ljw2、Fusarium sp. ljr4和相關菌株的系統進化樹Fig.2 Phylogenetic tree of Mortierella sp. ljw2, Fusarium sp. ljr4, and their relative strains

進化樹分析（圖2）顯示，該兩種病原菌分別與Fusarium culmorum及Mortierella parvispora具有最高的同源性。ljr4菌株與黃色鐮刀菌（Fusarium culmorum）親緣關系較近，與尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum）及腐皮鐮刀菌（Fusarium solani）親緣關系較遠。ljw2菌株與被孢霉屬親緣關系較近，與毛霉菌（Mucoromycotina sp.）及內囊霉（Endogone sp.）親緣關系較遠。

2.2 不同精油抑菌效果對比

本實驗選擇已經報道的對鐮刀菌屬微生物有較好抑制效果的精油進行抑菌性實驗。

表1 精油對病原菌菌絲生長的抑制率Table 1 Inhibition rates of toxic media on mycelial growth of pathogenic fuunnggii %

如表1所示，百里香和肉桂精油在2 000 μL/L用量下對兩種病原菌生長的抑制率為100%，該用量下丁香和羅勒精油對ljr4抑制率為100%，但對于ljw2的抑制率分別為54.89%和60.03%，抑菌效果不明顯。山蒼子及茶樹精油在該用量下對兩種病原菌都有一定的抑制作用，但不能達到抑制率100%的效果，且對ljw2的抑制效果顯著低于其他精油。

2.3 藥敏性實驗

表2 肉桂精油及百里香精油對病原菌的MIC及MFCTable 2 Minimum inhibitory concentration (MIC) and minimal fungicidal concentration (MFC) of thyme and cinnamon essential oil on pathogenic fungi

如表2所示，百里香對鐮刀菌及被孢霉的MIC分別為64和250 μL/L，其對ljw2的熏蒸處理MFC為2 000 μL/L。與百里香精油相比，兩種病原菌都對肉桂精油熏蒸處理更為敏感，肉桂精油對ljr4和ljw2的熏蒸MIC分別為64 μL/L和32 μL/L，熏蒸MFC分別為125 μL/L和500 μL/L。

肉桂及百里香精油對ljr4的MIC均為64 μL/L，但肉桂精油對ljw2的MIC僅為百里香的約1/8。肉桂及百里香精油對ljr4的MFC分別為125、250 μL/L，肉桂精油對ljw2的MFC為500 μL/L，為百里香精油的1/4。由此可見，肉桂精油熏蒸處理對ljr4和ljw2效果優于百里香精油。

2.4 活體抑菌實驗

離體條件下肉桂精油熏蒸處理對ljr4及ljw2菌株的最低殺菌用量分別為125 μL/L和500 μL/L。如圖3所示，在整個貯藏過程中，經過熏蒸處理的A組和C組感病率都小于未處理的B組和D組（P≤0.05，n=3）。在活體實驗中接種ljr4的對照組B在貯藏30 d后感病率為70%，該感病率約為熏蒸處理組A的6.36 倍。接種ljw2的對照組D在貯藏30 d后感病率為58%，該感病率為熏蒸處理組C的7.25 倍。貯藏30 d后肉桂精油熏蒸處理分別使接種ljr4及ljw2的生姜感病率下降了59.33%和47.33%。處理B與D相比，在貯藏10 d時接種的兩種病原菌感病率差異不明顯，但B處理貯藏20 d及30 d后感病率都顯著大于同一貯藏期的D處理（P≤0.05，n=3）。

圖3 熏蒸處理與未處理生姜感病率Fig.3 The infection rates of fumigation-treated ginger an d untreated ginger

3 討 論

本實驗所用材料取材自四川的兩個地區，而分離、篩選并鑒定后的病原菌卻是一致的。這說明該兩種病原菌可能在四川地區生姜貯藏期侵染性病害中具有普遍性。本實驗發現生姜貯藏期2 種病原菌分別為鐮刀菌屬和被孢霉屬微生物。澳大利亞學者Sti rling[13]研究表明鐮刀菌是生姜生長及貯藏期主要病原菌，并證明該病害主要由土壤傳播，該結論與本實驗結果相符。此外Overy等[14]也認為鐮刀菌是生姜貯藏期的主要病原菌。Fatima等[15]在報道中認為與生姜同 為根莖類蔬菜的胡蘿卜和芋頭也易在貯藏期內受到鐮刀菌侵染。

