三葉因子1與胃癌的中西醫(yī)研究進(jìn)展

鄧慶圓,陳國(guó)忠

(1.廣西中醫(yī)藥大學(xué),廣西 南寧530001;2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧530001)

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三葉因子1與胃癌的中西醫(yī)研究進(jìn)展

鄧慶圓1,陳國(guó)忠2*

(1.廣西中醫(yī)藥大學(xué),廣西 南寧530001;2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧530001)

胃腸黏膜的慢性損傷是胃腸道腫瘤發(fā)生的病理基礎(chǔ)，因此快速修復(fù)受損的上皮細(xì)胞對(duì)預(yù)防腫瘤的發(fā)生具有非常重要的意義。三葉因子家族作為胃腸道腔內(nèi)因子，在胃腸道的保護(hù)和修復(fù)中發(fā)揮著重要作用，近年來(lái)大量的研究表明TFF1與胃癌的關(guān)系密切，是重要的抑癌基因。就TFF1的表達(dá)、功能及與胃癌關(guān)系做一綜述。

三葉因子1;胃癌;研究進(jìn)展

三葉因子家族是一種由胃黏液細(xì)胞分泌的小分子調(diào)節(jié)肽，其分子具有特定的三葉草結(jié)構(gòu)域，具有保護(hù)胃腸黏膜、誘導(dǎo)細(xì)胞分化及抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用。其中，TFF1作為胃腸道腫瘤的抑制因子，探討其在胃黏膜損傷中發(fā)揮的作用及其機(jī)制，具有重要的臨床意義。

1 TFF1結(jié)構(gòu)及功能

TFF1在人體乳腺癌細(xì)胞MCF-7中獲得，包括3個(gè)外顯子、2個(gè)內(nèi)含子和2個(gè)轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子，位于21q22.3染色體上。每個(gè)TFF1分子由60個(gè)氨基酸組成，含有7個(gè)半胱氨酸殘基，二級(jí)結(jié)構(gòu)由α螺旋和2個(gè)反向平行折疊組成，經(jīng)二硫鍵相互連接，形成三葉域結(jié)構(gòu)。該結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性使TFF1在胃腸道中具有耐高溫、抗酸及抗蛋白酶水解的特性。TFF1通過(guò)與糖蛋白結(jié)合，減少有害物質(zhì)對(duì)黏膜的損傷，起到保護(hù)和防御的作用。TFF1的3種存在形式為單聚體、二聚體及具有較強(qiáng)生物活性的復(fù)合體，其中復(fù)合體能增加TFF1的活性和延長(zhǎng)半衰期。TFF1可與受體及轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白結(jié)合而產(chǎn)生作用。TFF1還具有黏膜修復(fù)功能，機(jī)制可能與其促進(jìn)細(xì)胞移行相關(guān)[1]。

2 TFF1與胃癌

1996年，Lefebvre將小鼠TFF1基因敲除后，其上皮細(xì)胞過(guò)度增生，突變的小鼠胃竇或幽門(mén)部出現(xiàn)腺瘤，30%進(jìn)展為上皮或黏膜多病灶癌[2]，表明TFF1可能是一種胃特有的腫瘤抑制因子。

2.1 在胃癌中的表達(dá)

TFF1在彌漫型胃癌中表達(dá)，而在腸型胃癌中表達(dá)降低或缺失。計(jì)敏等[3]應(yīng)用免疫組化法分析胃癌組織中TFF1的表達(dá)情況，胃癌組織TFF1的表達(dá)減少，其表達(dá)強(qiáng)度與癌組織的分化程度呈正比，分化程度越低，表達(dá)越少。研究表明TFF1在正常胃黏膜中表達(dá)最高，在上皮不典型增生至胃癌發(fā)展中逐漸下降，提示TFF1表達(dá)的降低也許是胃腸道腫瘤病變中的一個(gè)早期事件，對(duì)胃癌早期診斷和治療有一定意義。

