癲癇患兒腸道黏膜通透性變化及益生菌的干預(yù)作用

杜開先，王軍芳，羅 予，婁季宇

癲癇是神經(jīng)系統(tǒng)的常見病、多發(fā)病，但其確切的發(fā)病機制目前仍不明確［1］。大多數(shù)患兒為了明確診斷或病因而需住院做進(jìn)一步檢查治療，研究表明癲癇患兒的醫(yī)院感染率遠(yuǎn)高于國內(nèi)外兒科病房醫(yī)院感染率，也高于國內(nèi)兒科神經(jīng)內(nèi)科組患兒醫(yī)院感染率［2］，對于癲癇患兒高感染率原因的研究還很少，本研究推測其與患兒腸道黏膜通透性發(fā)生變化有一定的關(guān)系，益生菌干預(yù)可改善癲癇患兒腸道黏膜通透性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2012年4月—2013年4月鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院收治的癲癇患兒120例為研究對象。入選標(biāo)準(zhǔn):根據(jù)國際抗癲癇聯(lián)盟 (ILAE)2005年提出的癲癇的新定義［3］，結(jié)合病史、腦電圖、影像學(xué)等資料由神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師診斷為癲癇的患兒納入研究。按入院時間隨機分為干預(yù)組64例，其中男36例、女28例，平均年齡 (2.4±1.5)歲，體質(zhì)量 (12.4±3.8)kg，癲癇病程 (3.02±2.48)個月，入院當(dāng)日發(fā)作次數(shù) (3.0±1.9)次;非干預(yù)組56例，其中男34例、女22例，平均年齡 (2.5±1.4)歲，體質(zhì)量(12.8±4.1)kg，癲癇病程 (3.04±2.45)個月，入院當(dāng)日發(fā)作次數(shù) (2.9±1.8)次。干預(yù)組在常規(guī)抗癲癇治療同時給予酪酸梭菌二聯(lián)活菌散，0.5 g/次，3次/d，口服。另選擇我院體檢健康的兒童30例為對照組，其中男18例、女12例，平均年齡 (2.5±1.2)歲，體質(zhì)量(12.9±3.4)kg。兩組患兒性別、年齡、體質(zhì)量、癲癇病程、病情，3組性別、年齡、體質(zhì)量具有均衡性。

1.2 血標(biāo)本的采集與檢測 治療前和治療1個月后空腹抽取靜脈血2 ml于肝素化的專用采血管，3 000 r/min離心10 min(離心半徑17.2 cm)分離血漿，－20℃保存待測。采用分光光度法測定二胺氧化酶，酶促法測定D－乳酸水平。二胺氧化酶標(biāo)準(zhǔn)品、5型紫外線分光光度計由美國珀金埃爾默公司生產(chǎn);BIO－RAD Model 680酶標(biāo)儀由美國BIO－RAD公司生產(chǎn)。

1.3 療效標(biāo)準(zhǔn) 以發(fā)作頻率減少的百分率為標(biāo)準(zhǔn)。完全控制:發(fā)作頻率減少100%。顯效:發(fā)作頻率減少≥50%。有效:發(fā)作頻度減少≥25%。無效:發(fā)作頻率減少＜25%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 12.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行處理。計量資料以 ()表示，多組間比較用方差分析，組間兩兩比較采用q檢驗;等級資料比較采用秩和檢驗。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3組治療前后二胺氧化酶及D－乳酸水平比較 3組治療前二胺氧化酶及D－乳酸水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05);其中干預(yù)組與非干預(yù)組二胺氧化酶及D－乳酸水平較對照組均升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05);干預(yù)組與非干預(yù)組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。3組治療1個月后二胺氧化酶及D－乳酸水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05);其中干預(yù)組二胺氧化酶及D－乳酸水平與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義 (P＞0.05);干預(yù)組和對照組較非干預(yù)組均降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05，見表1)。

2.2 治療1個月后癲癇控制情況比較治療1個月后兩組患兒癲癇控制情況比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義 (u=1.009，P=0.313，見表2)。

表2 治療1個月后兩組患兒癲癇控制情況比較 (例)Table 2 Comparison of epilepsy control after one month treatment of the two groups

3 討論

癲癇是大腦神經(jīng)元突發(fā)性異常放電導(dǎo)致短暫性大腦功能障礙的一種反復(fù)發(fā)作性疾病，是兒科神經(jīng)系統(tǒng)的常見病、多發(fā)病，嚴(yán)重影響患兒的生活質(zhì)量。許能鋒等［2］研究發(fā)現(xiàn)癲癇患兒醫(yī)院感染率為39.0%，遠(yuǎn)高于國內(nèi)外兒科病房醫(yī)院感染率 (國際上兒科病房醫(yī)院感染率為3%～17%，平均值為9%，我國為3.0%～13.6%)，也高于國內(nèi)兒科神經(jīng)內(nèi)科組患兒19.43%醫(yī)院感染率，表明癲癇是兒科醫(yī)院感染的高發(fā)疾病，但病因尚不完全清楚。近年來，研究證實胃腸黏膜是細(xì)菌易位和內(nèi)毒素入侵的重要“門戶”，腸道黏膜通透性的改變可能是導(dǎo)致內(nèi)源性感染及膿毒癥的基礎(chǔ)。

目前，腸道黏膜通透性常用的檢測方法主要有口服示蹤物法、血液指標(biāo)檢測法、腸黏膜形態(tài)學(xué)檢查及細(xì)菌移位等，常用的示蹤物主要有放射性同位素類、糖類、辣根過氧化物酶、蛋白質(zhì)類及聚乙二醇等［4］。

