腫節風有效成分檢測方法研究概述

康夢瑩，馬家寶，陳小媛，梁建麗，陳 勇

(廣西中醫藥大學，廣西 南寧 530002)

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腫節風有效成分檢測方法研究概述

康夢瑩，馬家寶，陳小媛，梁建麗，陳 勇*

(廣西中醫藥大學，廣西 南寧 530002)

對近年來腫節風有效成分黃酮類、香豆素類、有機酸類、皂苷類、揮發油類、多糖類等檢測方法的相關文獻進行分析總結，以便充分開發利用腫節風類藥物資源，為腫節風及其制劑提供綜合性、可量化的質量評價方法。

腫節風；有效成分；檢測方法

腫節風(Sarcandraglabra)又名草珊瑚、接骨金粟蘭、九節風、九節茶、九節蘭、節骨茶等，為金粟蘭科(Chloranthaceae)植物草珊瑚(Sarcandraglabra(Thunb.)Nakai)的干燥全草[1]，是《中華人民共和國藥典》2005年版一部收載的法定藥材。腫節風味苦、辛，性平，歸心、肝經，具有清熱涼血、活血消斑、祛風通絡作用，可用于治療血熱紫斑、紫癜、風濕痹痛、跌打損傷等病癥[2]。現有研究表明腫節風的化學成分主要包括黃酮類(異甘草素、異甘草苷、7-O-甲基柚皮素)、香豆素類(異嗪皮啶、嗪皮啶、嗪皮苷) 、有機酸類(反丁烯二酸、綠原酸)、倍半萜類(白術內酯)以及揮發油類等，因此其藥理作有也具有多樣性[3]。現就近年來腫節風中各有效成分檢測方法的研究情況綜述如下。

1 化學成分

1.1 黃酮類

腫節風中總黃酮含量較高，其中以葉的含量最高，根其次，莖最低。黃酮類化合物是腫節風重要的有效成分，有明確的藥理作用[4]，其檢測方法主要以紫外分光光度法為主。

黃明菊等[5]采用紫外光譜儀、紅外光譜儀以及核磁共振儀從腫節風水提物中測得落新婦苷等5個黃酮苷類化合物，以及首次測得3個葡萄糖醛酸類化合物。童家賀等[6]采用薄層色譜對乙酸乙酯提取部位進行鑒別，并結合高效液相色譜測定總黃酮含量，對藥材質量進行了考查，發現不同產地腫節風藥材所含成分及總黃酮含量差異較大。譚健兵等[7]以高效液相色譜法測定腫節風藥材中山柰酚-3-O-葡萄糖醛酸苷及異秦皮啶的含量，首次建立山柰酚-3-O-葡萄糖醛酸苷與異秦皮啶的含量測定方法, 專屬性較強, 為腫節風藥材多指標質量標準的建立提供了依據。李可強[8]采用HPLC法測定中藥材腫節風中黃酮類成分落新婦苷及柚皮苷的含量，以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)為流動相, 采用梯度洗脫，檢測波長為290nm，落新婦苷及柚皮苷的平均回收率分別為97.3%、95.6%,RSD分別為2.2%、2.3%,為腫節風黃酮類有效化合物的鑒定提供了又一有效依據。

1.2 香豆素類

腫節風香豆素類成分主要為異秦皮啶,在體外活性實驗中顯示出一定的抑制腫瘤細胞作用。異秦皮啶是藥典中腫節風主要質量標準之一。

羅奇志等[9]采用高效液相色譜-電噴霧串聯質譜，以乙腈-11%甲酸水溶液梯度洗脫,紫外和電噴霧質譜同時在線檢測，全離子掃描模式掃描,對每一組分峰進行質譜分析，鑒定出異秦皮啶等5個化學成分，此技術無需繁瑣、復雜的提取分離即能推斷出大量化合物的分子量、結構信息,對認識中藥化學成分的全貌有其突出優勢,更有利于化合物的確認。周斌等[10]利用高效液相色譜測定腫節風不同部位中異嗪皮啶的含量，結果顯示，腫節風藥材根中異嗪皮啶含量較高，葉中含量較低。吳鐵榮等[11]以異嗪皮啶為研究對象，建立腫節風藥材中該成分與新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸、迷迭香酸的相對校正因子，利用相對校正因子計算六種成分的含量，實現一測多評。此方法操作簡單，專屬性及重復性好，實現了只用異嗪皮啶一種對照品同時測定新綠原酸、綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸、迷迭香酸的含量。王菲等[12]采用硅膠柱層析, 以環己烷-乙酸乙酯溶劑系統等梯度洗脫方法，將抗腫瘤活性成分洗脫分離出來，并用核磁共振儀、質譜儀進行測定，共得13個化合物。通過獲得的1H NMR與13C NMR圖譜分析，首次發現了3,3'-雙異秦皮定、白術內酯III等4個新化學成分。