2.2 機(jī)制

目前認(rèn)為，胃癌中TFF1的表達(dá)下降主要與雜合子丟失及啟動(dòng)子的甲基化有關(guān)。最早通過(guò)等位基因研究發(fā)現(xiàn)在胃腺癌細(xì)胞中許多染色體存在雜合子丟失，包括21號(hào)染色體長(zhǎng)臂。Carvalho[4]檢測(cè)到所有出現(xiàn)雜合子丟失的病例均不表達(dá)TFF1，進(jìn)一步證實(shí)了雜合子丟失是胃癌中TFF1表達(dá)降低的機(jī)制之一。DNA甲基化主要表現(xiàn)為基因組甲基化水平降低和局部CpG島甲基化的異常升高，后者阻斷DNA與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，導(dǎo)致TFF1抑癌基因轉(zhuǎn)錄和表達(dá)沉默，進(jìn)而參與胃癌發(fā)生發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn)在TFF1陰性的胃癌細(xì)胞中，TFF1啟動(dòng)子CpG島出現(xiàn)甲基化現(xiàn)象，而在陽(yáng)性細(xì)胞中不存在。對(duì)于TFF1基因突變是否在胃癌中發(fā)揮作用仍存在爭(zhēng)議。此外，其他一些轉(zhuǎn)錄因子異常表達(dá)也可能與TFF1的下調(diào)有關(guān)，有待進(jìn)一步證實(shí)。

2.3 TFF1與Hp

醫(yī)學(xué)界普遍認(rèn)為，Hp感染與胃癌發(fā)生有重要關(guān)系，在癌前病變中，Hp感染作為一種刺激因素，加劇了TFF1的表達(dá)；而在胃癌中，TFF1表達(dá)與Hp感染無(wú)明顯相關(guān)，可能由于癌細(xì)胞破壞了分泌TFF1的黏液細(xì)胞，使Hp感染這個(gè)刺激因素顯得不足。

2.4 TFF1與胃癌診斷治療

Mori等[5]發(fā)現(xiàn)胃癌患者的腹腔灌洗液中含有TFF1和TFF2基因，對(duì)于預(yù)測(cè)早期轉(zhuǎn)移和不可切除病變有重要價(jià)值。Sonoda等[6]用TFF1和MUC2共行RT-PCR檢測(cè)33例早期胃癌的淋巴結(jié)標(biāo)本的TFF1 mRNA表達(dá)，結(jié)果顯示在病理陰性的標(biāo)本中，有部分表達(dá)TFF1，而非胃癌淋巴結(jié)標(biāo)本則不表達(dá)TFF1，其陽(yáng)性率較單用MUC2檢測(cè)高，從而提出檢測(cè)TFF1 mRNA可成為今后檢查淋巴結(jié)微灶轉(zhuǎn)移的方法，并有可能作為判斷早期胃癌是否行內(nèi)鏡下切除的指征。

3 中醫(yī)研究進(jìn)展

中醫(yī)認(rèn)為癌瘤形成的原因是：內(nèi)外致病因素致使機(jī)體陰陽(yáng)失衡，正氣虛弱，機(jī)體功能失常，氣血運(yùn)行失調(diào)，可致痰濁瘀血的內(nèi)生，日久發(fā)生腫瘤，而邪毒盤(pán)踞，不斷掠奪人體氣血津液以自養(yǎng)，導(dǎo)致臟腑失去氣血津液濡潤(rùn)，以致正氣虧虛，又易致惡性腫瘤迅速生長(zhǎng)、擴(kuò)散及轉(zhuǎn)移，從而形成惡性循環(huán)。中醫(yī)藥在治療胃癌上具有很大的優(yōu)勢(shì)，有增強(qiáng)胃黏膜屏障作用、促進(jìn)黏膜修復(fù)重建、改善胃黏膜血流等作用，能緩解臨床癥狀，配合手術(shù)治療，減輕放化療毒副反應(yīng)，提高治療有效率，延長(zhǎng)生存時(shí)間。