二胺氧化酶是哺乳動物腸黏膜上層絨毛細(xì)胞中具有高度活性的細(xì)胞內(nèi)酶，以小腸活性最高，在其他組織和細(xì)胞中幾乎不存在二胺氧化酶，血漿二胺氧化酶活性增高提示有腸黏膜通透性發(fā)生變化［5］。人體內(nèi)的乳酸主要為L－乳酸，D－乳酸含量極低，D－乳酸主要是由胃腸道細(xì)菌發(fā)酵產(chǎn)生的，腸道菌群中多種細(xì)菌均可產(chǎn)生，包括克雷伯菌、大腸埃希菌、乳酸桿菌屬和擬桿菌屬等。正常情況下腸道固有細(xì)菌代謝、裂解產(chǎn)生的D－乳酸很少被腸道吸收，但是當(dāng)腸道屏障功能障礙，腸道黏膜通透性增加時，腸道中的D－乳酸可以透過腸道黏膜進(jìn)入血液循環(huán)，使血漿D－乳酸水平升高［6］，并且人及哺乳動物不具備將其快速降解的酶系，因此檢測血漿D－乳酸水平可及時反映腸黏膜損害程度和通透性變化［7］。本研究結(jié)果顯示，干預(yù)組與非干預(yù)組二胺氧化酶及D－乳酸水平較對照組均升高。這可能與癲癇患兒反復(fù)發(fā)作使機體處于應(yīng)激狀態(tài)，導(dǎo)致腸黏膜缺血缺氧，從而引起腸黏膜通透性增高有關(guān)。表明癲癇患兒腸道黏膜通透性的增高可能是導(dǎo)致癲癇患兒高感染率的原因之一。

腸道黏膜通透性的變化與腸道黏膜的機械屏障、化學(xué)屏障、免疫屏障和生物屏障等的破壞有關(guān)，癲癇發(fā)作時引起膽汁分泌減少或腸肝循環(huán)紊亂，導(dǎo)致腸道功能紊亂及腸道細(xì)菌過度繁殖［8］;胃腸蠕動受到抑制或腸道攝氧受損，使腸道代謝下降，腸內(nèi)菌群失調(diào)，革蘭陰性菌過度繁殖，產(chǎn)生大量內(nèi)毒素，損傷腸黏膜。故本研究在常規(guī)抗癲癇治療的基礎(chǔ)上加用酪酸梭菌、雙歧桿菌二聯(lián)活菌對癲癇患兒進(jìn)行干預(yù)治療，1個月后，再次測定血漿二胺氧化酶及D-乳酸水平，干預(yù)組與對照組相比無差異，較非干預(yù)組降低。結(jié)果表明，補充益生菌可降低腸道黏膜通透性。其機制為:益生菌可通過平衡腸道菌群、增強腸上皮細(xì)胞再生及抑制腸上皮細(xì)胞凋亡［9-10］、調(diào)節(jié)腸黏膜免疫功能，從而在生物屏障、機械屏障、免疫屏障3個層次增強腸黏膜屏障，降低腸道黏膜通透性［11-12］。酪酸梭菌促進(jìn)腸道雙歧桿菌和乳桿菌等優(yōu)勢菌屬增殖，抑制腸腔多種致病菌或條件致病菌的生長繁殖，重新建立腸道黏膜的生物屏障［13-14］;酪酸梭菌釋放代謝產(chǎn)物酪酸、丁酸等，是腸道上皮細(xì)胞再生和修復(fù)的重要能量底物;酪酸梭菌促進(jìn)腸黏膜分泌sIgA，提高腸腔sIgA水平，參與免疫屏障［15］;雙歧桿菌可通過抑制腸道肥大細(xì)胞釋放顆粒造成的腸道黏膜損傷［16-17］，降低 Toll樣受體 (TLR)2、TLR4的表達(dá)［18］達(dá)到保護(hù)腸道黏膜作用。

表1 3組治療前后二胺氧化酶及D－乳酸水平比較 ()Table 1 Comparison of diamine oxidase and D－lactic acid levels before and after treatment of the three groups

表1 3組治療前后二胺氧化酶及D－乳酸水平比較 ()Table 1 Comparison of diamine oxidase and D－lactic acid levels before and after treatment of the three groups

注:與對照組比較，*P＜0.05;與干預(yù)組比較，△P＜0.05

組別 例數(shù) 二胺氧化酶(g/L)治療前 治療1個月后 個月后D－乳酸(mg/L)治療前 治療1對照組 30 24.13±5.70 24.13±5.70 16.40±3.47 16.40±3.47干預(yù)組 64 26.85±6.64* 25.01±5.37 18.52±4.34* 17.68±3.89非干預(yù)組 56 27.44±4.88* 26.94±5.12＊△ 18.89±4.45* 18.64±4.35＊△F 值0.039 0.026 0.028 0.048 3.308 3.728 3.654 3.099 P值

治療1個月后兩組患兒癲癇控制情況比較無差異。表明在抗癲癇治療過程中添加益生菌是否有利于控制驚厥發(fā)作尚需進(jìn)一步探討。

總之，癲癇患兒的反復(fù)發(fā)作可引起腸道黏膜通透性增加，控制癲癇發(fā)作、補充腸道益生菌可幫助改善腸黏膜屏障功能，恢復(fù)腸道黏膜通透性。

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