花葉九節(jié)木中脂溶性成分的GC-MS分析*

陸國(guó)壽盧文杰②譚曉黃建猷黃周鋒

花葉九節(jié)木中脂溶性成分的GC-MS分析*

陸國(guó)壽①盧文杰①②譚曉①黃建猷①黃周鋒①

目的：探明花葉九節(jié)木中脂溶性成分的化學(xué)成分。方法：采用硅膠柱層析法、甲酯化法、GC-MS-計(jì)算機(jī)聯(lián)用等技術(shù)手段對(duì)花葉九節(jié)木中的脂溶性成分進(jìn)行分析和鑒定。結(jié)果：分離出41個(gè)組分，鑒定并確認(rèn)了其中的14個(gè)成分，主要成分為油酸（23.18%）、γ-谷甾醇（17.86%）、亞油酸（11.79%）、棕櫚酸（10.98%）。這些成分均為首次在該植物中鑒定出。結(jié)論：本研究的完成為花葉九節(jié)木的進(jìn)一步開發(fā)和利用提供了科學(xué)的依據(jù)。

花葉九節(jié)木； 脂溶性成分； 氣-質(zhì)聯(lián)用

花葉九節(jié)木為茜草科植物花葉九節(jié)木Psychotria siamica （Craib） Hutch.的全株，別名駁骨草、小功勞、百樣化、茶山蟲。壯文名為Gomwnlaeq。《中國(guó)壯藥學(xué)》《廣西本草選編》《廣西藥用植物名錄》《中華本草》均將其收錄[1-4]，分布于廣西，云南等地。《中國(guó)壯藥學(xué)》認(rèn)為其性苦、涼，具有清熱解毒，祛風(fēng)止痛的功效，用于感冒、腸炎、痢疾、風(fēng)濕骨痛、跌打骨折[1]。《廣西藥用植物名錄》認(rèn)為其全株可用于肝炎、骨折、小兒疳積、腸炎、痢疾；葉可消腫，用于疔瘡、燙傷[3]。

目前，國(guó)內(nèi)外對(duì)花葉九節(jié)木化學(xué)成分方面的研究尚未見報(bào)道。為了充分開發(fā)和利用花葉九節(jié)木這一藥材資源，本研究采用了溶劑提取、硅膠柱層析等方法得到其脂溶性成分、并將其脂溶性成分進(jìn)行甲酯化，再采用氣相色譜-質(zhì)譜-計(jì)算機(jī)聯(lián)用技術(shù)（GC-MS-計(jì)算機(jī)）對(duì)其脂溶性成分進(jìn)行分析和鑒定，結(jié)果分離出41個(gè)組分，鑒定并確認(rèn)了其中的14個(gè)成分。

1 材料與方法

1.1 藥物來源 花葉九節(jié)木藥材采于廣西宜州市，由廣西中醫(yī)藥研究院饒偉源副主任藥師鑒定為花葉九節(jié)木Psychotria siamica （Craib） Hutch.。

1.2 儀器 儀器為美國(guó)Agilent Technologies公司HP6 890 GC/5973 MS氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。石油醚（60～90 ℃）、乙酸乙酯、苯、甲醇、氫氧化鈉等均為國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?/p>

1.3 方法

1.3.1 溶劑提取及硅膠柱層析 （1）取花葉九節(jié)木的干藥材10.0 kg，粉碎，經(jīng)95%乙醇加熱回流提取至提取液近無色，合并提取液，減壓回收乙醇，回收乙醇后的提取液濃縮，得流浸膏。流浸膏加硅膠拌樣，依次用石油醚（60～90 ℃）、三氯甲烷、乙酸乙酯回流提取，各提取液分別回收溶劑后得石油醚（60～90 ℃）部位、三氯甲烷部位、乙酸乙酯部位，備用。（2）石油醚部位經(jīng)硅膠柱層析，石油醚-乙酸乙酯混合溶劑（100：0→70：30）梯度洗脫，每份接收1000 mL，得148個(gè)流份，其中第1～39流份為半固體油狀物，備用。（3）三氯甲烷部位經(jīng)硅膠柱層析，三氯甲烷-甲醇混合溶劑（100：0→90：10）梯度洗脫，每份接收1000 mL，得82個(gè)流份，其中第1～30流份為半固體油狀物，備用。

1.3.2 甲酯化方法 將花葉九節(jié)木石油醚部位及三氯甲烷部位硅膠柱層析得到的半固體油狀物合并[5]，稱取油狀物128 mg，加石油醚（60～90 ℃）-苯（體積比1：1混合）20 mL使其溶解并轉(zhuǎn)移至100 mL圓底燒瓶中；加現(xiàn)配的0.4 mol/L KOH-MeOH溶液10 mL，搖勻，于55 ℃恒溫水浴30 min；停止加熱并冷卻至室溫，加純凈水20 mL，振搖，靜置分層，取上清液；上清液使用無水硫酸鈉脫水，過濾，濾液作為色譜分析試樣。