1.3 有機酸類

有機酸是目前發現的中草藥抗菌消炎活性成分比較多的一類，其中反丁烯二酸及綠原酸也是目前腫節風主要的質量控制指標之一。

羅永東等[13]利用快速溶劑萃取結合液質聯用技術，以正負離子全掃描模式檢測腫節風藥材中的化學成分，準確鑒定了反丁烯二酸及綠原酸等9種化學成分，為腫節風藥材化學成分的快速篩選提供了方法。陳東鴻等[14]采用薄層色譜及高效液相色譜法對腫節風藥材進行鑒定及含量測定，在中國藥典2010年版一部腫節風標準的基礎上，增加了腫節風中迷迭香酸、反丁烯二酸、綠原酸的薄層色譜鑒別和特征圖譜，其中綠原酸與對照品相比，斑點清晰且含量較高。盧瑞枝等[15]采用高效液相色譜方法測定，流動相為乙腈-0.1%磷酸水溶液(13∶87),在流速為0.5mL/min、檢測波長為327nm情況下建立測定方法，平均加樣回收率為100.19%，RSD為1.47%，是腫節風有機酸類有效的測定方法。張廣財等[16]采用高效液相色譜波長切換法同時測定腫節風中反丁烯二酸、異秦皮啶和落新婦苷多指標成分的含量，此實驗成功實現了同時測定3種指標性成分，減少了檢測時間，并且操作方便，重復性好。

1.4 倍半萜類

黎雄等[17]利用硅膠柱色譜、凝膠柱色譜、ODS柱色譜及液相色譜等分離技術從腫節風70%乙醇提取物的正丁醇和乙酸乙酯萃取部分分離得到4個倍半萜內酯類成分。

1.5 揮發油

腫節風揮發油具有抗腫瘤活性，其中β-欖香烯是鮮腫節風揮發油的主要成分。

楊榮平等[18]采用水蒸氣蒸餾法分別對腫節風的莖和葉進行提取, 將提取物的化學成分經氣相色譜-質譜(GC- MS)法進行分離鑒定，用歸一化法計算各組分的相對百分含量。共從腫節風莖揮發油中鑒定出29種化合物, 其含量占總揮發油的75.88%；從腫節風葉揮發油中鑒定出64種化合物, 其含量占總揮發油的87. 98%。吳素香等[19]利用TLC 鑒別及HPLC 含量測定鮮腫節風揮發油中β-欖香烯成分，可作為檢測腫節風揮發油β-欖香烯的有效方法。張勝娜等[20]利用毛細管氣相色譜, 選擇適宜的程序升溫條件對鮮腫節風揮發油進行分析, 獲得了較為理想的包含特征信息的鮮腫節風揮發油GC指紋圖譜。

1.6 多糖

金磊等[21]采用超聲提取法制備腫節風多糖，并將在發酵條件優化方面體現出重要應用價值的響應面優化法(RSM)應用到多糖制備的工藝研究中，利用對紫外分光光度計測得的實驗數據進行多元二次回歸來擬合影響因素與響應值之間的函數關系，通過對回歸方程的分析尋求最優工藝參數。

1.7 其它

從腫節風中分離得到的化合物還有胡蘿卜苷(β- sitosteryl-D-glucoside)、β-谷甾醇和白樺脂酸(betulinic acid)等[22-24]。李先春等[25]分別用原子吸收光譜法、紫外可見分光光度法及X-射線熒光法測定了腫節風中Zn、Se、Cu、Mn、Fe 、Mg 等微量元素的含量，萃取-熒光法、萃取-光度法、原子吸收光譜法分別用于測定了腫節風中硒的含量。

2 結語

腫節風中化學成分復雜，含有有機酸類(包括綠原酸和反丁烯二酸)、黃酮類、香豆素類(異秦皮啶)、揮發油類、多糖類及其它成分等，以反丁烯二酸和異秦皮啶為主，并以異秦皮啶含量高低來評價腫節風品質的優劣，但異秦皮啶并不代表腫節風的全部成分。其有效成分檢測方法主要為紫外可見分光光度法、高效液相色譜法、高效毛細管電泳法、高效液相指紋圖譜等。目前雖然對于腫節風有效成分分析及檢測方法的研究取得了一定進展，但仍然存在不足，如國內對腫節風化學成分的研究主要集中在對其黃酮類、香豆素類及揮發油類的研究，對其它研究較少；此外，腫節風具有多種藥理活性，因此有必要深入研究其它活性成分的化學結構及構效關系、定量方法，全面評價藥材的質量，以便充分開發利用腫節風藥用植物資源，為腫節風及其制劑提供綜合的和可量化的質量評價方法。

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(責任編輯：魏 曉)

2014-03-05

康夢瑩(1990-)，女，廣西中醫藥大學碩士研究生，研究方向為藥物質量標準。

陳勇(1961-)，男，廣西中醫藥大學藥學院教授，研究方向為中藥質量評價與分析。

R284

A

1673-2197(2014)13-0043-02