早在1971年澳大利亞學者Pegg和Moffett證明生姜生產中常見的姜瘟病是由細菌青枯假單胞桿菌（Pseudomonas solanacearum）引起的[16]。Hosoki等[17]發現生姜的軟腐病是由真菌Pythium aphanidermatum引起的，該菌還能引起瓜類、豆類及茄果類腐霉病。1974年Pegg又發現真菌尖孢鐮刀菌（Fusarium oxysporum）會引起生姜莖部腐敗[18]，而真菌Colletotrichum capsici能夠引起生姜炭疽病的病原菌[19]。在生產中常見病原菌僅有尖孢鐮刀菌與本工作分離到的病原菌具有較高的同源性，但進化樹顯示本工作中分離到的ljr4菌株與黃色鐮刀菌（Fusarium culmorum）親緣關系更近。因此，雖然本實驗中所使用的肉桂精油能較好抑制ljr4菌株生長繁殖，但 該精油或其他種類精油是否可以用于姜生產中的病害防治還有待進一步研究。生姜表面及組織內部攜帶有經土壤傳播的病原菌，這也是生姜采后致病微生物的主要來源。但貯藏過程中的致病微生物并不一定與生產過程中的致病菌完全相同，這可能是由于生姜生產中常見致病菌都需要較高的溫濕度條件，如30 ℃以上、相對濕度95%以上，而在貯藏過程中雖然濕度能夠滿足病原菌的生長繁殖，但是低溫的環境對某些病原菌是不利的。

鐮刀菌屬微生物在生長繁殖的過程中可能會產生毒素[20]。在進化樹分析中ljr4與黃色鐮刀菌親緣關系較近，黃色鐮刀菌已經被證明是產生鐮刀菌毒素DON（脫氧雪腐鐮刀菌烯醇）的主要菌種之一[21]，此外該屬微生物還能產生如玉米赤霉烯酮、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、串珠鐮刀菌素C和單端孢霉素類等，該類毒素能夠引起人類多種疾病[22]，因此分離自貯藏期生姜的ljr4產生鐮刀菌毒素的可能性較大。ljw2菌株為被孢霉屬微生物，該屬微生物未見產生毒素方面的報道，但是關于該屬微生物合成脂肪酸方面的報道較多[23]，而合成過程需要大量底物，可能會使生姜的營養品質降低，縮短貯藏期。

就兩種病原菌的危害分析，鐮刀菌對人體健康的潛在危害性更大。生姜被鐮刀菌侵染后發病癥狀較隱蔽，患病部位在感病初期不能觀察到明顯的菌絲，因此消費者可能因誤食受感染的生姜而攝入鐮刀菌毒素。因此在貯藏前及貯藏期控制該類病原菌能夠 有效降低食品安全事件發生的風險。

由于生姜在表皮有水滴的情況下容易腐敗，在其貯藏前及貯藏期殺菌處理中采用熏蒸方式更合理，所以本研究的藥敏性實驗及活體抑菌實驗均采用熏蒸方式進行。由于目前尚無精油抑制被孢霉屬微生物的報道，本實驗選擇對鐮刀菌屬微生物有較好抑制效果的6 種精油進行抑菌性試驗[24-25]，分別測試所選精油對2 種病原菌的抑菌效果。由于對經濟性因素的考慮，本實驗采用2 000 μL/L用量進行精油有效性的測試。供試精油中肉桂精油及百里香精油表現出對病原菌較好的抑制效果。該兩種精油已經廣泛的運用于果蔬[26]及肉類[27]保鮮，其中肉桂精油已被證明對與ljr4同屬的串珠鐮刀菌（Fusarium moniliforme）[28]及與ljw2親緣關系較近的根霉菌（Rhizopus sp.）、毛霉菌（Mucor dimorphosporus）[29]有較強的抑制作用。Alfonso等[30]也在研究中發現百里香精油對鐮刀菌屬微生物有較強的抑制作用。這些報道都與本實驗結果相符。茶樹精油對鐮刀菌抑制不明顯，與Hammer等[31]的報道不符，這可能是由于本實驗所使用的精油用量較低所致。

肉桂與百里香精油在2 000 μL/L用量下對ljw2及ljr4菌株生長抑制率均達到100%，其他供試精油在該用量下不能同時抑制兩種病原菌，且抑制單一病原菌的效果并未優于肉桂精油及百里香精油，所以本實驗在藥敏性實驗中僅比較了病原菌對該2種精油的敏感程度。由于保持生姜表皮干燥及獨特氣味的需要，藥敏性實驗中采用熏蒸法進行抑菌處理。

