幾種畜產品安全檢測技術簡介

陳芬芬

湖北省恩施州動物衛生監督所，湖北恩施 445000

幾種畜產品安全檢測技術簡介

陳芬芬

湖北省恩施州動物衛生監督所，湖北恩施 445000

隨著人民生活水平的提高，肉、蛋、奶等動物性食品在人民膳食中所占的比例越來越高，如何吃的安全、食的放心是群眾關心的頭等大事，也給畜產品生產、加工及監管人員提出了更高的要求。做好畜產品質量安全監測是確保動物產品安全上桌前的重要環節，也是畜產品安全監管工作的重要內容。這就要求基層規模養殖場和屠宰場在依法做好安全生產的同時，做好自檢，確保畜產品出場前安全；同時，畜產品安全監管人員也要對各環節的畜產品進行抽檢，確保全程畜產品的安全，這就需要一些簡便、準確、高效的畜產品檢測技術。目前檢測畜產品質量安全的方法有很多，常用的包括免疫膠體金技術、酶聯免疫吸附測定技術、放射免疫測定技術、熒光免疫分析技術、化學發光免疫分析技術、高效液相色譜分析技術等。下面就這幾種畜產品安全檢測技術進行簡要介紹，以供參考。

1 免疫膠體金技術

羅－蛋白偶聯物的結合。如果樣本中鹽酸克倫特羅含量大于3 ng/mL，檢測線不顯色，結果判為陽性；反之，檢測線顯紅色，結果判為陰性。

基層屠宰企業和畜產品安全監管人員在用試紙條檢測“瘦肉精”時要注意以下幾個方面。一是使用前檢查試劑盒的組成是否齊全并核對名稱。不同的“瘦肉精”試劑盒不可混用。二是要正確儲存。應于2～30℃干燥陰涼處保存，不得凍存。三是要檢查有效期。過期試劑盒不可使用。四是樣品處理。用干燥、潔凈的容器采集50 mL左右尿液，如果不立即檢測，尿樣在2～8℃冷藏可保存24 h，應避免腐敗造成失效或污染。五是使用時將試劑盒恢復至室溫，嚴格按照說明書操作。六是結果判定。僅質控區（C）出現1條紫紅色條帶為陽性；出現2條紫紅色條帶為陰性；質控區（C）未出現紫紅色條帶，提示測試失敗或試紙已失效。七是出現陽性結果時應用本卡復檢并做陽性對照試驗，有條件的可同時用相同的ELISA試劑盒進行復檢。

免疫膠體金技術是一種常用的標記技術，是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。其優點是方便、快速、成本低、應用范圍廣、肉眼可判斷結果，便于基層使用和現場使用。目前該項技術在獸藥殘留、病原檢測、毒素檢測的定性分析等方面均已起到了積極作用，而在基層應用最廣泛的免疫膠體金技術就是“瘦肉精”快速檢測卡。

本文以鹽酸克倫特羅（“瘦肉精”）為例來介紹一下其基本原理，應用競爭抑制免疫層析的原理，樣本中的鹽酸克倫特羅在流動的過程中與膠體金標記的特異性單克隆抗體結合，占據了抗體結合位點，從而抑制抗體和NC膜檢測線上鹽酸克倫特

2 酶聯免疫吸附測定技術

酶聯免疫吸附測定（簡稱ELISA），過程包括抗原（抗體）物理吸附在固相載體表面，并保持其免疫學活性；加待測抗體（抗原），再加相應酶標記抗體（抗原），生成抗原（抗體）-待測抗體（抗原）-酶標記抗體的復合物；再與該酶的底物反應生成有色產物，借助ELISA檢測儀計算抗體（抗原）的量。待測抗體（抗原）的量與有色產物成正比。該方法具有速度快、靈敏度高、樣品容量大、樣品前處理簡單、儀器成本低、分析成本低等優點，適用于基層養殖場、屠宰場或獸醫實驗室檢測，對初步分析動物源性食品的獸藥殘留、霉菌毒素、微生物等方面的定性或半定量檢測具有重要作用。而基層最常用的就是用于畜產品中獸藥殘留的檢測，或判定畜產品是否含有“瘦肉精”等違禁藥物的檢測。現在國際上比較重視的殘留藥物有抗生素類、激素類、磺胺類、呋喃類、喹諾酮類和轉基因類藥物。