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，當(dāng)大鼠胃黏膜受到損傷后，自我防御能力下降，補(bǔ)中益氣湯可通過(guò)促進(jìn)TFF1 mRNA與蛋白的表達(dá)來(lái)提高胃黏膜抵抗力，降低各種攻擊因素導(dǎo)致的易損性，降低胃黏膜的高敏感性，并促進(jìn)損傷胃黏膜的重建及修復(fù)，這可能是補(bǔ)中益氣湯保護(hù)胃黏膜的機(jī)理之一。陳國(guó)忠等發(fā)現(xiàn)七方胃痛顆粒可上調(diào)對(duì)Hp感染的胃癌細(xì)胞TFF1 mRNA和蛋白的表達(dá), 并與藥物濃度成正比，這可能是七方胃痛顆粒抑制Hp感染, 促進(jìn)上皮修復(fù), 防治Hp誘發(fā)胃癌的可能機(jī)制之一。還有研究發(fā)現(xiàn)，TFF1在不同證型胃黏膜組織表達(dá)有差異，說(shuō)明基因有可能決定中醫(yī)證型。

4 總結(jié)與展望

TFF1發(fā)現(xiàn)20余年來(lái)，已受到越來(lái)越多的重視，TFF1具有保護(hù)胃腸道黏膜的功能，在胃腸道腫瘤細(xì)胞中有抗增殖及抗凋亡的雙重活性，故有人認(rèn)為其抗癌作用可能是促癌/抑癌潛能的綜合結(jié)果。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，可從基因組和蛋白質(zhì)組方面進(jìn)行深入的研究，為病理生理及臨床的研究提供了新的途徑，而對(duì)于TFF1在胃癌發(fā)展過(guò)程中的作用機(jī)制及傳導(dǎo)通路仍是今后的重點(diǎn)研究方向。

[1] 盧雅丕，任建林.三葉因子基因表達(dá)調(diào)控相關(guān)因子[J].世界華人消化雜志，2006,14(30)：2907-2912.

[2] LEFEBVRE O, CHENARD MP, MASSON R,et al. Gastric mucosa abnormalities and tumorigenesis inn mice lacking the pS2 trefoil protein[J].Science, 1996,274(5285): 259-262.

[3] 計(jì)敏，鄒輝建，陳 茜，等.三葉因子1在不同胃黏膜病變中的表達(dá)[J].實(shí)用診斷與治療雜志，2006,20(12):879-880.

[4] CARVALHO R, KAYADEMIR T, SOARES P,et al. Loss of heterozygosity and promoter methylation, but not mutation, may underlie loss of TFF1 in gastric carcinoma[J]. Lab Invest, 2002, 82(10): 1319-1326.

[5] MORI K, SUZUFI T, UOZAKI H,et al.Detection of minimal gastric cancer cells in peritoneal washings by focused microarray analysis with multiple markers: clinical implications[J].Ann Surg Oncol, 2007, 14(5): 1694-1702.

[6] SONODA H,YAMAMOTO K,KUSHIMA R,et al. Detection of lymph node micro metastasis in pN0 early gastric cancer: efficacy of duplex RT-PCR with MUC2 and TFF1in mucosal cancer[J]. Oncol Rep, 2006,16(2): 411-416.

(責(zé)任編輯：李嵐春)

2014-02-28

國(guó)家自然科學(xué)基金(81260529)

鄧慶圓(1986-)，女，廣西中醫(yī)藥大學(xué)碩士研究生，研究方向?yàn)橹嗅t(yī)藥治療脾胃病。

陳國(guó)忠(1970-)，男，廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院主任醫(yī)師，研究方向?yàn)橹嗅t(yī)藥治療脾胃病。

R735.2

A

1673-2197(2014)10-0049-02