離體條件下肉桂精油熏蒸處理對ljr4及ljw2菌株的最低殺菌用量分別為125 μL/L和500 μL/L。在活體實驗中以此用量熏蒸處理3 d后的生姜感病率顯著低于對照組，說明熏蒸處理能夠有效抑制接種于生姜的病原菌。但熏蒸處理組在30 d時感病率仍分別為11%和9.67%，說明熏蒸處理后的生姜病原菌并未被完全抑制。Farbood等[32]研究發現抑制食品上的病原菌需要的精油用量大于體外抑菌所需精油用量。這與本實驗的結果一致，這可能是由于病原菌在其原本宿主上有更好的適應性，因此病原菌對殺菌劑的耐受性有所增強。但這并不能說明肉桂精油熏蒸在活體條件下效果不佳，因為本實驗所得到的感病率是基于接種病原菌后的抑菌實驗結果，而實際貯藏中使用的是經挑選后健康的生姜，其表面組織的單位體積含菌用量遠小于接種用量。

所以該用量的熏蒸理論上適用于生姜殺菌處理。在實際情況下，該用量的肉桂精油熏蒸處理更適合于貯藏前的殺菌操作，熏蒸時間為3～4 d。如果在貯藏期長期封閉的環境中使用，由于處理時間很長，可以降低用量進行熏蒸操作。

4 結 論

本實驗從貯藏中的生姜感病部位分離出的ljr4及ljw2真菌菌株表現出致病性，通過18S rDNA序列比對發現病原菌分別屬于鐮刀菌屬及被孢霉屬。其中ljr4菌株與黃色鐮刀菌親緣關系較近，產生鐮刀菌毒素的可能性較大，存在潛在的食品安全隱患。在已知對鐮刀菌屬有較強抑制作用的6種精油中，ljw2只對百里香及肉桂精油較敏感。藥敏性實驗證明肉桂精油熏蒸抑制該2種病原菌效果較好，肉桂精油熏蒸處理對ljr4及ljw2菌株的最低殺菌用量分別為125 μL/L及500 μL/L?；铙w抑菌實驗中125 μL/L用量肉桂精油熏蒸能降低接種ljr4菌株生姜的感病率至對照的1/6；500 μL/L用量肉桂精油熏蒸能降低接種ljw2菌株生姜的感病率至對照的1/7。肉桂精油是一種適用于生姜貯藏的熏蒸劑。

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Isolation, Identification and Inhibition of Pathogens from Mature Ginger during Storage

LIU Ji1,2, YAN Jing2, HE Jing-liu2, DONG Hong-min2, GUO Fei2, XIONG Ya-bo2, HUANG Ying2, QIN Wen2,*
(1. Agriculture Products Research Institute, Chengdu Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Chengdu 611130, China; 2. College of Food Science, Sichuan Agricultural University, Ya’an 625014, China)

This research was intended to isolate, purify, and identify the pathogens which cause ginger rotting during storage, to screen essential oils for controlling the pathogenic isolates, and to test their effectiveness. In this work, ljw2 and ljr4 were identif i ed as pathogens through isolation, purif i cation, and pathogenicity tests. The results of 18S rDNA sequence analysis showed that these fungi belonged to the genera Fusarium and Mortierella. Six essential oils, based on the pathogen genera, were investigated for their activity to control these pathogens. As results, cinnamon and thyme oil showed complete inhibitory effect on all pathogens at a concentration of 2 000 μL/L. Cinnamon oil showed higher antifungal activity in the drug sensitivity test. The minimal inhibitory concentrations (MIC) of cinnamon oil against these two pathogens were 64 and 32 μL/L, respectively. The minimal fungicidal concentrations of cinnamon oil against the pathogens were 125 and 500 μL/L, respectively. Compared with untreated samples, the infection rates of fumigation treatment samples declined by 59.33% (ljr4) and 47.33% (ljw2), respectively. Cinnamon oil seems to be a promising potential fumigant.

Fusarium; Mortierella; 18S rDNA; cinnamon oil; antibacterial effect

TS205.9

A

1002-6630（2014）18-0172-06

10.7506/spkx1002-6630-201418034

2013-12-26

劉繼（1984—），男，博士，研究方向為果蔬加工及貯藏。E-mail：liujidemail@sina.com

*通信作者：秦文（1967—），女，教授，博士，研究方向為果蔬加工及貯藏。E-mail：qinwen1967@aliyun.com.cn