具體操作中要注意以下幾個方面。一是ELISA檢測試劑盒要保存在2～8℃下，使用前從冰箱拿出充分恢復至室溫（18～25℃）；二是操作前仔細閱讀說明書和操作步驟，將每一步所需的試劑分類放好，切忌試劑混用；三是根據說明書上的反應溫度調好可調控恒溫箱的溫度；四是樣品若有沉淀，要先進行離心處理，取上清液進行反應；五是用加樣器加樣速度要快而準，防止反應板上的前后孔反應時間相差太長，造成誤差，影響檢測結果；六是洗板用水應用高質量的蒸餾水配制；七是若有標準曲線，最好加兩列標準液，加好陽性對照和陰性對照樣品；八是出現陽性結果時，應利用本試劑盒加復孔重復驗證。

3 放射免疫測定技術

放射免疫測定（RIA）技術是用放射性同位素作為標記物，將同位素分析的靈敏性和抗原抗體反應的特異性結合起來的一種標記技術。該方法測定靈敏度高，結果準確，適用性廣，速率較快，操作易自動化。目前在畜產品安全檢測方面已應用在人工合成激素、氯霉素等的檢測，但在使用時需要專門的儀器設備且價格昂貴，同時RIA測定還會產生不可忽視的放射性污染，基層使用較少。

4 化學發光免疫分析技術

化學發光免疫分析技術是將具有高靈敏度的化學發光測定技術與高特異性的免疫反應相結合，用于各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素、藥物等的檢測分析技術。該技術是繼RIA、ELISA、熒光免疫分析之后發展起來的一項最新免疫測定技術，主要具有靈敏度高、特異性強、試劑價格低廉、試劑穩定且有效期長、方法穩定快速、檢測范圍寬、操作簡單、自動化程度高等優點。可應用于獸藥殘留、畜產品中微生物的測定等，但在畜產品安全檢測方面，這是一項新測定技術，還未在基層廣泛應用。但由于其優點眾多，隨著科技的發展和操作人員素質的提高，其應用于基層畜產品安全檢測指日可待。

5 高效液相色譜分析技術

高效液相色譜（HPLC）分析技術以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。其優點是專屬性好、選擇性強、檢測精確度較高，而且假陽性率低，目前主要應用于磺胺類藥物、恩諾沙星、環丙沙星、沙拉沙星、達氟沙星等獸藥殘留的檢測。但是這種方法樣品處理時間長、檢測過程繁瑣、需貴重儀器、需要專業人員操作，在實際應用中受到一定的限制。

6 高效液相色譜-質譜聯用技術

高效液相色譜-質譜聯用（HPLC-MS）技術以液相色譜作為分離系統，質譜作為檢測系統，經純化后的樣品在液相色譜和質譜部分經過分離和離子化，經由檢測器得到質譜圖。該技術具有高分離能力、高選擇性、高靈敏度、能夠提供相對分子量和結構信息的優點，主要用于β-受體激動劑、硝基呋喃類代謝物等物質的確證檢測。這種方法同樣具有樣品處理時間長、檢測過程繁瑣、需貴重儀器、需要專業人員操作等局限性，在基層應用中受到一定的限制。

7小 結

綜上所述，免疫膠體金法和ELISA檢測法由于其操作簡便和安全性高，是最適用于基層畜產品安全檢測的兩種技術，也已在基層獸醫檢測中得到廣泛應用。但因其檢測準確率和靈敏度存在一定的缺陷，可作為基層畜產品安全檢測的初步篩選方法。一旦樣品被上述兩種方法重復檢測為陽性，應立即由官方獸醫按法定程序分裝動物肉品、內臟或動物尿液樣品送農業部指定的實驗室用于確證法檢測。

2014-07-30

陳芬芬，女，1983年生，碩士，中級獸醫師。