1.4 GC-MS分析條件

1.4.1 GC條件 HP-5MS石英毛細(xì)管柱（30 mm×0.25 mm× 0.25 mm）；柱溫：起始溫度150 ℃，程序升溫3～260 ℃/min，保持40 min；柱流量為1.0 mL/min；進(jìn)樣口溫度250 ℃；柱前壓100 kPa；進(jìn)樣量1.0 mL；分流比10：1；載氣為高純氦氣。

1.4.2 MS條件 電離方式EI；電子能量70；傳輸線溫度250 ℃；離子源溫度230 ℃；四極桿溫度150 ℃；質(zhì)量范圍35～500；采用wiley7n.l標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)檢索定性。

2 結(jié)果

經(jīng)GC-MS檢測(cè)，共分離出41個(gè)組分，鑒定并確認(rèn)了其中的14個(gè)成分，主要成分為油酸（23.18%）、γ-谷甾醇（17.86%）、亞油酸（11.79%）、棕櫚酸（10.98%）。這些成分均為首次在該植物中鑒定出。樣品的總離子流圖（TIC）見圖1；測(cè)試所得的各個(gè)成分的質(zhì)譜圖經(jīng)計(jì)算機(jī)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫(kù)檢索和對(duì)照，并按面積歸一化法分析各組分的相對(duì)百分含量，見表1。

圖1 樣品的總離子流圖（TIC）

表1 花葉九節(jié)木脂溶性成分的GC-MS分析結(jié)果

3 討論

通過提取分離并采用GC-MS-計(jì)算機(jī)分析，從花葉九節(jié)木脂溶性部位中檢出41個(gè)組分，鑒定并確認(rèn)了其中的14個(gè)成分，這些成分均為首次在該植物中報(bào)道。花葉九節(jié)木中脂溶性成分的主要化學(xué)成分以脂肪酸類化合物及甾醇類化合物類化合物含量最高，其中主要為油酸、γ-谷甾醇、亞油酸、棕櫚酸，含量分別為23.18%、17.86%、11.79%、10.98%。油酸為不飽和脂肪酸，現(xiàn)代應(yīng)用上通常將其作為中間體進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，再用于食品、制藥等行業(yè)，如制成蔗糖油酸酯、油酸甘油酯作為乳化劑，制成油酸乙醇胺用于治療食道靜脈曲張出血[6-11]。亞油酸由于能與膽固醇結(jié)合并轉(zhuǎn)化為膽酸排出體外，從而起到降低血中低密度脂蛋白、極低密度脂蛋白及甘油三酯水平的作用，故在醫(yī)學(xué)上將其應(yīng)用于治療Ⅱ型高脂蛋白血癥。棕櫚酸為飽和脂肪酸，研究表明其具有誘導(dǎo)人成骨肉瘤細(xì)胞MG63凋亡的作用[12]。

上述結(jié)果表明，花葉九節(jié)木脂溶性成分中的主要成分有著較高研究意義的生物活性，具有一定的開發(fā)利用價(jià)值。本研究的完成能在一定程度上促進(jìn)花葉九節(jié)木的進(jìn)一步開發(fā)和利用。

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GC-MS Analysis of Liposoluble Components from Psychotria Siamica （Craib） Hutch/

LU Guo-shou，LU Wen-jie，TAN Xiao，et al.//Medical Innovation of China，2014，11（12）：105-106

Objective：To analyze liposoluble components from Psychotria siamica （Craib） Hutch.Method：The liposoluble components from Psychotria siamica （Craib）Hutch were isolated by silica gel column chromatography and analyzed by GC-MS-DS after methyl esterification.Result：41 components were separated and 14 of them were identified. The primary components were 9-Octadecenoic acid （23.18%）， γ-Sitosterol（17.86%）， 9， 12-Octadecadienoic （11.79%），Hexadecanoic acid （10.98%）. All the compounds were identified from the plant for the first time.Conclusion：This research provide a scientific basis of the development and utilization on Psychotria siamica （Craib）Hutch.

Psychotria siamica （Craib）Hutch； Liposoluble components； GC-MS

10.3969/j.issn.1674-4985.2014.12.040

2014-01-09） （本文編輯：蔡元元）

廣西中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)性研究課題（桂中重系201308）

①?gòu)V西中醫(yī)藥研究院 廣西 南寧 530022

②廣西中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

盧文杰

First-author’s address：Guangxi Institute of Traditional Medical and Pharmaceutical Sciences，Nanning 530022，China